【摘要】：目的通過建立硬皮病小鼠模型,觀察紅花水煎液干預(yù)對(duì)硬皮病小鼠皮膚和肺組織纖維化及TGF-β1、IL-10表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討紅花抗SSc組織纖維化的作用機(jī)制。方法將128只BALB/C小鼠隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、醋酸潑尼松組、紅花水煎液組,每組32只;建立硬皮病小鼠模型,造模的同時(shí),空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予生理鹽水灌胃,醋酸潑尼松組和紅花水煎液組分別給予醋酸潑尼松混懸液和紅花水煎液灌胃進(jìn)行藥物干預(yù),在第1周、第2周、第3周、第4周分批處死各組8只小鼠。取肺組織及皮膚制成石蠟切片,進(jìn)行HE染色觀察小鼠皮膚和肺組織病理改變;進(jìn)行Masson染色、Sirius Red染色、Van Gieson染色觀察膠原纖維的分布,測(cè)定皮膚和肺組織膠原纖維含量變化;IHC檢測(cè)皮膚和肺組織TGF-β1、IL-10的定位及表達(dá)。取眼球血提取血清ELISA法檢測(cè)TGF-β1、IL-10的表達(dá)水平。結(jié)果1、皮膚和肺組織HE染色空白對(duì)照組皮膚和肺組織在各個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)無明顯變化,皮膚和肺組織結(jié)構(gòu)清晰完整,無或極少炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。模型對(duì)照組第1周皮膚和肺組織有少量的炎癥性細(xì)胞浸潤(rùn),真皮增厚不明顯;第2周出現(xiàn)真皮增厚,大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);第3周真皮增厚進(jìn)一步,炎癥細(xì)胞減少,出現(xiàn)膠原纖維增生,成纖維細(xì)胞增多;第4周真皮進(jìn)一步增厚,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少,膠原纖維、成纖維細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步增多。醋酸潑尼松組和紅花水煎液組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的炎癥細(xì)胞和膠原纖維較模型對(duì)照組少。2、皮膚和肺組織Masson染色、Sirius Red染色、Van Gieson染色空白對(duì)照組皮膚和肺組織在各個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)未見明顯改變,無或極少膠原纖維增生。第1周模型對(duì)照組皮膚和肺組織出現(xiàn)膠原纖維紊亂,有較少膠原增生;第2、3、4周成纖維細(xì)胞數(shù)量逐漸增多、膠原纖維增生。與模型對(duì)照組比較,酸潑尼松組和紅花水煎液組皮膚和肺組織膠原纖維及成纖維細(xì)胞減少。3、皮膚和肺組織炎癥評(píng)分空白對(duì)照組組織炎癥評(píng)分在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)無明顯變化(P0.05)。各建模組炎癥在第1、2周逐漸升高,在第2周達(dá)到高峰;第3、4周炎癥逐漸減少,但仍高于空白對(duì)照組小鼠。經(jīng)醋酸潑尼松和紅花干預(yù)后藥物干預(yù)組炎癥較模型對(duì)照組減輕(P0.05)。4、皮膚和肺組織膠原纖維含量變化空白對(duì)照組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)膠原纖維無明顯改變(P0.05)。與空白對(duì)照組比較,模型對(duì)照組各個(gè)觀察點(diǎn)小鼠膠原纖維均增多(P0.05),且隨著建模時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增加。經(jīng)藥物干預(yù)后,醋酸潑尼松組和紅花水煎液組膠原纖維含量較模型對(duì)照組下降(P0.05)。5、皮膚和肺組織TGF-β1、IL-10 IHC檢測(cè)空白對(duì)照組皮膚和肺組織TGF-β1和IL-10蛋白表達(dá)量無明顯改變(P0.05)。與空白對(duì)照組比較,建模各組小鼠皮膚和肺組織中TGF-β1、IL-10的表達(dá)在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)升高(P0.05)。與模型對(duì)照組比較,醋酸潑尼松組和紅花水煎液組TGF-β1、IL-10表達(dá)量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6、血清中TGF-β1、IL-10 ELISA檢測(cè)空白對(duì)照組血清中TGF-β1和IL-10較低,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)變化不明顯(P0.05)。與空白對(duì)照組比較,建模各組小鼠組織中TGF-β1、IL-10水平在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)升高(P0.05)。與模型對(duì)照組比較,醋酸潑尼松組和紅花水煎液組TGF-β1、IL-10表達(dá)在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1、在博來霉素誘導(dǎo)的硬皮病小鼠皮膚和肺組織中存在TGF-β1、IL-10表達(dá)升高。2、紅花水煎液可能通過降低TGF-β1、IL-10的表達(dá)水平,減輕免疫炎癥,緩解硬皮病組織纖維化的進(jìn)程。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

狁?TGF-β1、IL-10 表達(dá)的影響 2017 屆碩士學(xué)位論文66圖2-1 肺組織HE 染色（×200）Fig.2-1 MouselungHEstaining附 圖

狁?TGF-β1、IL-10 表達(dá)的影響 2017 屆碩士學(xué)位論文67圖2-2 皮膚 HE 染色（×200）Fig.2-2 MouseskinHE staining

狁?TGF-β1、IL-10 表達(dá)的影響 2017 屆碩士學(xué)位論文68圖3-1 肺組織Masson 染色（×200）Fig.3-1MouselungMassonstaining

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2803292