目的:隨著社會(huì)老齡化問題日益突出,神經(jīng)退行性疾病嚴(yán)重影響老年人的生活質(zhì)量,如何延緩衰老、改善腦老化而保護(hù)腦功能顯得至關(guān)重要。研究表明火麻仁具有良好的抗炎抗衰老作用,但具體機(jī)制尚不清楚。通過火麻仁提取液(Extract of Fructus Cannabis,EFC)干預(yù)D-半乳糖(D-galactose,D-gal)誘導(dǎo)的衰老大鼠模型,評(píng)估EFC對(duì)衰老大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的影響,同時(shí)檢測(cè)與神經(jīng)炎癥相關(guān)的基因與蛋白的表達(dá),進(jìn)而探討EFC減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)、改善認(rèn)知功能可能存在的分子機(jī)制,為火麻仁的應(yīng)用提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.將80只健康雄性SD大鼠(250-300 g,3月齡)隨機(jī)分成8組。(1)空白對(duì)照組(Control),前3個(gè)月腹腔注射生理鹽水,后3個(gè)月生理鹽水灌胃,每天一次;(2)衰老模型組(D-gal),400 mg/kg D-gal連續(xù)腹腔注射3個(gè)月,后3個(gè)月生理鹽水灌胃,每天一次;(3)低、中、高劑量EFC預(yù)防組(給藥劑量以生藥量換算),在D-gal造模前分別預(yù)防性給予400mg/kg、800 mg/kg和1600 mg/kg EFC灌胃3個(gè)月后再給予400 mg/kg D-gal腹腔注射3個(gè)月;(4)低、中、高劑量EFC治療組,先給予400 mg/kg D-gal腹腔注射3個(gè)月造模后再分別給予400 mg/kg、800 mg/kg和1600 mg/kg EFC灌胃3個(gè)月。2.Morris水迷宮試驗(yàn)評(píng)估大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定大鼠腦海馬中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)與白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)的表達(dá)水平。4.定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)測(cè)定大鼠腦海馬膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)基因的mRNA表達(dá)。5.免疫熒光法測(cè)定大鼠腦海馬齒狀回GFAP的表達(dá)。6.免疫印跡法(western blot,WB)檢測(cè)GFAP、IKK/IκB/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。7.免疫組織化學(xué)檢測(cè)大鼠腦海馬齒狀回p-p65的表達(dá)。結(jié)果:1.水迷宮測(cè)試結(jié)果顯示,與Control組相比,D-gal組在定向航行階段第5天逃避潛伏期顯著延長(zhǎng)(P0.05),在空間探索測(cè)試中穿越平臺(tái)次數(shù)顯著減少(P0.05);400 mg/kg與800 mg/kg EFC預(yù)防組和治療組與D-gal組相比,逃避潛伏期顯著縮短(P0.05),穿越平臺(tái)次數(shù)顯著增加(P0.05)。2.與Control組相比,D-gal組大鼠海馬組織的TNF-α與IL-1β水平明顯增高(P0.05);400 mg/kg、800 mg/kg EFC預(yù)防組和治療組TNF-α、IL-1β水平較D-gal組明顯降低(P0.05);1600 mg/kg EFC治療組TNF-α及IL-1β水平與D-gal組相比均沒有顯著差異;1600 mg/kg的EFC預(yù)防組TNF-α水平與較D-gal組相比沒有顯著差異,但I(xiàn)L-1β水平較D-gal組明顯降低(P0.05)。3.D-gal組GFAP mRNA水平明顯高于Control組(P0.05);與D-gal組相比,各劑量EFC預(yù)防組與400 mg/kg、800 mg/kg EFC治療組的GFAP mRNA水平明顯降低(P0.05),而1600 mg/kg EFC治療組則沒有顯著差異。4.D-gal組GFAP熒光密度明顯高于Control組(P0.05);與D-gal組相比,各劑量EFC預(yù)防組與400 mg/kg、800 mg/kg EFC治療組的GFAP熒光密度明顯降低(P0.05),而1600 mg/kg EFC治療組則沒有顯著差異。5.免疫印跡結(jié)果顯示IKK、IκB、p65總蛋白在各組間表達(dá)量沒有顯著差異;與Control組相比,D-gal組的GFAP、p-IKK、p-IκB與p-p65蛋白表達(dá)水平均明顯升高(P0.05);與D-gal組相比,各劑量EFC預(yù)防組與400mg/kg、800 mg/kg EFC治療組的GFAP、p-IKK、p-IκB與p-p65蛋白表達(dá)水平均明顯降低(P0.05),而1600 mg/kg EFC治療組則沒有顯著差異。6.免疫組織化學(xué)測(cè)定p-p65蛋白的結(jié)果顯示,EFC可以有效減弱海馬區(qū)由D-gal誘導(dǎo)的p-p65胞核內(nèi)表達(dá)水平。結(jié)論:1.EFC能在一定程度上改善衰老大鼠的空間學(xué)習(xí)及記憶能力。2.EFC可能通過抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化并減少大腦海馬炎癥因子TNF-α與IL-1β的表達(dá)水平而發(fā)揮抗炎作用。3.EFC可能通過抑制NF-κB信號(hào)通路的激活來減輕神經(jīng)炎癥反應(yīng)進(jìn)而改善D-gal誘導(dǎo)的衰老大鼠學(xué)習(xí)和記憶障礙。
【學(xué)位單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
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英文摘要
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材料與方法
    材料
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討論
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綜述
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1 李根林;曹亞蕊;吳宿慧;張志強(qiáng);張顏語;楊陽;李寒冰;;火麻仁油對(duì)衰老模型小鼠血脂水平及炎癥、抗氧化相關(guān)指標(biāo)的影響[J];中藥藥理與臨床;2015年01期

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7 陳艷艷;才麗平;王浩;蔣寧;曲怡;夏淑杰;林庶茹;;芳香開竅類中藥含藥腦脊液對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞水通道-4表達(dá)的影響[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2008年12期

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本文編號(hào)：2850326