目的本實(shí)驗(yàn)通過研究參芪抑瘤方對H22肝癌荷瘤小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)及瘤組織中Bcl-2、Bax、Caspase-3、CytC基因和蛋白表達(dá)的影響,探討參芪抑瘤方對肝癌的抑制作用。方法購買70只昆明小鼠,體重為(20±2)g,雌雄各半,其中10只用于接種腹水,剩余60只采用腋下接種H22肝癌腹水細(xì)胞造模。造模成功后隨機(jī)將小鼠分為六組,每組10只,雌雄各半,分別為模型組、環(huán)磷酰胺組、參芪抑瘤方高劑量組(中藥高劑量組)、參芪抑瘤方中劑量組(中藥中劑量組)、參芪抑瘤方低劑量(中藥低劑量組)、參芪抑瘤方中劑量聯(lián)合環(huán)磷酰胺組(聯(lián)合用藥組)。分組后的第2 d開始給予藥物干預(yù)。參芪抑瘤方高、中、低劑量組分別給予193.75g/kg,96.86g/kg,19.38g/kg,聯(lián)合用藥組和環(huán)磷酰胺組每日給予環(huán)磷酰胺30mg/kg,每日灌胃一次,連續(xù)治療15 d。15 d末小鼠禁食不禁水24 h,24 h后摘取小鼠眼球取血,隨后剝離腫瘤組織和脾臟組織。觀察分析結(jié)果:(1)一般生命狀態(tài);(2)脾指數(shù)、瘤重及抑瘤率;(3)腫瘤組織病理學(xué)形態(tài)變化;(4)小鼠血常規(guī)的變化;(5)小鼠外周血中CD3~+、CD4~+、CD8~+的含量;(6)瘤組織中Bcl-2、Bax、Caspase-3、CytC的相關(guān)基因表達(dá);(7)瘤組織中Bcl-2、Bax、Caspase-3、CytC的相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果1、各組小鼠的生命體征及一般活動(dòng)狀態(tài)存在差異,各中藥治療組及聯(lián)合用藥組情況優(yōu)于模型組和環(huán)磷酰胺組。給藥期間各組小鼠體重變化結(jié)果示:與模型組相比,各治療組小鼠體重均下降,中藥高劑量組及聯(lián)合用藥組的體重下降最為顯著,中藥中、低劑量組及環(huán)磷酰胺組的體重下降其次,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、脾指數(shù)結(jié)果示:與模型組相比,各治療組脾指數(shù)均升高,聯(lián)合用藥組、中藥高劑量組及環(huán)磷酰胺組顯著升高,中藥中、低劑量組略有升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高劑量組及聯(lián)合用藥組的脾指數(shù)均明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、抑瘤率結(jié)果示:與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高劑量組及聯(lián)合用藥組的抑瘤率均升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、血常規(guī)結(jié)果示:與模型組相比,各治療組的白細(xì)胞均下降,環(huán)磷酰胺組顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與環(huán)磷酰胺組相比,中藥各治療組及聯(lián)合用藥組的白細(xì)胞均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,各治療組的紅細(xì)胞均升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高、中劑量組及聯(lián)合用藥組的紅細(xì)胞均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,各治療組的血小板均下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高、中、低劑量組及聯(lián)合用藥組的血小板均明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5、流式細(xì)胞結(jié)果示:與模型組相比,各治療組中CD3~+、CD4~+T細(xì)胞表達(dá)均升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高、中劑量組及聯(lián)合用藥組中CD3~+T、CD4~+T細(xì)胞表達(dá)均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,各治療組中CD8~+T細(xì)胞表達(dá)均下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高、中劑量組及聯(lián)合用藥組中CD8~+T細(xì)胞表達(dá)均明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6、腫瘤組織病理學(xué)結(jié)果示:與模型組相比較,各中藥治療組、環(huán)磷酰胺組及聯(lián)合用藥組中的壞死細(xì)胞在細(xì)胞排列上較疏松,染色變淺,體積縮小,有不同量的壞死細(xì)胞,以中藥高劑量組和聯(lián)合用藥組里面的壞死細(xì)胞最為顯著,低劑量組和環(huán)磷酰胺組相對較少。7、基因及蛋白表達(dá)結(jié)果示:與模型組組相比,各治療組Bcl-2 mRNA及蛋白的表達(dá)均下降,中藥高劑量組、環(huán)磷酰胺組及聯(lián)合用藥組顯著下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高劑量組及聯(lián)合用藥組Bcl-2 mRNA及蛋白的表達(dá)均明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組相比,各治療組瘤組織中Bax、Caspase-3、CytC mRNA及蛋白的表達(dá)均升高,中藥高劑量組、環(huán)磷酰胺組及聯(lián)合用藥組顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與環(huán)磷酰胺組相比,中藥高劑量組及聯(lián)合用藥組Bax、Caspase-3、CytC mRNA及蛋白表達(dá)均明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論參芪抑瘤方可通過線粒體凋亡途徑誘導(dǎo)荷瘤小鼠H22肝癌細(xì)胞凋亡,參芪抑瘤方聯(lián)合環(huán)磷酰胺可有效提高機(jī)體的免疫力,促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,延緩其生長速度。
【學(xué)位單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

各組小鼠的體重變化

各組小鼠的脾指數(shù)

圖 3 瘤重和抑瘤率4.5 血常規(guī)白細(xì)胞結(jié)果示：與模型組相比，各治療組的白細(xì)胞均下降，環(huán)磷酰胺組顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與環(huán)磷酰胺組相比，中藥各治療組及聯(lián)合用藥組的白細(xì)

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本文編號：2821644