目的 從細胞骨架破壞、炎癥反應和缺氧環(huán)境角度開展清腸溫中方的拆方研究,闡明該方在潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)治療中,針對不同病機更加有效的藥物組成單元,為其藥物配伍和臨床應用提供科學依據(jù)。方法 79只SD大鼠隨機分10組,其中空白組7只,模型組、溫中健脾組、清熱燥濕組、涼血化瘀組、溫中健脾合清熱燥濕組、溫中健脾合涼血化瘀組、清熱燥濕合涼血化瘀組、全方組和美沙拉秦組,每組8只。除空白組外,其余大鼠連續(xù)7天自由飲用4%葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium,DSS)溶液以建立急性UC模型。隨后7天按不同分組灌胃給藥,與此同時,除空白組外的所有大鼠,仍繼續(xù)飲用1%DSS溶液以維持小劑量刺激引起的病變。通過組織學病變評分、結(jié)腸低氧誘導因子?1α(hypoxia inducible factor?1α,HIF?1α)蛋白電泳、波形蛋白(vimentin,VIM)和角蛋白8(cytokeratin 8,K8)免疫組化染色、血清干擾素γ誘導蛋白10(interferon?γ?inducible protein 10,IP10)、趨化因子受體3(chemokine receptor 3,CXCR3)Elisa檢測,開展清腸溫中方拆方的拆方研究。結(jié)果 與模型組相比,清熱燥濕、溫中健脾合清熱燥濕、溫中健脾合涼血化/K8蛋白表達比值,其中以溫中健脾合涼血化瘀組效果更明顯(P0.05)。全方及拆方各組均能減少血清中IP10含量,溫中健脾合涼血化瘀和溫中健脾合清熱燥濕組效果更為明顯(P0.05);除涼血化瘀組外各組均能降低血清CXCR3含量,其中以清熱燥濕合涼血化瘀和溫中健脾合涼血化瘀組降低更多,且聯(lián)合組療效優(yōu)于美沙拉秦(P0.05)。全方及拆方各組均能減少結(jié)腸中HIF?1α表達,以溫中健脾合涼血化瘀、溫中健脾合清熱燥濕和全方組的下降趨勢更明顯,但各組間不存在統(tǒng)計學差異。結(jié)論 清腸溫中方全方的作用優(yōu)于溫中健脾合涼血化瘀和溫中健脾合清熱燥濕組,而兩組又比單用溫中健脾、清熱燥濕或涼血化瘀有更明顯的調(diào)控作用。進一步證實了在UC的治療中,清熱燥濕或涼血化瘀的祛邪治法,只有在聯(lián)合了溫中健脾的扶正藥物后,才能更好地發(fā)揮修復細胞骨架、減輕炎癥反應和改善缺氧環(huán)境的作用。提示在UC的臨床治療中,需要重視顧護正氣,即溫中健脾,才能取得更好的療效。
【部分圖文】：

本研究采用Western blot檢測了各組大鼠結(jié)腸組織中的HIF-1α，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雖然各組間不存在統(tǒng)計學差異，但模型組HIF-1α表達趨勢高于空白組，各拆方組在治療后也有減少的趨勢，其中，以全方組減少作用最為明顯，其次為溫中健脾合涼血化瘀和溫中健脾合清熱燥濕組。見圖4、表4。3 討論

模型組可見炎細胞浸潤、腺體萎縮和黏膜結(jié)構(gòu)破壞，治療后清熱燥濕、溫中健脾聯(lián)合清熱燥濕、溫中健脾合涼血化瘀、全方和美沙拉秦組均能緩解組織學病變并降低病變評分見圖1、表1。2.2 清腸溫中方拆方對急性UC大鼠腸黏膜中細胞骨架蛋白的表達影響

角蛋白8(K8）在各組大鼠腸黏膜中表達量整體偏低，模型組幾乎未見到陽性表達，治療后除清熱燥濕和清熱燥濕合涼血化瘀組，其余藥物均能促進表達，且與模型組比較，存在統(tǒng)計學差異。見圖3。此外，VIM/K8比值在DSS誘導的急性UC模型大鼠中明顯升高，經(jīng)各組藥物干預后，該比值均有下降見表2。圖3 各拆方組大鼠腸黏膜中K8蛋白的IHC染色圖（200×）

本文編號：2859676