目的優(yōu)化蛋白桑葉多酚提取工藝,并評價其抗氧化、抑菌活性。方法在單因素試驗基礎上,以十二烷基硫酸鈉(SDS)用量、超聲功率、超聲溫度、乙醇體積分數(shù)為影響因素,多酚含有量為評價指標,響應面法優(yōu)化提取工藝。研究多酚還原能力、ABTS自由基清除能力,并檢測其對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、普通變形桿菌、枯草芽孢桿菌、綠膿桿菌的抑制作用。結果最佳條件為超聲時間15 min,料液比1∶25,SDS用量0.34%,超聲功率250 W,超聲溫度60℃,乙醇體積分數(shù)50%,多酚質(zhì)量分數(shù)達15.11 mg/g。多酚還原能力、ABTS自由基清除能力的IC_(50)值分別為0.116、0.014 mg/mL,MIC值為0.2 mg/mL(大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌)或0.4 mg/mL(普通變形桿菌、綠膿桿菌)。結論該方法合理可行,可用于提取抗氧化、抑菌活性較強的蛋白桑葉多酚。
【部分圖文】：

固定乙醇體積分數(shù)60%、料液比1∶15、超聲溫度50 ℃、超聲功率200 W、超聲時間10 min,考察SDS用量0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%對多酚含有量的影響,結果見圖1。由此可知,SDS用量小于0.4%時多酚含有量隨著其增加而升高,在0.4%時達到最大值,為(11.49±0.04) mg/g,與未加SDS比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);SDS用量大于0.4%時多酚含有量反而略有降低,可能是其達到臨界膠束濃度后對該成分增溶作用的影響不大,但對其他雜質(zhì)影響較明顯[12]。因此,選擇SDS用量為0.2%～0.6%。2.3.2 超聲功率

固定乙醇體積分數(shù)60%、料液比1∶15、SDS用量0.6%、超聲溫度50 ℃、超聲時間10 min,考察超聲功率100、150、200、250、300、350 W對多酚含有量的影響,結果見圖2。由此可知,超聲功率100～250 W時多酚含有量隨著其增加而升高,在250 W時達到最大值,為(11.28±0.20)mg/g,與100、150、200 W比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);超聲功率大于250 W時多酚含有量反而呈降低趨勢,可能是功率過高會使該成分發(fā)生分解[13]。因此,選擇超聲功率為200～300 W。2.3.3 超聲溫度

固定乙醇體積分數(shù)60%、料液比1∶15、SDS用量0.6%、超聲功率200 W、超聲時間10 min,考察超聲溫度30、40、50、60、70、80 ℃對多酚含有量的影響,結果見圖3。由此可知,提取溫度60 ℃時多酚含有量達到最大值,為(11.07±0.08)mg/g,與30、40、50 ℃比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);提取溫度高于60 ℃時多酚含有量反而明顯降低(P<0.05),可能是高溫會影響超聲空化效果,而且可引起該成分發(fā)生分解[14]。因此,選擇超聲溫度為50～70 ℃。2.3.4 超聲時間
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