發(fā)布時(shí)間：2020-09-30 11:13

　　 牛肝菌科真菌作為大型真菌的重要類群之一,不僅具有較高的食、藥用價(jià)值,而且蘊(yùn)含大量具良好生物活性或新穎結(jié)構(gòu)的化合物,是一類“創(chuàng)新系數(shù)”極高的生物資源。我國(guó)熱帶地區(qū)地理環(huán)境獨(dú)特,牛肝菌科真菌資源豐富,但是目前對(duì)于該區(qū)牛肝菌科真菌的研究還較少。為此,本研究在對(duì)我國(guó)熱帶地區(qū)進(jìn)行野外考察、標(biāo)本采集的基礎(chǔ)上,對(duì)其形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究,同時(shí)對(duì)202號(hào)相關(guān)標(biāo)本的核糖體大亞基(28S)、編碼核糖體RNA的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)、翻譯延長(zhǎng)因子1-α(tef1)、編碼RNA聚合酶II第二大亞基(rpb2)4個(gè)基因片段進(jìn)行多基因測(cè)序,獲得28S序列192條,ITS序列175條,tef1序列157條,rpb2序列104條�；诖�4個(gè)基因片段構(gòu)建分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù);最后結(jié)合生態(tài)特性、地理分布等數(shù)據(jù)和資料,澄清分類上的混亂,確定牛肝菌科真菌物種。同時(shí),為了對(duì)我國(guó)熱帶地區(qū)豐富的牛肝菌資源進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用,本研究還選取長(zhǎng)頸金牛肝菌Aureoboletus longicollis(Ces.)N.K.ZengMing Zhang、海南黃肉牛肝菌Butyriboletus hainanensis N.K.Zeng,Zhi Q.LiangS.Jiang、橙牛肝菌Crocinoboletus rufoaureus(Massee)N.K.Zeng,Zhu L.YangG.Wu、日本海氏牛肝菌Hemioporus japonicas(Hongo)E.Horak、深褐新牛肝菌Neoboletus obscureumbrinus(Hongo)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang、紅孔新牛肝菌近緣種N.aff.rubriporus(G.WuZhu L.Yang)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang、大津粉孢牛肝菌Tylopilus otsuensis Hongo、暗褐金孢牛肝菌Xanthoconium fusciceps N.K.Zeng,Zhi Q.LiangS.Jiang共8種具有代表性的熱帶牛肝菌科真菌,使用水提醇沉法對(duì)其進(jìn)行粗多糖的提取,Sevage法除蛋白,苯酚硫酸法進(jìn)行多糖含量測(cè)定;對(duì)其粗多糖成分進(jìn)行分子量測(cè)定、紅外光譜分析,使用PMP-HPLC法進(jìn)行單糖組成測(cè)定;通過(guò)DPPH清除實(shí)驗(yàn)、超氧陰離子清除實(shí)驗(yàn)、亞鐵離子還原能力實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其體外抗氧化能力。主要研究結(jié)果如下:1、明確中國(guó)熱帶地區(qū)29個(gè)牛肝菌科真菌物種,并澄清部分分類學(xué)混亂基于分子系統(tǒng)發(fā)育和形態(tài)解剖研究,明確了我國(guó)熱帶地區(qū)的29個(gè)牛肝菌科真菌物種,其中5個(gè)為新種,分別為年來(lái)黃肉牛肝菌Butyriboletus huangnianlaii N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,sp.nov.,大蓋蘭茂牛肝菌Lanmaoa macrocarpa N.K.Zeng,H.ChaiS.Jiang,sp.nov.,紅蓋蘭茂牛肝菌L.rubriceps N.K.ZengHui Chai,sp.nov.,密鱗新牛肝菌Neoboletus multipunctatus N.K.Zeng,H.ChaiS.Jiang,sp.nov.,和淡紅異色牛肝菌Sutorius subrufus N.K.Zeng,H.ChaiS.Jiang,sp.nov.;明確新牛肝菌屬Neoboletus不是異色牛肝菌屬Sutorius的異名,而是一個(gè)獨(dú)立的屬,為此將此前并入異色牛肝菌屬的部分類群歸入新牛肝菌屬,即銹柄新牛肝菌N.ferrugineus(G.Wu,F.LiZhu L.Yang)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.,黃孔新牛肝菌N.flavidus(G.WuZhu L.Yang)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.,海南新牛肝菌N.hainanensis(T.H.LiM.Zang)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.,深褐新牛肝菌N.obscureumbrinus(Hongo)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.,擬血紅新牛肝菌N.sanguineoides(G.WuZhu L.Yang)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.,血紅新牛肝菌N.sanguineus(G.WuZhu L.Yang)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.和絨柄新牛肝菌N.tomentulosus(M.Zang,W.P.LiuM.R.Hu)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.;此外,研究還發(fā)現(xiàn)Boletus quercinus Hongo實(shí)為美柄牛肝菌屬Caloboletus成員,且由于其名字不合法,提出關(guān)羽美柄牛肝菌Caloboletus guanyui N.K.Zeng,H.ChaiS.Jiang,nom.nov.這一新名字;發(fā)現(xiàn)Tylopilus callainus N.K.Zeng,Zhi Q.LiangM.S.Su是B.virescens Har.Takah.Taneyama的晚出異名,并將B.virescens置于粉孢牛肝菌屬Tylopilus中,即藍(lán)綠粉孢牛肝菌Tylopilus virescens(Har.Takah.Taneyama)N.K.Zeng,H.ChaiZhi Q.Liang,comb.nov.。2、明確8種熱帶牛肝菌粗多糖的體外抗氧化活性長(zhǎng)頸金牛肝菌、海南黃肉牛肝菌、橙牛肝菌、日本海氏牛肝菌、深褐新牛肝菌、紅孔新牛肝菌近緣種、大津粉孢牛肝菌、暗褐金孢牛肝菌粗多糖的總糖含量分別為37.70%、35.62%、29.38%、37.25%、60.50%、48.83%、54.53%、32.46%,粗多糖分子量分別為22106 Da、5306 Da、5286 Da、31665 Da、5497 Da、9461 Da、9605 Da、6237 Da;8種牛肝菌的多糖單糖組成存在一定差異,其中葡萄糖、甘露糖和半乳糖的含量最為豐富;紅外光譜對(duì)其結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行初步分析顯示8個(gè)樣品的紅外光譜特征基本相似,推測(cè)8種牛肝菌的粗多糖都含有β型吡喃糖苷鍵。8種牛肝菌粗多糖的DPPH清除能力由大到小為:橙牛肝菌海南黃肉牛肝菌日本海氏牛肝菌紅孔新牛肝菌近緣種長(zhǎng)頸金牛肝菌暗褐金孢牛肝菌大津粉孢牛肝菌深褐新牛肝菌;對(duì)超氧陰離子的清除能力由大到小依次為:紅孔新牛肝菌近緣種橙牛肝菌暗褐金孢牛肝菌日本海氏牛肝菌長(zhǎng)頸金牛肝菌海南黃肉牛肝菌深褐新牛肝菌大津粉孢牛肝菌;對(duì)亞鐵離子的還原能力由大到小依次為:橙牛肝菌海南黃肉牛肝菌紅孔新牛肝菌近緣種長(zhǎng)頸金牛肝菌日本海氏牛肝菌暗褐金孢牛肝菌大津粉孢牛肝菌深褐新牛肝菌。綜合來(lái)看,橙牛肝菌粗多糖的體外抗氧化能力在8種牛肝菌中最顯著。
【學(xué)位單位】：海南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R284;S567.3
【部分圖文】：

