目的:清絡飲(QLY)是治療類風濕性關節(jié)炎熱證型的傳統(tǒng)中藥方劑。本研究旨在進一步驗證其對膠原誘導的大鼠關節(jié)炎(CIA)的影響和與甲氨蝶呤(MTX)聯(lián)合使用對類風濕性關節(jié)炎的治療作用,并采用基于超高壓液相色譜-飛行時間質譜(UPLC-Q-TOF/MS)分析技術的代謝組學方法嘗試闡明相關的作用機制。方法:SD大鼠隨機分組后采用牛Ⅱ型膠原造模,不同治療組CIA大鼠分別接受QLY、甲氨蝶呤(MTX)和QLY+MTX的治療。分別從形態(tài)學、影像觀察、組織病理學和血清生物標志物水平分析對給藥組CIA大鼠進行綜合性評價,大鼠尿液的代謝特征采用超高壓液相色譜-飛行時間質譜(UPLC-Q-TOF/MS)的方法采集,并通過一系列多元數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析篩選、獲取。結果:實驗數(shù)據(jù)顯示QLY明顯減輕大鼠CIA嚴重病情,對關節(jié)產(chǎn)生了顯著的保護作用,對MTX誘發(fā)的毒性產(chǎn)生緩解。代謝組學分析發(fā)現(xiàn),CIA大鼠存在氨基酸、脂肪酸和能量代謝紊亂。各治療方案均對上述變化產(chǎn)生不同程度的調節(jié)作用。核心差異代謝物的分析發(fā)現(xiàn),QLY對CIA大鼠體內(nèi)的戊糖磷酸途徑(PPP)和嘧啶代謝的調控,可能與其體內(nèi)的免疫調節(jié)功能和抗風濕活性有密切關聯(lián)。結論:根據(jù)獲得的證據(jù),我們得出了QLY改變磷酸戊糖通路(PPP)和嘧啶代謝,對它們的抑制有助于治療RA,且QLY對MTX誘發(fā)的毒性有緩解作用,因此在臨床的聯(lián)合用藥治療方案設計中需更為縝密。
【學位單位】：皖南醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 CIA 大鼠各組體重2 QLY 緩解 MTX 對大鼠的毒性實驗期間，所有大鼠藥物灌胃后均密切觀察。經(jīng)過多次 MTX 給藥后，一大鼠表現(xiàn)出胃腸反應，如嘔吐、腹瀉和消化不良。治療后期，大多數(shù)大鼠出現(xiàn)血征兆，如活動減少，耳廓色蒼白，疲勞；MTX+QLY 組無異常反應。雖然各大鼠的組織學檢查均未發(fā)現(xiàn)肝臟存在明顯損傷,但在 MTX 治療下血清中 ALT 水顯著增高，而 AST 沒有變化（圖 2A）。血液指標檢測表明，MTX 引起大鼠血紅蛋白（HGB）和紅細胞（RBC）少，聯(lián)合應用 QLY 部分恢復了異常變化（圖 2B）。觀察同時發(fā)現(xiàn)，MTX QLY 對血小板水平（PLT）有類似的作用。這些數(shù)據(jù)證實了 MTX 的肝毒性和液學毒性[13]，并提示 QLY 對 MTX 引起的肝損傷和骨髓抑制具有保護作用。

17注：P*㩳0.05 和 P**㩳0.01，與 CIA 組比較存在有顯著和極為顯著的統(tǒng)計學差異。圖 2 QLY 緩解 MTX 引起的大鼠肝損傷和骨髓抑制：A，血清中丙氨酸轉氨酶（ALT）和天冬酸轉氨酶（AST）濃度；B，全血中血紅蛋白（HGB）和紅細胞（RBC）水平3 CIA 大鼠足踝關節(jié)形態(tài)學觀察第一次誘導造模后 12 天，大鼠的后足出現(xiàn)明顯腫脹（圖 3b），與此同時關節(jié)炎評分顯著增加（圖 3a）。第 24 天開始，局部炎癥逐漸緩解，但關節(jié)嚴變形(圖 4），大鼠運動受限。在整個實驗周期中，MTX 對 CIA 大鼠產(chǎn)生持續(xù)效的治療效果，主要表現(xiàn)為炎癥反應減輕和關節(jié)炎指數(shù)的評分降低。綜合來看QLY 的療效與 MTX 相似。在減輕 CIA 大鼠足爪腫脹程度上聯(lián)合用藥組表現(xiàn)好。

大鼠CIA總體發(fā)展趨勢

【參考文獻】

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1 俞志超;李艷;;李艷應用益腎清絡活血方治療類風濕性關節(jié)炎經(jīng)驗[J];實用中醫(yī)藥雜志;2015年12期

2 陳陽峰;鐘曉紅;;黃柏的藥理作用及其活性成分提取[J];作物研究;2015年05期

3 晁利平;劉艷霞;瞿璐;王濤;張yN;;綿萆參的化學成分及藥理作用研究進展[J];藥物評價研究;2015年03期

4 范敬;;“張一帖”家族醫(yī)學特點[J];中醫(yī)研究;2015年01期

5 范為民;胡怡芳;李艷;;李濟仁教授辨治痹病學術經(jīng)驗擷要[J];風濕病與關節(jié)炎;2014年08期

6 柯朝甫;張濤;武曉巖;李康;;代謝組學數(shù)據(jù)分析的統(tǒng)計學方法[J];中國衛(wèi)生統(tǒng)計;2014年02期

7 顧檢波;李艷;;類風濕性關節(jié)炎熱痹證治經(jīng)驗擷粹[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2013年06期

8 李艷;;國醫(yī)大師李濟仁辨治痹與痿學術思想與經(jīng)驗[J];中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志;2012年12期

9 焦建杰;李芹;劉潔;汪云;李家男;惠洋洋;婁建石;;探針藥物法評價苦參對大鼠細胞色素P450 2E1代謝活性的影響[J];中草藥;2012年09期

10 李艷;劉永坤;;李濟仁教授辨治痹證經(jīng)驗集粹[J];北京中醫(yī)藥大學學報(中醫(yī)臨床版);2007年05期

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1 張凱;國醫(yī)大師經(jīng)驗方“清絡飲”治療濕熱型類風濕性關節(jié)炎的臨床療效觀察[D];皖南醫(yī)學院;2015年

2 毛毛;張鳴鶴教授治療類風濕關節(jié)炎經(jīng)驗擷萃[D];山東中醫(yī)藥大學;2008年

本文編號：2829995