【摘要】：目的:構(gòu)建雌性大鼠去勢模型,通過刺芒柄花素對大鼠子宮、胸主動脈和乳腺組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞中IGF-1R和ICAM-1蛋白及相應(yīng)mRNA表達(dá)量的影響,以期了解刺芒柄花素對血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制,從而為刺芒柄花素發(fā)揮心血管保護(hù)作用提供理論基礎(chǔ)。方法:選取40只體重大約200~220 g的健康成年雌性SD大鼠。將其隨機(jī)分為四組,分別為假手術(shù)組、模型組、8 mg/kg/d濃度的藥物組、16 mg/kg/d濃度的藥物組。手術(shù)五天后,根據(jù)大鼠體重按照1mL/100g計(jì)算,假手術(shù)組和模型組給予生理鹽水灌胃,藥物組給予刺芒柄花素灌胃,為期40天。給藥結(jié)束后,大鼠經(jīng)頸動脈放血處死,取出各組大鼠子宮、胸主動脈和乳腺組織。通過熒光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白印記(Western-Blot)分別檢測大鼠子宮組織中的IGF-1R和ICAM-1 mRNA及相應(yīng)蛋白的表達(dá)情況。最后采用免疫組化法定性觀察子宮、胸主動脈和乳腺組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞中IGF-1R和ICAM-1的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:1.通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析各組大鼠子宮重量及子宮系數(shù),結(jié)果表明,模型組的子宮重量及系數(shù)低于假手術(shù)組,而藥物組的子宮重量及系數(shù)高于模型組,說明刺芒柄花素具有擬雌激素作用,可以促進(jìn)去勢大鼠子宮的生長。2.qRT-PCR和Western-Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明,與假手術(shù)組相比,模型組大鼠子宮組織中IGF-1R和ICAM-1的表達(dá)量顯著降低;而與模型組相比,藥物組中IGF-1R和ICAM-1的表達(dá)量明顯增加,說明大鼠去勢后子宮組織中IGF-1R和ICAM-1的表達(dá)量降低,而給予刺芒柄花素藥物治療后可增加IGF-1R和ICAM-1的表達(dá)量。3.免疫組化結(jié)果顯示,IGF-1R和ICAM-1在模型組中的表達(dá)量顯著低于假手術(shù)組;而與模型組相比,藥物組血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上ICAM-1和IGF-1R蛋白的表達(dá)增強(qiáng),與qRT-PCR和Western-Blot結(jié)果相一致。結(jié)論:刺芒柄花素通過調(diào)節(jié)大鼠子宮、胸主動脈和乳腺組織血管內(nèi)皮細(xì)胞中IGF-1R和ICAM-1的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管生成,發(fā)揮心血管保護(hù)作用,本研究為刺芒柄花素在心血管疾病中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖 2-3 刺芒柄花素對去勢大鼠子宮、血管和乳腺組織中 ICAM-1 蛋白表達(dá)水平的影響(40×)Figure 2-3 The effect of formononetin on the expression level of ICAM-1 protein in uteri, thoracicaoand breast tissues of OVX rats (40×)注：Sham 是假手術(shù)組，OVX 是模型組， 8mg/kg/dF 是濃度為 8mg/kg/d 的藥物組，16mg/kF 是濃度為 16 mg/kg/d 的藥物組，scale bar：50 μm。表 2-2 四組大鼠子宮組織 ICAM-1 蛋白表達(dá)的分析Table 2-2 The expression of ICAM-1 protein in uteri tissues of four groups分組 切片等級- + ++ ++假手術(shù)組 10 0 0 4 6模型組 10 2 4 4 08 mg/kg/d 藥物組 10 0 1 4 5

圖 2-4 刺芒柄花素對去勢大鼠子宮、血管和乳腺組織中 IGF-1R 蛋白表達(dá)水平的影響(40×)Figure 2-4 The effect of formononetin on the expression level of IGF-1R protein in uteri, thoracicaortaand breast tissues of OVX rats (40×)注：Sham 是假手術(shù)組，OVX 是模型組，OVX+F 是濃度為 8mg/kg/d 的藥物組，OVX+F 是濃度為 16 mg/kg/d 的藥物組，scale bar：50 μm。表 2-5 四組大鼠子宮組織 IGF-1R 蛋白表達(dá)的分析Table 2-5 The expression of IGF-1R protein in uteri tissues of four groups分組 切片等級- + ++ +++假手術(shù)組 10 0 1 2 7模型組 10 3 6 1 08 mg/kg/d 藥物組 10 1 1 4 4

圖 2-1A 圖 2-1 B圖 2-1 刺芒柄花素對去勢大鼠的子宮組織中 ICAM-1 和 IGF-1R mRNA 的表達(dá)含量影響Figure 2-1 The effect of formononetin on the expression of ICAM-1and IGF-1R mRNAin the uteri ofOVX rats注：A 和 B 分別是以 β-actin 為內(nèi)參，應(yīng)用熒光定量 PCR 檢測 ICAM-1 和 IGF-1RmRNA 表達(dá)含量的結(jié)果。Sham 為假手術(shù)組，OVX 是模型組，16mg/kg/dF 是藥物組。*代表 P<0.01，**代表 P<0.01。實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。2.3 IGF-1R 和 ICAM-1 蛋白的表達(dá)采用 Western-Blot 分析各組子宮組織中 ICAM-1 和 IGF-1R 蛋白的表達(dá)量，其中圖 2-2 A 和圖 2-2 B 分別為 ICAM-1 和 IGF-1R 蛋白的表達(dá)量。結(jié)果表明，與假手術(shù)組相比，模型組中 ICAM-1 和 IGF-1R 蛋白的表達(dá)量明顯

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2787470