1.1 RAxML構(gòu)建的黃肉牛肝菌屬多基因片段（28S, ITS, tef1, rpb2）分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)[BS值（≥ 50%）和PP值（≥ 0.95）標(biāo)注于各分支節(jié)點(diǎn)]ig 1.1 Phylogenetic tree of Butyriboletus inferred from a combined dataset (28S, ITS, tef1,rpb2) using RAxML [BS (≥ 50 %) and PP (≥ 0.95) are indicated above the branches]蘭茂牛肝菌屬基于 3 個(gè)基因片段（28S、ITS、tef1）的分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)見(jiàn)圖2。此分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)共包括了 40 個(gè)樣品，具有 2007 個(gè)核苷酸位點(diǎn)數(shù)。分子統(tǒng)發(fā)育分析顯示，曾念開(kāi) 3006 （FHMU 1967）、曾念開(kāi) 2774（FHMU 2801）、念開(kāi) 2766（FHMU 1756）、曾念開(kāi) 2767（FHMU 1757）和曾念開(kāi) 2773（FHMU63）形成了一獨(dú)立的種級(jí)支系落在蘭茂牛肝菌屬內(nèi)，且獲得很高的支持率（BS 100，PP = 1）；曾念開(kāi) 3021（FHMU 1982）和曾念開(kāi) 2212（FHMU 1763）形了另外一獨(dú)立的種級(jí)支系，也落在蘭茂牛肝菌屬內(nèi)，并獲得強(qiáng)烈支持（BS = 100，P = 1）。

1.2 RAxML構(gòu)建的蘭茂牛肝菌屬多基因片段（28S, ITS, tef1）分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)[BS值（≥50%）和PP值（≥ 0.95）標(biāo)注于各分支節(jié)點(diǎn)] 1.2 Phylogenetic tree of Lanmaoa inferred from a combined dataset (28S, ITS, tef1) usingRAxML [BS (≥ 50 %) and PP (≥ 0.95) are indicated above the branches]新牛肝菌屬、異色牛肝菌屬、Costatisporus T.W. Henkel & M.E. Sm. 和美柄牛菌屬基于4個(gè)基因片段（28S、ITS、tef1、rpb2）的分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)如圖1.3所。此分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)共包括了94個(gè)樣品，具有3228個(gè)核苷酸位點(diǎn)數(shù)。分子系統(tǒng)育分析顯示，新牛肝菌屬、異色牛肝菌屬、Costatisporus T.W. Henkel & M.E. Sm.美柄牛肝菌屬各自形成了獨(dú)立的屬級(jí)支系。曾念開(kāi) 2498（FHMU 1620）和AS 76851形成了一獨(dú)立的種級(jí)支系落在新牛肝菌屬內(nèi)，且獲得高的支持率BS = 100，PP = 1）；曾念開(kāi) 3043（FHMU 2004）、曾念開(kāi) 3045（FHMU 2006）曾念開(kāi) 3140（FHMU 2101）也形成了一獨(dú)立的種級(jí)支系落在異色牛肝菌屬內(nèi)，獲得強(qiáng)烈的支持（BS = 100， PP = 1）；曾念開(kāi) 3257（FHMU 2218）、曾念

21圖1.3 RAxML構(gòu)建的新牛肝菌屬、異色牛肝菌屬、Costatisporus、美柄牛肝菌屬多基因片段（28S, ITS, tef1, rpb2）分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)[BS值（≥ 50%）和PP值（≥ 0.95）標(biāo)注于各分支節(jié)點(diǎn)]Fig 1.3 Phylogenetic tree of Neoboletus, Sutorius, Costatisporus and Caloboletus inferredfrom a combined dataset (28S, ITS, tef1, rpb2) using RAxML [BS (≥ 50 %) and PP (≥ 0.95)are indicated above the branches]

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本文編號(hào)：2830761