目的通過(guò)體內(nèi)研究探討胃腸安方及其不同功效組成藥物拆方對(duì)胃癌裸鼠原位移植瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移作用效果及其配伍規(guī)律。方法將胃腸安方按其功效拆分為健脾理氣、清熱解毒、軟堅(jiān)散結(jié)三大組成部分,采用2×2×2析因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)方案,建立裸小鼠人胃癌原位移植模型。觀(guān)察胃腸安方不同功效組成藥物抑制胃癌生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移作用效果及其之間是否存在交互作用。結(jié)果①胃腸安方全方組及健脾理氣組、軟堅(jiān)散結(jié)組、健脾清熱組的抑瘤率分別為28.5%、24.6%、28.8%及30.2%,與模型組瘤重比較明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);軟堅(jiān)散結(jié)因素在抑制瘤重方面具有主效應(yīng),健脾理氣及軟堅(jiān)散結(jié)因素存在交互作用。②胃腸安全方組、清熱解毒組、健脾清熱組的轉(zhuǎn)移率分別為22.22%、10.00%、18.18%,與模型組75.00%比較,能明顯降低裸鼠胃腫瘤的轉(zhuǎn)移率(P0.05)。③胃腸安全方組及其不同治則拆方配伍各組中除軟堅(jiān)散結(jié)組外,均能抑制MMP-2蛋白表達(dá),尤其以健脾理氣組及全方組作用最為明顯(P0.05);健脾組、健脾清熱組及全方組對(duì)MMP-9蛋白表達(dá)抑制作用最為明顯(P0.05)。析因分析結(jié)果顯示,在軟堅(jiān)散結(jié)因素存在時(shí),健脾理氣因素與清熱解毒因素在下調(diào)MMP-2蛋白表達(dá)方面具有協(xié)同作用。胃腸安方及其拆方對(duì)裸鼠胃腫瘤組織MMP-2基因表達(dá)具有不同程度的抑制作用,以全方組、健脾軟堅(jiān)組、清熱軟堅(jiān)組作用最為明顯(P0.01)。析因分析結(jié)果顯示,健脾理氣與清熱解毒及清熱解毒與軟堅(jiān)散結(jié)組之間對(duì)MMP-2的基因表達(dá)抑制具有相互交互作用。全方組、健脾軟堅(jiān)組對(duì)裸鼠胃腫瘤組織MMP-9 mRNA表達(dá)抑制作用明顯(P0.01),健脾理氣與清熱解毒及健脾理氣與軟堅(jiān)散結(jié)組對(duì)MMP-9 mRNA表達(dá)抑制具有相互交互作用。胃腸安方全方組及健脾理氣組明顯抑制裸鼠胃腫瘤組織MMP-2及MMP-9的活性(P0.01),析因分析結(jié)果顯示,在清熱解毒因素存在時(shí),健脾理氣與軟堅(jiān)散結(jié)因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面具有協(xié)同作用,而在缺乏清熱解毒因素時(shí),健脾理氣與軟堅(jiān)散結(jié)因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面存在拮抗作用。結(jié)論胃腸安方全方組、清熱解毒組、健脾清熱組能明顯抑制胃癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,清熱解毒組抑制胃癌轉(zhuǎn)移效果最為明顯,健脾理氣因素抑制瘤重主效應(yīng)具有顯著性,健脾理氣及軟堅(jiān)散結(jié)因素在抑制瘤重方面存在交互作用;析因分析結(jié)果顯示,在軟堅(jiān)散結(jié)因素存在的情況下,健脾理氣和清熱解毒因素對(duì)下調(diào)MMP-2蛋白表達(dá)具有協(xié)同作用,在軟堅(jiān)散結(jié)因素缺乏時(shí),健脾理氣和清熱解毒因素對(duì)下調(diào)MMP-2蛋白表達(dá)具有拮抗作用。在清熱解毒因素存在的情況下,健脾理氣和軟堅(jiān)因素對(duì)抑制MMP-2和MMP-9活性具有協(xié)同作用,在清熱解毒因素缺乏時(shí),健脾理氣和軟堅(jiān)因素對(duì)抑制MMP-2和MMP-9活性存在拮抗作用。
【部分圖文】：

免疫組織化學(xué)染色觀(guān)察MMP-2蛋白表達(dá),MMP-2陽(yáng)性染色在腫瘤細(xì)胞中主要位于胞漿,并且MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)主要見(jiàn)于癌旁組織。見(jiàn)圖1。與模型組相比,胃腸安全方組及其不同治則拆方組MMP-2陽(yáng)性表達(dá)均較弱(P<0.01),尤其以健脾理氣組及全方組作用最為明顯。見(jiàn)表5。

析因分析結(jié)果顯示,健脾理氣、清熱解毒、軟堅(jiān)散結(jié)因素在抑制MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)方面均具有主效應(yīng),在軟堅(jiān)散結(jié)因素存在的情況下,健脾理氣藥物與清熱解毒藥物對(duì)MMP-2蛋白表達(dá)的抑制具有協(xié)同作用,在軟堅(jiān)散結(jié)因素不存在的情況下,健脾理氣藥物與清熱解毒藥物對(duì)MMP-2蛋白表達(dá)的抑制具有拮抗作用,而無(wú)論軟堅(jiān)散結(jié)因素存在與否,健脾理氣藥物與清熱解毒藥物對(duì)MMP-9蛋白表達(dá)的抑制均具有協(xié)同作用。見(jiàn)表6。表5 各組胃腫瘤組織MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)比較 ( x ˉ ±s ) 組別 n MMP-2 MMP-9 模型組 8 10.82±1.70 16.33±2.50 全方組 9 0.33±0.13** 0.30±0.12** 健脾理氣組 10 0.67±0.19** 1.98±0.81** 清熱解毒組 10 3.50±0.76** 7.00±1.74** 軟堅(jiān)散結(jié)組 10 6.00±0.18** 4.18±0.80** 健脾清熱組 11 5.53±1.09** 1.04±0.39** 健脾軟堅(jiān)組 9 0.95±0.31** 1.96±0.39** 清熱軟堅(jiān)組 10 0.95±0.31** 1.18±0.30** 注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

mRNA、MMP-9 mRNA表達(dá)的影響 與模型組比較,胃腸安全方及其拆方對(duì)裸鼠胃腫瘤組織MMP-2 mRNA表達(dá)的影響均有不同程度的抑制作用,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。以全方組、健脾軟堅(jiān)組、清熱軟堅(jiān)組作用最為明顯(P<0.01)。見(jiàn)圖3。胃腸安全方及其拆方對(duì)裸鼠胃腫瘤組織MMP-9 mRNA表達(dá)的影響據(jù)有不同程度的抑制作用,與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。以全方組、健脾軟堅(jiān)組作用最為明顯(P<0.01)。見(jiàn)圖4。
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本文編號(hào)：2843099