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蒼術(shù)燥性物質(zhì)基礎(chǔ)研究及其運(yùn)用初探

發(fā)布時間:2020-08-23 14:28
【摘要】:1目的燥性是蒼術(shù)的重要性能,本研究通過建立全面的蒼術(shù)燥性表征方法,來確證蒼術(shù)的燥性部位,進(jìn)而更好地確定蒼術(shù)燥性關(guān)鍵成分,最后利用蒼術(shù)的燥性物質(zhì)對局灶性腦缺血導(dǎo)致的腦水腫的預(yù)防治療作用進(jìn)行初步探索,為進(jìn)一步拓展蒼術(shù)的臨床應(yīng)用提供參考。2方法2.1蒼術(shù)燥性表征研究及燥性部位的篩選以健康大鼠為對象,分別給予高、低劑量的生蒼術(shù)、麩蒼術(shù)水浸膏和揮發(fā)油灌胃21天,基于燥勝則干的理論,選擇大鼠飲水量、頜下腺組織形態(tài)、尿量及腎臟中水通道蛋白2(AQP2)的表達(dá)、血液流變學(xué)為指標(biāo),考察各組的燥性效應(yīng)。2.2蒼術(shù)揮發(fā)油燥性譜效關(guān)系研究采用GC-MS(氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用)法對不同批次蒼術(shù)(S1~S9)揮發(fā)油進(jìn)行分析,建立蒼術(shù)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜,以大鼠日均飲水量、全血黏度、腎臟中水通道蛋白2(AQP2)含量為蒼術(shù)燥性效應(yīng)藥效指標(biāo),采用灰色關(guān)聯(lián)度分析法和正交偏最小二乘法相結(jié)合分析其譜效關(guān)系。2.3蒼術(shù)燥性物質(zhì)對小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷導(dǎo)致的腦水腫藥效學(xué)初探將C57小鼠分為4個組別,分別為正常組、模型組、生蒼術(shù)揮發(fā)油組、β桉葉醇組,正常組和模型組每日灌胃等體積生理鹽水,生蒼術(shù)揮發(fā)油組每日給藥250 mg/kg的生蒼術(shù)揮發(fā)油溶液,β桉葉醇組每日給藥75mg/kg的β桉葉醇溶液,連續(xù)給藥7天后,造MCAO模型(局灶性腦缺血模型),分別對各組小鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評分,測量各組大鼠大腦含水量,TTC染色測量各組腦梗死面積。同時,研究了3天給藥和7天給藥的給藥方式,以及25 mg/kg給藥劑量和75 mg/kg給藥劑量的給藥方式,考察β桉葉醇預(yù)防小鼠缺血性腦損傷的時間依賴性和劑量依賴性。3結(jié)果3.1蒼術(shù)燥性表征研究及燥性部位的篩選生蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組大鼠與大豆油組相比,飲水量顯著增加(P0.05),頜下腺腺泡萎縮,尿量顯著增加(P0.05),水通道蛋白2的表達(dá)顯著降低(P0.05),血液黏度顯著增加(P0.05)。麩蒼術(shù)揮發(fā)油高低劑量組與生蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組相比,差異顯著。而生蒼術(shù)、麩蒼術(shù)水浸膏組與生理鹽水組比較,無顯著差異。3.2蒼術(shù)揮發(fā)油燥性譜效關(guān)系研究蒼術(shù)發(fā)揮燥性效應(yīng)可能是多種成分共同作用的結(jié)果,其中對燥性作用藥效貢獻(xiàn)較大的兩個峰分別為31、33號峰,經(jīng)過譜庫檢索分析鑒定出的兩個峰對應(yīng)的成分分別為β桉葉醇、異愈創(chuàng)木醇。3.3蒼術(shù)燥性物質(zhì)對小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷導(dǎo)致的腦水腫藥效學(xué)初探蒼術(shù)揮發(fā)油和β桉葉醇對局灶性腦缺血腦損傷導(dǎo)致的腦水腫雖然有所改善,但不具有統(tǒng)計學(xué)差異;而β桉葉醇對該腦水腫并發(fā)癥腦梗死有顯著改善作用,且表現(xiàn)出較好的神經(jīng)保護(hù)作用。同時,時間依賴性實(shí)驗(yàn)顯示,3天給藥預(yù)防效果不如7天,劑量依賴性實(shí)驗(yàn)顯示高低劑量均有較好的預(yù)防作用。4結(jié)論本研究初步建立了比較全面的蒼術(shù)燥性效應(yīng)評價體系,確證了蒼術(shù)的主要燥性部位是揮發(fā)油部位,揭示了蒼術(shù)麩炒減燥的機(jī)理不僅僅與揮發(fā)油的總含量下降有關(guān),還可能與揮發(fā)油中的燥性成分轉(zhuǎn)化有關(guān)。本研究初步明確了蒼術(shù)主要燥性成分,為蒼術(shù)燥性物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了參考。初步探討了蒼術(shù)燥性物質(zhì)對相關(guān)水腫的預(yù)防治療作用,為蒼術(shù)燥性物質(zhì)的臨床應(yīng)用提供了一定參考。
【學(xué)位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R284.1;R285
【圖文】:

頜下腺,尿量,蒼術(shù),低劑量


麩蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組 麩蒼術(shù)揮發(fā)油低劑量組圖 1-1 頜下腺 HE 染色圖(×400)3.3 大鼠的尿量和腎中 AQP2 的含量生麩蒼術(shù)對大鼠的尿量影響見圖 1-2,由圖 1-2 可以看出,與大豆油組相比,生蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組和生蒼術(shù)揮發(fā)油低劑量組的尿量均顯著增加(P<0.05),且生蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組明顯比生蒼術(shù)揮發(fā)油低劑量組增加更多,而麩蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組和低劑量組均無顯著性差異(P>0.05);與生理鹽水組比較,生蒼術(shù)水浸膏高劑量組、生蒼術(shù)水浸膏低劑量組、麩蒼術(shù)水浸膏高劑量組、麩蒼術(shù)水浸膏低劑量組的尿量變化無顯著性差異(P>0.05)。且生蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組的尿量與生蒼術(shù)水浸膏高劑量組的尿量具有顯著性差異(P<0.05)。與生蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組相比,麩蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組的尿量顯著減少(P<0.05)。

尿量,大鼠,光密度值


圖 1-2 大鼠的尿量( ±s,n=10)*P<0.05 代表具有極顯著性差異;NS 代表無顯著性差異。圖 1-3 大鼠腎臟中 AQP2 的光密度值( ±s,n=10)

光密度值,蒼術(shù),低劑量


11圖 1-3 大鼠腎臟中 AQP2 的光密度值( ±s,n=10):*P<0.05 代表具有顯著性差異;NS 代表無顯著性差異。免疫組化切片圖見圖 1-4,由圖 1-4 可以看出,與大發(fā)油高劑量組和生蒼術(shù)揮發(fā)油低劑量組 AQP2 的表術(shù)揮發(fā)油高劑量組和低劑量組均無明顯差異;與生理水浸膏高劑量組、生蒼術(shù)水浸膏低劑量組、麩蒼術(shù)水術(shù)水浸膏低劑量組的 AQP2 表達(dá)無明顯減少。麩蒼術(shù)蒼術(shù)揮發(fā)油高劑量組相比,具有明顯差異。生蒼術(shù)揮

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本文編號:2801638

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