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穿山龍薯蕷皂苷對PDPN大鼠坐骨神經(jīng)形態(tài)及NF-κB蛋白表達(dá)影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-14 04:36
   目的:建立痛性糖尿病周圍神經(jīng)病變的大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,研究穿山龍?zhí)崛∥锸硎氃碥諏ν葱蕴悄虿≈車窠?jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)組織形態(tài)和痛性糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)核轉(zhuǎn)移因子NF-κB蛋白表達(dá)的影響。材料與方法:選擇SPF級雄性Wistar大鼠136只,體重180-200g,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,按照隨機(jī)原則,選取24只,分成3組,每組8只,分別為2周、4周、8周對照組,其余112只進(jìn)行造模,將造模成功后的大鼠,隨機(jī)分為2周、4周、8周模型組、薯蕷皂苷高劑量組、薯蕷皂苷低劑量組、強(qiáng)的松組(每組不少于8只)。造模采用2%鏈脲佐菌素溶液(Streptozotocin,STZ)53mg/kg(PH4.2的0.1mol/l枸椽酸緩沖液配制),將其注入腹腔進(jìn)行干預(yù)。觀察給藥后2周、4周、8周大鼠行為特征、血糖、體重、神經(jīng)傳導(dǎo)速度、痛閾情況的變化,采用光學(xué)顯微鏡觀察大鼠坐骨神經(jīng)組織形態(tài),并采用免疫組化方法檢測大鼠坐骨神經(jīng)核轉(zhuǎn)移因子NF-κB蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:1.模型組大鼠精神狀態(tài)差,多飲、多食、多尿、毛色暗黃無光澤,行動(dòng)遲緩,蜷臥弓背等,各給藥組大鼠狀態(tài)優(yōu)于模型組,其中薯蕷皂苷高劑量組和西藥強(qiáng)的松組大鼠狀態(tài)改善較為明顯。2.模型組、各給藥組較正常對照組大鼠血糖水平有明顯的提高(P0.01);各給藥組較模型組大鼠血糖水平有降低的趨勢(P0.05)。3.模型組、各給藥組較正常對照組大鼠體重水平有明顯的減輕(P0.01),隨著病程的延長,模型組和各給藥組大鼠體重緩慢增加,各給藥組較模型組大鼠體重?zé)o明顯差異。4.模型組、各給藥組較正常對照組大鼠神經(jīng)傳導(dǎo)速度明顯降低(P0.01),各給藥組較模型組大鼠神經(jīng)傳導(dǎo)速度明顯升高(P0.01)。5.模型組、各給藥組與正常對照組比較大鼠痛閾值明顯升高(P0.01),提示PDPN造模成功;2周時(shí),薯蕷皂苷高劑量組、強(qiáng)的松組大鼠痛閾值與同期模型組比較降低(P0.05);4周、8周時(shí),各給藥組較同期模型組大鼠的痛閾值顯著下降(P0.01),薯蕷皂苷低劑量組和蕷皂苷高劑量組相比較,同期的大鼠痛閾值明顯升高(P0.01),強(qiáng)的松組較同期薯蕷皂苷高劑量組大鼠的痛閾值升高(P0.05),強(qiáng)的松組較薯蕷皂苷低劑量組大鼠的痛閾值降低(P0.05)。6.正常組:分別在實(shí)驗(yàn)2W、4W、8W后進(jìn)行觀察,可以看出坐骨神經(jīng)有髓神經(jīng)的排列均勻、有秩序、成束排列,纖維與纖維之間嚴(yán)密的結(jié)合在一起,能夠觀察到呈紫紅色的軸索在每一條神經(jīng)中間出現(xiàn)。在軸索的外面可見到呈現(xiàn)藍(lán)色的Schwann細(xì)胞核,外形呈長圓型。模型組:分別在實(shí)驗(yàn)2W、4W、8W后進(jìn)行觀察,可以看到坐骨神經(jīng)有髓神經(jīng)的纖維排列不均勻,雜亂無章,較分散,出現(xiàn)數(shù)量下降、結(jié)構(gòu)不清晰、形態(tài)不規(guī)整等變化。在一部分神經(jīng)當(dāng)中,能夠看到神經(jīng)出現(xiàn)腫脹,神經(jīng)纖維之間的縫隙增大,隨著時(shí)間的增加,這樣的變化逐漸加強(qiáng),2周4周8周。2周時(shí),有髓神經(jīng)可見細(xì)小的損傷變化(見附圖4);4周時(shí),可以看到有髓神經(jīng)纖維的排列不均勻,雜亂無章,有的神經(jīng)纖維密度不均勻,有的軸索出現(xiàn)收縮(見附圖5);8周時(shí),可以看到有髓纖維的排列更加散亂無秩序,脫鞘、密度不均勻更加嚴(yán)重,大多數(shù)軸索都萎縮變細(xì),嚴(yán)重的消失不見,同時(shí)雪旺氏細(xì)胞核減少(見附圖6)。各給藥組:采用STZ造模之后,各給藥組大鼠的坐骨神經(jīng)也產(chǎn)生相似的病理變化,不過隨著時(shí)間的增加,與模型組相比,大鼠治療組(薯蕷皂苷低劑量組、薯蕷皂苷高劑量組、強(qiáng)的松組)的損傷程度,顯著降低,可以看到神經(jīng)細(xì)胞的排列漸漸緊湊規(guī)則,腫脹程度降低,在神經(jīng)纖維四周,可見散在的雪旺氏細(xì)胞核,軸索變的清晰可見。在治療組之間,高劑量組的效果顯著,強(qiáng)的松組其次,低劑量組效果最弱,3個(gè)治療組改善效果排列如下:248周。(見附圖7)。7.和正常組相比較,造模組大鼠坐骨神經(jīng)中核轉(zhuǎn)移因子NF-κB蛋白表達(dá),有顯著性的差異(P0.01);模型組和各治療組的NF-κB的表達(dá),在2周的時(shí)候相比較,無顯著性差異(P0.05);4周、8周模型組與各治療組比較,表達(dá)明顯上升,具有顯著性差異(P0.01);2周各治療組之間比較,無顯著性差異(P0.05),4周各治療組之間比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),8周各治療組之間比較,也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。說明穿山龍?zhí)崛∥锸硎氃碥諏F-κB的激活起到抑制作用;病程不斷延長時(shí),各治療組NF-κB表達(dá)具有下降趨勢。結(jié)論:穿山龍?zhí)崛∥锸硎氃碥湛商岣咄葱蕴悄虿≈車窠?jīng)病變大鼠神經(jīng)傳導(dǎo)速度,降低痛閾值,對受損的坐骨神經(jīng)起到保護(hù)的作用,延緩神經(jīng)損傷的進(jìn)程。
【學(xué)位單位】:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R285.5
【部分圖文】:

