炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子所發(fā)生的防御反應(yīng)。然而,過度和慢性的炎癥反應(yīng)導致多種炎癥性疾病或炎癥相關(guān)疾病,如動脈粥樣硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎等,嚴重危害患者身體健康。目前,炎癥相關(guān)疾病的治療藥物存在諸多毒副作用,對炎癥細胞和炎癥信號通路的探索及研究其在炎癥反應(yīng)過程中的作用,為尋找具有高效低毒的炎癥治療藥物具有重要意義。巨噬細胞作為關(guān)鍵的一類免疫細胞,不僅是機體抵御病原體侵襲的第一道防線,也可通過分泌炎癥因子引起過度炎癥反應(yīng)從而造成多種炎癥性疾病。巨噬細胞在機體免疫反應(yīng)中具有非常強的表型可塑性和異質(zhì)性。巨噬細胞被脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激時,發(fā)生M1型極化,分泌大量的炎癥因子如腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、環(huán)氧合酶-2(Cyclo-Oxygen-ase,COX-2),促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生。巨噬細胞也可被IL-4等刺激,發(fā)生M2極化,主要分泌抗炎因子如白介素-10(Interleukin-10,IL-10)、CD206,人精氨酸酶1(Arginase1,Arg1),抑制炎癥反應(yīng)。因此,促進巨噬細胞從M1型向M2型極化可以抑制炎癥反應(yīng),現(xiàn)被認為是抗炎藥物開發(fā)的新思路。絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinases,MAPK)是細胞內(nèi)蛋白激酶家族,主要包括細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(Extracellularsignal-regulated kinase,ERK),絲裂原活化蛋白p38(Mitogen-Activated Protein kinase p38,MAPK p38)和c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)三個主要成員。文獻表明,LPS刺激巨噬細胞可以引起MAPK家族蛋白的磷酸化而被激活,最終通過激活核因子-kB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)引起炎癥因子TNF-α,IL-1β,COX-2等的釋放,引發(fā)炎癥反應(yīng)。目前認為,MAPKs信號通路的激活是LPS誘導巨噬細胞發(fā)生M1型極化的關(guān)鍵性分子途徑。研究表明,在M2型巨噬細胞中,JAK激酶2(Janus Kinase 2,JAK2)/信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子3(Signal transducers and activators of transcription,STAT3)信號通路高度磷酸化和活化。目前認為,JAK2/STAT3信號通路是巨噬細胞M2極化中的重要信號通路。大量研究證明,天然化合物是藥物發(fā)現(xiàn)和藥物設(shè)計的重要來源,并且天然化合物在藥理學和臨床治療學領(lǐng)域具有重要研究意義。小構(gòu)樹是一種作用廣泛的中藥材,它的提取物具有抗炎、抗氧化等生物活性。構(gòu)樹寧E(Broussonin E)是從小構(gòu)樹中分離得到的酚類化合物,本課題在前期藥物篩選過程中,首先發(fā)現(xiàn)其具有抗炎新功能。本研究從巨噬細胞表型轉(zhuǎn)換和相關(guān)信號通路等方面,探討天然產(chǎn)物構(gòu)樹寧E的抗炎作用及作用機制,為天然產(chǎn)物構(gòu)樹寧E用于治療炎癥相關(guān)性疾病提供實驗依據(jù)。本研究主要從以下幾方面展開。第一方面,通過ELISA實驗和MTT實驗,確定LPS誘導RAW264.7巨噬細胞建立炎癥細胞模型的最佳條件及確定天然化合物構(gòu)樹寧E在RAW264.7巨噬細胞中的最大耐受濃度以及構(gòu)樹寧E在炎癥細胞模型中抗炎的有效濃度。第二方面,通過qPCR實驗,驗證天然化合物構(gòu)樹寧E抑制促炎因子的釋放及促進抗炎因的釋放。第三方面,通過Western Blot實驗,驗證構(gòu)樹寧E抑制MAPK信號通路蛋白(ERK,P38,JNK)被LPS受刺激的活化;驗證構(gòu)樹寧E通過激活JAK2/STAT3信號通路,抑制巨噬細胞向M1表型極化而促進巨噬細胞向M2表型極化,發(fā)揮抗炎作用。本研究實驗結(jié)果表明構(gòu)樹寧E具有抗炎作用,其抗炎作用可能通過抑制ERK和p38 MAPK信號通路及激活JAK2/STAT3信號通路,從而抑制巨噬細胞向M1型極化,減輕促炎相關(guān)因子表達,和促進巨噬細胞向M2型極化,增強抗炎相關(guān)因子表達有關(guān)。
【學位單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

