大麥芽為大麥發(fā)芽的穎果,具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗腫瘤等多種生理和藥理作用。本文以不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽為研究對(duì)象,探究了不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽可溶性糖類(lèi)成分變化;篩選出α-葡萄糖苷酶抑制活性最好可溶性的粗糖;并優(yōu)化了大麥芽糖類(lèi)成分的提取條件以提高得率;根據(jù)α-葡萄糖苷酶抑制活性分離純化大麥芽低聚糖并對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定;課題的主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:大麥模擬箱式發(fā)芽得到發(fā)芽3-7天的大麥芽,烘干(50℃)粉碎得到大麥芽粉末,分別采用水浸提(40℃) , Sevag法除蛋白,醇沉得粗糖。采用苯酚-硫酸法和DNS法測(cè)定發(fā)芽3-7天大麥芽粗糖可溶性總糖和還原糖含量,采用高效液相色譜等分析方法,對(duì)不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽可溶性糖類(lèi)成分變化進(jìn)行研究,結(jié)果為:可溶性總糖含量、多糖含量在發(fā)芽第4天均達(dá)到最大之后含量呈下降趨勢(shì);除還原糖外低聚糖含量在發(fā)芽第4天達(dá)到最大,發(fā)芽5、6、7天不斷減少。對(duì)不同發(fā)芽天數(shù)的大麥芽可溶性粗糖進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制活性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示:相同濃度下,發(fā)芽4天的大麥芽粗糖酶抑制率最高,0.5mg/mL時(shí)酶抑制率為29.1±1.8%。以提取時(shí)間、提取溫度、提取次數(shù)和液固比為變量,以粗糖得率為考察指標(biāo)進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn),得到粗糖的最佳提取條件為:提取時(shí)間3小時(shí)、提取溫度40℃、提取次數(shù)為3次,液固比6:1。發(fā)芽4天大麥芽可溶性粗糖通過(guò)乙醇沉淀得到低聚糖和多糖,用阿卡波糖作為陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制活性實(shí)驗(yàn),分別測(cè)定粗糖、低聚糖和多糖的酶抑制率,結(jié)果表明:在濃度相同時(shí),低聚糖對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率較高為42.2±3.1%(0.5mg/mL)。采用SephadexG-15柱層析法得到純化低聚糖,采用飛行時(shí)間質(zhì)譜法檢測(cè)低聚糖分子量為689.798 (M+Na) Da。采用比旋光度法測(cè)定低聚糖的比旋光度為+45°。采用薄層層析(TLC)和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)測(cè)得低聚糖的單糖組成為葡萄糖。采用傅立葉紅外光譜(FT-IR)、高碘酸氧化-Smith降解、核磁共振波譜(NMR)、甲基化分析等,對(duì)低聚糖的糖鏈構(gòu)型進(jìn)行研究。結(jié)果表明:該低聚糖為α-(1→3)類(lèi)型糖苷鍵鏈接的葡聚四糖。
【學(xué)位單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類(lèi)】：R284;R285
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 大麥芽的研究概況
    1.2 大麥芽的分類(lèi)
        1.2.1 啤酒麥芽
        1.2.2 藥用麥芽
        1.2.3 不同長(zhǎng)度大麥芽的用途
    1.3 大麥芽的生理活性
        1.3.1 助消化作用
        1.3.2 對(duì)哺乳期乳腺分泌的作用
        1.3.3 抗結(jié)腸炎作用
        1.3.4 抗氧化作用
        1.3.5 降血糖降血脂作用
        1.3.6 其他作用
    1.4 α-葡萄糖苷酶抑制劑與糖尿病的研究進(jìn)展
        1.4.1 α-葡萄糖苷酶抑制劑與糖尿病的關(guān)系
        1.4.2 α-葡萄糖苷酶抑制劑的發(fā)展現(xiàn)狀
        1.4.3 α-葡萄糖苷酶抑制劑的種類(lèi)
    1.5 本課題的研究目的、意義和主要內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.2 大麥芽的培養(yǎng)
    2.3 大麥芽中粗糖的提取
        2.3.1 提取工藝流程
        2.3.2 大麥芽粗糖得率計(jì)算
        2.3.3 糖含量的測(cè)定
        2.3.4 分子量分布的測(cè)定
        2.3.5 單糖分析
    2.4 α-葡萄糖苷酶抑制劑篩選試驗(yàn)方法的建立
        2.4.1 α-葡萄糖苷酶反應(yīng)體系實(shí)驗(yàn)原理
        2.4.2 α-葡萄糖苷酶反應(yīng)體系實(shí)驗(yàn)方法
    2.5 提取工藝優(yōu)化
        2.5.1 提取工藝優(yōu)化單因素實(shí)驗(yàn)
    2.6 低聚糖的純化
        2.6.1 紫外光譜分析
        2.6.2 顏色反應(yīng)
    2.7 低聚糖結(jié)構(gòu)分析
        2.7.1 低聚糖比旋光度測(cè)定
        2.7.2 低聚糖紅外光譜(FT-IR)分析
        2.7.3 低聚糖核磁共振(NMR)分析
        2.7.4 低聚糖飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析
        2.7.5 低聚糖單糖組成分析
        2.7.6 低聚糖高碘酸氧化和smith降解
        2.7.7 甲基化分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 大麥芽的培養(yǎng)
    3.2 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽粗糖的得率
    3.3 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽中糖的變化
    3.4 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽單糖分析
    3.5 不同發(fā)芽天數(shù)多糖分析
    3.6 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽粗糖對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制率的測(cè)定
    3.7 粗糖提取工藝優(yōu)化
        3.7.1 不同的提取次數(shù)對(duì)糖得率的影響
        3.7.2 不同提取時(shí)間對(duì)粗糖產(chǎn)量的影響
        3.7.3 不同提取溫度對(duì)粗糖得率的影響
        3.7.4 不同液固比對(duì)粗糖得率的影響
    3.8 粗糖的分離純化
    3.9 低聚糖的純化
    3.10 紫外光譜分析
    3.11 低聚糖的高效液相分析
    3.12 低聚糖粗品、低聚糖純品和阿卡波糖隨濃度的變化對(duì)酶的抑制作用
    3.13 顏色反應(yīng)
    3.14 低聚糖的結(jié)構(gòu)分析
        3.14.1 低聚糖比旋光度測(cè)定
        3.14.2 低聚糖紅外光譜分析
        3.14.3 低聚糖核磁共振分析低聚糖紅外光譜分析
        3.14.4 低聚糖飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析
        3.14.5 低聚糖單糖組成測(cè)定
        3.14.6 低聚糖高碘酸氧化和smith降解
        3.14.7 甲基化結(jié)果分析
4 結(jié)論
5 展望
6 參考文獻(xiàn)
7 攻讀碩士學(xué)位期間論文發(fā)表情況
8 致謝

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2836475