目的:中藥莪術(shù)是姜科植物蓬莪術(shù)(Curcuma phaeocaulisValeton)、廣西莪術(shù)(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)和溫郁金(CurcumawenyujinY.H.Chen et C.Ling)的干燥根莖,具有行氣破血、消積止痛的功效,用于治療淤血閉經(jīng),食積脹痛等癥�，F(xiàn)代研究表明其有明顯的抗腫瘤、抗血管生成作用,是臨床上常用的活血化瘀藥物。雖然三種莪術(shù)在臨床上的應(yīng)用大致相同,但成分卻有一定的差異。廣西莪術(shù)的化學(xué)成分與其活血化瘀的藥效之間的相關(guān)性研究還未見(jiàn)報(bào)道。因此本課題通過(guò)對(duì)廣西莪術(shù)活血化瘀藥效及其有效部位的化學(xué)成分進(jìn)行探討,為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)、利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.醋莪術(shù)活血化瘀有效劑量的確定。SD大鼠40只,雌雄各半,隨機(jī)分成正常對(duì)照組,模型組(造模不給藥),醋莪術(shù)高(3.72 g·kg~(-1))、中(1.86 g·kg~(-1))、低(0.93 g·kg~(-1))劑量組,每組8只。除正常對(duì)照組外,其余各組以每日冰水游泳和束縛建立寒凝氣滯血瘀模型,成模后連續(xù)給藥三天,于第四天取材,通過(guò)凝血時(shí)間、血液流變學(xué)等指標(biāo)考察莪術(shù)活血化瘀的有效劑量。2.醋莪術(shù)活血化瘀有效部位的研究。SD大鼠50只,隨機(jī)分為5組,每組10只,即正常對(duì)照組,模型組(造模不給藥),乙酸乙酯部位組(A)、醇部位組(B)、水部位組(C),造模成功后給以相應(yīng)醋莪術(shù)提取物,以各組大鼠凝血時(shí)間、血液流變學(xué)、凝血酶原時(shí)間,部分活化凝血酶時(shí)間和凝血酶時(shí)間等指標(biāo)評(píng)價(jià)藥效。3.醋莪術(shù)活血化瘀的有效部位的成分分離及結(jié)構(gòu)鑒定。將提取到的有效部位上硅膠柱,依次以環(huán)己烷:乙酸乙酯(15:1)、環(huán)己烷:乙酸乙酯(10:1)、環(huán)己烷:乙酸乙酯(10:3)、環(huán)己烷:乙酸乙酯(2:1)、二氯甲烷:甲醇(15:1)、二氯甲烷:甲醇(1:1)梯度洗脫,再將量大的餾分過(guò)凝膠柱脫色素,通過(guò)制備液相分離純化后利用UV、ESI-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR、DEPT鑒定化合物結(jié)構(gòu)。4.醋莪術(shù)有效部位中分得的單體成分進(jìn)行活性初篩。以HUVEC和A549為模型,分別給以不同濃度梯度的姜黃素(陽(yáng)性對(duì)照)和各單體成分,分別于給藥24 h、48 h后用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,考察各成分的抗血管生成和抗腫瘤活性。結(jié)果:1.醋莪術(shù)水煎液高(3.72 g·kg~(-1))、中(1.86 g·kg~(-1))、低(0.93 g·kg~(-1))劑量組均可縮短凝血時(shí)間,降低血漿、全血粘度以及全血高、中、低切相對(duì)指數(shù),提示其有抗凝的作用并呈劑量依賴性,醋莪術(shù)不同部位均顯示一定的抗凝血活性,其中以乙酸乙酯部位活血化瘀效果最佳。2.從醋莪術(shù)乙酸乙酯部位分離純化得到了7個(gè)單體成分,其中Zederone(1)、吉馬酮(2)、curzerene(5)、furanodienone(6)為倍半萜類(lèi)化合物,1-(3,4-dihydroxy-phenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)-(6E)-6-hepten-3-ol(3)、(3R,5R)-3,5-diacetoxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)heptane(4)、1,7-bis(4-hydroxyphenyl)hepta-4E-6E-dien-3-one(7)為姜黃素類(lèi)化合物。3.分離得到的單體成分中,化合物3、4、6、7顯著抑制HUVEC的生長(zhǎng),表現(xiàn)出較好的抗血管生成作用。化合物3、5、6、7顯著抑制A549的生長(zhǎng),表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用。其中化合物7抗腫瘤和抗血管生成作用均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照姜黃素。結(jié)論:醋莪術(shù)乙酸乙酯部位具有較好的活血化瘀作用,從其中分離得到的單體成分7具有較好的抗血管生成作用和抗腫瘤作用,可能是廣西醋莪術(shù)活血化瘀作用的主要活性成分。
【學(xué)位單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類(lèi)】：R284;R285.5
【部分圖文】：

三種主要姜黃素類(lèi)成分結(jié)構(gòu)

方法得到的醋莪術(shù)乙酸乙酯部位成分分析驗(yàn)中考慮到乙酸乙酯層極性較小，水提取效率低，為了提高乙酯直接回流提取得到的乙酸乙酯部位，發(fā)現(xiàn)藥效很好。，為了節(jié)約能源，減少污染，擬采取萃取法提取乙酸乙酯改變對(duì)其中成分有何影響，因此我們分析了不同提取方法成分的影響。酸乙酯部位的制備：見(jiàn)第二章第二節(jié) 2.1 項(xiàng)下。酸乙酯部位的制備：取干燥的醋莪術(shù)飲片，打粉后以 8 倍in，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收后依次用石油醚，乙酸乙酯酸乙酯部位，剩余水層即為水部位。圖如下：

化合物1的1H-NMR譜

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳杰;古金華;馮鈺;陳偉強(qiáng);葉連寶;;莪術(shù)油中吉馬酮的分離、純化及結(jié)構(gòu)鑒定[J];天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā);2015年11期

2 蔡穎;宋s

本文編號(hào)：2824445