目的:研究西洋參丹參配伍干預(yù)血栓形成的作用機(jī)制及物質(zhì)基礎(chǔ)。方法:1網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法,借助TCMSP、TTD、DrugBank、UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)建立分析文件,利用Cytoscape軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析與網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,以O(shè)micshare平臺(tái)的高級(jí)氣泡圖展示西洋參丹參防治血栓性疾病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和靶點(diǎn)的關(guān)系。2 有效部位制備采用加熱回流法提取法、大孔樹(shù)脂層析分離純化法和真空干燥、冷凍干燥法制備人參皂苷、丹參酮和丹參酚酸三個(gè)有效部位,通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定各有效部位中主要成分含量。3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)選取健康雄性SD大鼠70只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(Model)、陽(yáng)性對(duì)照組(ASA)、西洋參丹參(1:3)水煎劑1組(PSD-1)、西洋參丹參(1:3)水煎劑2組(PSD-2)、西洋參丹參有效部位1組(PSE-1)、西洋參丹參有效部位2組(PSE-2)各10只。假手術(shù)組、模型組給0.5%羧甲基纖維素鈉溶液(CMC),陽(yáng)性對(duì)照組給阿司匹林,PSD-1、PSD-2組給西洋參丹參1:3配伍的水煎劑,PSE-1、PSE-2組給人參皂苷、丹參酮、丹參酚酸提取物,其給藥量依照生藥材1:3 比例折算,灌胃給藥,每日一次,連續(xù)給藥7天。30%FeC13濾紙貼敷大鼠頸動(dòng)脈誘導(dǎo)血栓形成進(jìn)行造模。采用比濁法測(cè)定ADP誘導(dǎo)的血小板聚集率,并計(jì)算血小板聚集抑制率。通過(guò)ELISA法測(cè)定血漿TXB2、PGI2、GPIIb/IIIa、P-sel、TG-β、TNFα、CRP水平,并通過(guò)HE染色觀察動(dòng)脈血栓狀態(tài)。結(jié)果:1 西洋參丹參抗血栓形成的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果如下:西洋參丹參中34個(gè)活性成分可作用于血栓性疾病相關(guān)的11個(gè)靶點(diǎn),涉及10條信號(hào)通路。有16個(gè)活性成分可作用于Platelet activation(血小板活化)通路中3個(gè)靶點(diǎn),分別是MAPK14,PRKACA編碼的PKAC-alpha,ITGB3編碼的GPIIIa,16個(gè)活性成分多為丹參酮類(lèi),其中丹參酮IIA可以同時(shí)作用于靶點(diǎn)MAPK14和PRKACA,隱丹參酮可作用于MAPK14和ITGB3,β-谷甾醇亦可同時(shí)作用于靶點(diǎn)MAPK14和PRKACA。2 西洋參丹參有效部位制備結(jié)果如下:(1)藥材檢測(cè):所購(gòu)西洋參藥材中人參皂苷Rb1、Rg1、Re含量分別為0.09%、1.18%、3.47%,共計(jì)為4.74%;丹參藥材中隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA含量分別為0.12%、0.13%、0.10%,共計(jì)0.36%,丹參酚酸B含量為3.81%,以上所測(cè)含量均符合藥典規(guī)定。(2)有效部位中主要成分含量:人參皂苷提取物中測(cè)得主要成分人參皂苷Rg1、Re、Rb1 含量分別為 3.56%、15.07%、42.64%,共計(jì) 61.27%;丹參酮提取物中測(cè)得主要成分二氫丹參酮、隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA含量分別為2.50%、12.52%、13.90%、10.61%,共計(jì)39.52%。丹參酚酸提取物中丹參酚酸B含量因測(cè)定樣品溶液溶解度不同未準(zhǔn)確測(cè)定,但在實(shí)驗(yàn)測(cè)定條件下,含量為15%左右。3 西洋參丹參有效部位對(duì)大鼠頸動(dòng)脈血栓的干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果如下:(1)血小板聚集情況:Model組血小板聚集率較Sham組增大,具有顯著性差異(P0.05);ASA組、PSD-1組和PSE-]組較Model組均有所降低,且差異具有顯著性(P0.05),血小板聚集抑制率分別為36.53%、25.26%、19.18%;PSD-2組、PSE-2組較Model組亦有降低,但未見(jiàn)顯著性差異(P0.05),血小板聚集抑制率分別為5.05%、16.55%;PSD-1與PSE-1相比、PSD-2與PSE-2相比兩組血小板聚集率均無(wú)顯著性差異。