目的探討人參皂苷CK (ginsenoside, CK)通過抑制STAT3誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用機(jī)制。方法利用MTT法檢測(cè)人參皂苷CK對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖的影響;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;CRISPR/Cas9技術(shù)敲除STAT3基因;Western blot技術(shù)檢測(cè)人參皂苷CK作用后STAT3、p-STAT3及細(xì)胞凋亡、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果人參皂苷CK對(duì)人肝癌細(xì)胞的增殖有抑制作用,且能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;下調(diào)p-STAT3的表達(dá),上調(diào)Cleaved caspase3,Cleaved PARP和GRP78、CHOP、Cleaved caspase 4、p-PERK、p-IRE1、p-JNK、p-eIF2α的表達(dá)。結(jié)論人參皂苷CK能夠通過抑制STAT3的磷酸化調(diào)控人肝癌細(xì)胞凋亡,其作用機(jī)制與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān)。
【部分圖文】：

MTT結(jié)果發(fā)現(xiàn),人參皂苷CK能夠抑制HepG2細(xì)胞的增殖,并且呈現(xiàn)一定的濃度和時(shí)間依賴性人參皂苷CK處理HepG 48 h時(shí),其IC50值為40.45 μM。結(jié)果見圖1。3.2 人參皂苷CK對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡的影響

流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,人參皂苷CK能夠誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡,與Vehicle組相比較,40 μM、60 μM人參皂苷CK組差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見圖2A,B。Western blot結(jié)果顯示,隨著人參皂苷CK藥物劑量的增加,Cleaved- caspase3和Cleaved-PARP蛋白的表達(dá)顯著增多,與Vehicle組相比較,差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見圖2C,D。圖2 人參皂苷CK對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞凋亡的影響

人參皂苷CK對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞凋亡的影響
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