構(gòu)樹寧E化學結(jié)構(gòu)

構(gòu)樹寧E抑制巨噬細胞炎癥的作用及其路線圖

圖 2-1 利用 LPS 誘導巨噬細胞釋放炎癥因子 TNF-α建立炎癥細胞模型LPS 成功誘導巨噬細胞 RAW264.7 建立炎癥細胞模型；與對照組（0 h）相比，## P <0.01，### P<0.001。Figure 2-1 LPS-induced macrophage release of inflammatory factor TNF-α to establish an inflammatorycell model
【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃新;鄭開之;鄭會超;吳建良;姜俊芳;宋雪梅;蔣永清;;雜交構(gòu)樹的生物產(chǎn)量、營養(yǎng)動態(tài)及生態(tài)價值[J];糧食與飼料工業(yè);2019年09期

2 郭琪;李鑫;楊暉;鞏曉芳;王沛雅;張軍;彭獻軍;;雜交構(gòu)樹在蘭州地區(qū)的生長動態(tài)及刈割期[J];草業(yè)科學;2019年12期

3 ;材飼兼用型構(gòu)樹的生長特性[J];林業(yè)科技通訊;2020年01期

4 ;構(gòu)建新品種助力構(gòu)樹產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展[J];林業(yè)科技通訊;2018年12期

5 包振華;;構(gòu)樹纖維生物酶脫膠過程及影響因素研究[J];生物化工;2019年01期

6 蔡玉;陳國順;支喜軍;蘇應(yīng)玉;;構(gòu)樹發(fā)酵飼料在豬禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究進展[J];畜牧獸醫(yī)雜志;2019年01期

7 李青松;;構(gòu)樹的壞與美[J];中國林業(yè)產(chǎn)業(yè);2019年03期

8 高靜;劉廣華;蔡中峰;劉含;田蕊;;雜交構(gòu)樹青貯的研究及應(yīng)用進展[J];山東畜牧獸醫(yī);2019年04期

9 彭皓;趙婉雨;;雜交構(gòu)樹產(chǎn)業(yè)技術(shù)分析報告[J];高科技與產(chǎn)業(yè)化;2019年04期

10 黎祖交;;一個好樹種可以催生一個大產(chǎn)業(yè)——以雜交構(gòu)樹為例[J];高科技與產(chǎn)業(yè)化;2019年04期

相關(guān)博士學位論文 前5條

1 吉仁花;雜交構(gòu)樹UDP-葡萄糖脫氫酶基因的克隆及特性分析[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2019年

2 孫靜文;構(gòu)樹DREB轉(zhuǎn)錄因子及木質(zhì)素合成代謝相關(guān)基因的克隆及功能分析[D];中國科學院研究生院（植物研究所）;2006年

3 朱海燕;重慶石灰?guī)r地區(qū)石漠化過程中水分與氮素對土壤—構(gòu)樹系統(tǒng)氮、磷元素營養(yǎng)的影響[D];西南大學;2007年

4 李榮錦;光葉楮耐鹽無性系的篩選及其對NaCl脅迫的反應(yīng)[D];南京林業(yè)大學;2009年

5 王丁;喀斯特地區(qū)六種苗木水分生理與抗旱性研究[D];南京林業(yè)大學;2009年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 王詩雅;構(gòu)樹幼苗與雜交構(gòu)樹幼苗對鹽堿脅迫的生理響應(yīng)研究[D];寧夏大學;2019年

2 龔夢;構(gòu)樹葉氣動特性研究[D];中國計量大學;2018年

3 黃少鵬;構(gòu)樹寧E抑制LPS誘導巨噬細胞炎癥反應(yīng)的新功能及機制研究[D];廣東藥科大學;2019年

4 林炎麗;不同加工方式對構(gòu)樹營養(yǎng)價值的影響[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2019年

5 吳良;環(huán)境因素對野生構(gòu)樹繁殖與分布的影響研究[D];中南林業(yè)科技大學;2019年

6 武玉婷;構(gòu)樹高效再生體系的建立[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2019年

7 李錦剛;中性亞鈉法構(gòu)樹全樹制漿工藝與機理研究[D];湖北工業(yè)大學;2018年

8 聞志剛;構(gòu)樹幼苗對鹽脅迫的生理響應(yīng)[D];中國林業(yè)科學研究院;2018年

9 黎明鴻;構(gòu)樹和桑樹的電生理特征對干旱的響應(yīng)[D];江蘇大學;2018年

10 包穎亮;構(gòu)樹咖啡酸-O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及生物信息學分析[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2018年

本文編號：2840938