(2)血漿 TXB2、6-K-PGF1α 含量及 TXB2/6-K-PGF1α 比值:與 Sham 組比較,Model組血漿TXB2水平顯著升高,存在極顯著差異(P0.01),TXB2/6-K-PGF1α比值升高,出現(xiàn)顯著性差異(P0.05),血漿6-K-PGF1α水平降低,但無(wú)顯著性差異;與Model組比較,PSD-1、PSE-1、PSD-2組血漿TXB2水平降低,存在顯著性差異(P0.05),ASA和PSE-2組血漿TXB2水平、二者比值顯著降低,存在極顯著性差異(P0.01);各組較Model組血漿6-K-PGF1α水平無(wú)顯著性變化;PSD-1、PSE-1兩組血漿TXB2、6-K-PGF1α水平、二者比值均無(wú)顯著性差異;PSE-2組血漿6-K-PGF1α較PSD-2組顯著升高,存在顯著性差異(P005)。(3)血漿GPIIb/IIIa含量:Model大鼠血漿GPIIb/IIIa含量較Sham組增多,差異具有顯著性(P0.01),ASA組、PSD-1組、PSE-1組、PSD-2組和PSE-2組較Model組均降低,差異具有顯著性(P0.05);PSD-1與PSE-1相比、PSD-2與PSE-2相比兩組血漿GPIIb/IIa水平均無(wú)顯著性差異。(4)血漿 P-sel、β-TG 含量:與 Sham 組相比,Model 組血漿 β-TG、P-sel水平顯著升高,具有極顯著性差異(P0.01);與Model組比,ASA和PSE-1組血漿β-TG、P-sel水平降低,具有極顯著性差異(P0.01),PSD-2、PSE-2組P-sel水平明顯降低(P0.05),β-TG水平降低,但未見(jiàn)顯著性差異(P0.05),PSD-1組血漿P-TG、P-sel水平降低,P-TG降低存在顯著性差異(P0.05);PSD-1與PSE-1相比、PSD-2與PSE-2相比兩組血漿P-sel、β-TG水平均無(wú)顯著性差異。(5)血漿TNFoα CRP含量:與Sham組相比,Model組血漿CRP、TNF-a水平升高,差異具有顯著性(P0.05);與Model組相比ASA組、PSD-1組、PSE-1組、PSD-2組和PSE-2組血漿TNF-α均水平降低,且ASA組和PSE-1組差異具有極顯著性(P0.01),PSD-1組、PSD-2組和PSE-2組差異具有顯著性(P0.05);與Model組相比PSD-1組、PSE-1組、PSD-2組和PSE-2組血漿CRP水平降低,差異具有顯著性(P0.05);PSD-1與PSE-1相比、PSD-2與PSE-2相比兩組血漿CRP、TNF-α水平均無(wú)顯著性差異。(6)組織形態(tài)學(xué)改變:肉眼觀察可見(jiàn)正常大鼠頸動(dòng)脈血管彈性良好,色澤紅潤(rùn);模型大鼠頸動(dòng)脈血管脆性增加,顏色暗紅,可見(jiàn)血栓形成。光鏡下Sham組各層分界明顯,為正常動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu),由內(nèi)而外可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞完整,連續(xù)分布;彈性膜呈波浪狀,管腔內(nèi)未見(jiàn)其他異常內(nèi)容物。Model組鏡下可見(jiàn)管腔內(nèi)血栓形成,以血小板成分為主,可看到較多紅細(xì)胞,血栓內(nèi)可見(jiàn)白細(xì)胞浸潤(rùn),以中性粒細(xì)胞為主,內(nèi)皮細(xì)胞走向紊亂,連續(xù)性被破壞,出現(xiàn)不同程度的分離和剝脫現(xiàn)象,內(nèi)皮下膠原暴露,彈性膜出現(xiàn)不同程度的僵硬拉直現(xiàn)象。鏡下可見(jiàn)給藥各組血栓出現(xiàn)一定程度溶解,彈性膜僵直度降低。結(jié)論:西洋參丹參配伍具有抗血栓作用,其中人參皂苷、丹參酮、丹參酚酸部位可能是抗血栓的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),能通過(guò)抗血小板活化、抗炎共同發(fā)揮作用。
【學(xué)位單位】：中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R285.5
【部分圖文】：

圖１．１丹參西洋參“成分－靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)”??（注：藍(lán)色矩形代表靶點(diǎn)；菱形代表成分，綠色為西洋參活性成分，紅色為丹參活性成分

圖１．２疾病靶點(diǎn)蛋白－蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)??（注：粉色為一級(jí)靶點(diǎn)蛋白，藍(lán)色為二級(jí)靶點(diǎn)蛋白，黃色為度值較高的核心靶點(diǎn)蛋白）??

圖１．３疾病核心靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)??３藥物活性成分－疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建??“”
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5 辛艷茹,馬萍,張英娜;西洋參葉的研究進(jìn)展[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2001年08期

6 魏春雁,徐崇范,羅維瑩,李向高;國(guó)產(chǎn)西洋參葉黃酮成分研究(英文)[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年03期

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本文編號(hào)：2855759