紫斑牡丹(Paeonia rockii)為毛茛科(Ranunculaceae)芍藥屬(Paeonia)多年生木本植物,是我國中西部地區(qū)的特有中藥材和花中珍品,其根皮作為藥用丹皮被甘肅省中藥材標(biāo)準(zhǔn)收載,具有清熱涼血,活血化瘀的功效。為了開發(fā)和利用紫斑牡丹,本文在查閱大量文獻的基礎(chǔ)上,對牡丹的花、籽、根、花粉、葉各部位在食用和藥用方面的研究進展進行了綜述,并圍繞紫斑牡丹花粉開展了有關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其抗氧化活性的研究,主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.紫斑牡丹花粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的初步研究:按照2015版藥典通則的相關(guān)方法,對紫斑牡丹花粉的性狀、顯微特征的進行了研究和描述;測定了總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量;采用TLC法,對紫斑牡丹花粉中的黃酮類成分槲皮素、木犀草素、山奈酚、異鼠李素進行了定性鑒別;采用紫外-可見分分光光度法,對紫斑牡丹花粉中總黃酮的含量進行了測定。結(jié)果表明,紫斑牡丹花粉為黃色粉末,體輕,易飛揚,氣微,味微苦;顯微鏡下可見花粉粒類圓形或橢圓形,表面有網(wǎng)狀雕紋,具三擬孔溝,直徑32-38μm;其總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的平均含量依次為7.45%、1.55%、28.99%;所建立的薄層鑒別方法斑點清晰、專屬性好,可用于紫斑牡丹花粉的定性分析;測得紫斑牡丹花粉中總黃酮的平均含量為15.80mg·g~(-1)。2.響應(yīng)面法優(yōu)化紫斑牡丹花粉中總黃酮的提取工藝:采用Agilent Eclipse plus C18色譜柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.1%磷酸(25:13:62)為流動相等度洗脫,流速:1.0mL·min-1,檢測波長:360nm,柱溫35℃,建立了RP-HPLC法同時測定紫斑牡丹花粉中槲皮素、木犀草素、異鼠李素含量的方法;繼而通過單因素實驗遴選影響紫斑牡丹花粉總黃酮提取工藝的因素和水平,并采用Box-Behnken試驗設(shè)計法,以總黃酮的含量及其3種黃酮類化合物(槲皮素、木犀草素、異鼠李素)的總含量的綜合評分為評價指標(biāo),以乙醇濃度、料液比、提取時間為考察因素,利用響應(yīng)面法對紫斑牡丹花粉總黃酮提取工藝進行優(yōu)化。結(jié)果表明:優(yōu)選得到的最佳提取工藝為乙醇濃度為73%,料液比1:22g/mL,回流提取2次,每次100min;在此條件下,理論值與實際值接近,偏差為1.60%。優(yōu)選的紫斑牡丹花粉總黃酮的提取工藝合理可行。3.紫斑牡丹花粉不同濃度乙醇提取物的抗氧化能力研究:通過測定紫斑牡丹花粉不同濃度乙醇提取物的3種抗氧化能力(銅離子還原能力,DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力),對紫斑牡丹花粉不同濃度乙醇提取物的抗氧化活性進行評價。結(jié)果表明:銅離子還原能力(CUPRAC)法測得紫斑牡丹花粉無水乙醇提取物、75%乙醇提取物、50%乙醇提取物、25%乙醇提取物、水提取物的抗氧化活性沒食子酸量依次為26.00、28.33、28.90、14.98、9.24 mg/g;紫斑牡丹花粉不同濃度乙醇提取物清除DPPH自由基和ABTS自由基能力均均低于Vc,其順序依次為:50%乙醇提取物75%乙醇提取物無水乙醇提物25%乙醇提取物水提取物。紫斑牡丹花粉不同濃度乙醇提取物均具有較強的抗氧化能力,以50%、75%乙醇提物的抗氧化能力最強。
【學(xué)位單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284.1
【部分圖文】：

圖 1.1 紫斑牡丹花粉Fig 1.1 pollen of Paeonia rockii典》通則項下 0211 藥材和飲片少量至載玻片，滴加蒸餾水，平，然后加蓋玻片。放置在電并對其顯微特征進行描述。顯表面有網(wǎng)狀雕紋，具三擬孔溝

圖 1.1 紫斑牡丹花粉Fig 1.1 pollen of Paeonia rockii2.2 鑒別2.2.1 顯微鑒別參照 2015 版《中國藥典》通則項下 0211 藥材和飲片取樣法對紫斑牡丹花粉顯微鑒別。取紫斑牡丹花粉少量至載玻片，滴加蒸餾水，使完全浸潤花粉，用大頭針將粉末與蒸餾水并推平，然后加蓋玻片。放置在電子顯微鏡（10×40 倍和10×100 倍）下進行觀察，并對其顯微特征進行描述。顯微觀察顯示，紫斑牡丹花粉粒呈類圓形或橢圓形，表面有網(wǎng)狀雕紋，具三擬孔溝；直徑 32-38μm。顯微結(jié)構(gòu)圖：見圖 1.2。

2.2.2.3 薄層色譜條件：固定相：硅膠 G254 薄層板展開劑：三氯甲烷-甲醇-水-甲酸(9顯色劑：1%三氯化鋁乙醇溶液，6檢視：紫外光燈(365 nm) 下檢視點樣方式：毛細管點樣點樣量：5 μL展距：8 cm2.2.2.4 薄層色譜薄層色譜見圖 1.3，供試品色譜中，顏色的斑點。紫斑牡丹花粉樣品中均檢表明此方法具有特征性和專屬性，可用

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