目的:觀察單側(cè)輸尿管結(jié)扎(Unilateral ureteral obstruction,UUO)模型大鼠腎組織中自噬相關(guān)基因5(Autophagy associated gene 5,Atg5)、Beclin-1和微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(Microtubular-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表達(dá),檢測與其調(diào)控相關(guān)的信號通路血清和糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)蛋白激酶1(Serum and glucocorticoid-induced protein kinase 1,SGK-1)、磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(Phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase 1/2,P-ERK1/2)、磷酸化哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(Phosphorylated mammal target of rapamycin,P-mTOR)的表達(dá),探討益氣活血解毒中藥對梗阻性腎病細(xì)胞自噬的作用。方法:將48只清潔級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(UUO)、纈沙坦組(Val)和中藥組(TCM),除假手術(shù)組外,其余各組大鼠結(jié)扎左側(cè)輸尿管復(fù)制梗阻性腎病的動物模型。纈沙坦組和中藥組分別給予10mg·kg~(-1)·d~(-1)纈沙坦和14g·kg~(-1)·d~(-1)益氣活血解毒中藥,10天后摘取梗阻側(cè)腎臟。通過Western blot和免疫組化檢測Atg5、Beclin-1、LC3、SGK-1、P-ERK1/2和P-mTOR的表達(dá)。結(jié)果:1免疫組化檢測各組大鼠Atg5、Beclin-1、LC3、P-mTOR的表達(dá)Atg5和Beclin-1在假手術(shù)組呈弱表達(dá),均見于腎小管上皮細(xì)胞的細(xì)胞漿,在模型組表達(dá)明顯增強(qiáng),纈沙坦組和中藥組表達(dá)較模型組均明顯減弱;LC3在假手術(shù)組呈弱表達(dá),見于腎小管上皮細(xì)胞的細(xì)胞漿和細(xì)胞膜,在模型組表達(dá)明顯增強(qiáng),主要見于腎小管上皮細(xì)胞的細(xì)胞膜,纈沙坦組和中藥組表達(dá)較模型組均明顯減弱;P-mTOR在假手術(shù)組呈陽性表達(dá),見于腎小管上皮細(xì)胞的細(xì)胞核,模型組表達(dá)減弱,纈沙坦組和中藥組表達(dá)較模型組增強(qiáng),但較假手術(shù)組減弱。2 Western blot檢測大鼠腎組織Atg5、Beclin-1、LC3、SGK-1、P-ERK1/2、P-mTOR的表達(dá)模型組大鼠腎組織內(nèi)Atg5、P-ERK1/2的蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組有明顯的上調(diào)(P0.01),纈沙坦組及中藥組蛋白表達(dá)較模型組均有所下調(diào)(P0.01)。模型組大鼠腎組織內(nèi)Beclin-1、LC3、SGK-1的蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組有明顯的上調(diào)(P0.01),纈沙坦組及中藥組蛋白表達(dá)較模型組均有所下調(diào)(P0.05)。P-mTOR在模型組呈弱表達(dá),假手術(shù)組可以上調(diào)其表達(dá)(P0.05),纈沙坦組和中藥組表達(dá)與模型組相比明顯增強(qiáng)(P0.01),但較假手術(shù)組減弱。結(jié)論:1 UUO所致的梗阻性腎病可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬激活,且與鹽皮質(zhì)激素受體(Mineralocorticoid receptor,MR)的活化趨勢一致;2益氣活血解毒中藥可以通過調(diào)控SGK-1、P-ERK1/2和mTOR通路,抑制MR的活化,從而糾正梗阻性腎病中細(xì)胞自噬的異常。
【學(xué)位單位】：河北中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 免疫組化染色檢測各組大鼠腎組織 Atg5 的表達(dá)（×400）ig.1 The expression ofAtg5 in rats by immunohistochemistry (×4

Westernblot檢測各組大鼠腎組織Atg5蛋白的表達(dá)Fig.2TheprotienexpressionofAtg5byWesternblotNote:vsSham，＊＊P<0.01；vsUUO，△△P<0.01

3 免疫組化染色檢測各組大鼠腎組織 Beclin-1 的表達(dá)（×40.3 The expression of Beclin-1 in rats by immunohistochemistry(×
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2843988