目的:本研究使用棕櫚酸處理H9C2大鼠心肌細(xì)胞,建立H9C2大鼠心肌細(xì)胞損傷模型,并探討粉防己堿對棕櫚酸誘導(dǎo)的H9C2大鼠心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)H9C2大鼠心肌細(xì)胞,待細(xì)胞長至80%-90%時(shí),將細(xì)胞分為四組:正常組(含5.5 mmol/L D-Glucose的DMEM),模型組(0.2 mmol/L PA),給藥組(0.2mmol/L PA+10μmol/L Tet),正常對照組(DMEM+10μmol/L Tet)。用MTT法檢測各組細(xì)胞活性;用蛋白免疫印跡法檢測各組細(xì)胞Bcl-2,Bax和cleaved caspase-3蛋白的表達(dá)情況;用LDH試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)LDH含量變化;用RT-PCR檢測細(xì)胞內(nèi)PICK1、IL-6、TNF-α的mRNA表達(dá)變化。結(jié)果:與正常組相比,模型組的細(xì)胞活性明顯降低(P0.01);細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)下降(P0.05);Bax、cleaved caspase-3蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05或P0.01);PICK1、IL-6、TNF-αmRNA表達(dá)增加(P0.05)。與模型組相比,10μmol/L粉防己堿處理可使細(xì)胞活性明顯增強(qiáng)(P0.01);細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)增加(P0.05);Bax,cleaved caspase-3蛋白表達(dá)下降(P0.05或P0.01);此外,粉防己堿可以抑制模型組細(xì)胞PICK1、IL-6、TNF-αmRNA的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論:棕櫚酸濃度為0.2 mmol/L刺激H9C2心肌細(xì)胞24 h后,可對心肌細(xì)胞造成脂毒性損傷;粉防己堿可以改善棕櫚酸造成的H9C2大鼠心肌細(xì)胞損傷,其機(jī)制可能與抗炎、抗氧化及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。
【學(xué)位單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

結(jié)果濃度 PA 對 H9C2 心肌細(xì)胞活性的影響驗(yàn) PA 濃度為 0.1，0.15，0.2 mmol/L 作用于 H9C2 心肌細(xì)胞 24 h如圖 1），結(jié)果如圖顯示細(xì)胞活性受抑制與 PA 濃度存在依賴關(guān)A（0.2 mmol/L）組作用 24 h 后能顯著降低細(xì)胞活性（P<0.01） 0.2 mmol/L，作用于細(xì)胞 12 h、24 h 和 48 h（如圖 2），作用 24（P<0.01）。

棕櫚酸濃度為0.2mmol/L不同時(shí)間誘導(dǎo)下對細(xì)胞活性的影響

A 對 H9C2 心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)影響 是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白，Bcl-2 是抗凋亡蛋白，Bax 是細(xì)胞抗凋亡的能力大小。caspase-3 在各種因素啟動(dòng)的用，caspase-3 活性表達(dá)的多少可以反映細(xì)胞凋亡的程度、圖 6）與正常組比較，PA（0.1 mmol/L）組，PA（0.1組的 Bcl-2（P<0.05，n=3）表達(dá)下降，Bax（P<0.05，se-3（P<0.05，n=3）的表達(dá)增加。與正常組比較，PA（顯降低（P<0.05，n=3），cleaved caspase-3（P<0.05，（0.2 mmol/L）組心肌細(xì)胞凋亡嚴(yán)重。
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本文編號：2853910