情況,給藥,強(qiáng)的松,低劑量


2.大鼠血糖及體重情況2.1 大鼠血糖水平模型組、各給藥組大鼠血糖水平與正常組比較,明顯升高(P<0.01);各給藥組大鼠血糖水平與同期模型組比較有降低趨勢,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見表 1、圖 1)。表 1 各組大鼠血糖情況比較(mmol/L)(x±S)組別 n 0W 2W 4W 8W正常組 85.07±0.20 5.13±0.20 5.08±0.26 5.11±0.4模型組 827.43±1.79*27.74±1.48*27.97±1.11*27.98±1.8高劑量組 827.34±2.65*27.13±1.61*26.61±1.89*26.36±1.3低劑量組 827.41±2.01*27.23±0.97*26.80±1.61*26.60±1.8強(qiáng)的松組 827.53±1.97*27.13±1.37*26.65±1.59*26.43±2.0注:與正常對照組比較:*p<0.01;

傳導(dǎo)速度,神經(jīng)傳導(dǎo)速度,強(qiáng)的松,低劑量


表 3 各組大鼠運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)比較(m/s,x±S)注:與正常對照組相比:*P<0.01;與模型組相比:#P<0.01。組別 n 2W 4W 8W正常組 8 43.03±4.33 42.74±7.42 43.07±2.35模型組 8 27.70±2.88*23.97±4.08*20.57±2.27*高劑量組 8 32.16±2.20*#30.56±3.70*#28.58±3.12*#低劑量組 8 31.79±3.34*#28.57±3.23*#26.60±6.12*#強(qiáng)的松組 8 31.77±3.45*#29.31±1.51*#26.86±4.04*#

痛閾,大鼠,薯蕷皂苷,低劑量


表 4 各組大鼠痛閾情況比較(s)(x±S)注:與正常對照組比較:*P<0.01;與模型組比較:#P<0.05,##P<0.01;與薯蕷皂苷高劑量組比較:△p<0.05,△△p<0.01;與薯蕷皂苷低劑量組比較:▲p<0.05。組別 n 0W 2W 4W 8W正常組 8 8.73±0.77 8.88±1.08 8.88±1.38 8.74±0.91模型組 8 36.93±1.94*37.17±3.14*40.27±1.97*42.59±2.87*高劑量組 8 37.12±2.58*34.90±2.40*#30.22±1.87*##27.16±2.70*##低劑量組 8 37.07±2.62*35.95±2.50*34.47±1.84*##△△32.51±1.79*##△△強(qiáng)的松組 8 36.98±2.76*34.92±3.06*#32.38±1.86*##△▲29.82±1.96*##△▲
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本文編號(hào):2840192

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