【摘要】：內(nèi)生真菌獨特的生存環(huán)境使其具有產(chǎn)生新穎化合物的潛力,是活性天然產(chǎn)物的重要來源。間座殼屬真菌Diaporthe pseudomangiferae以及曲霉屬真菌Aspergillus flavus是從有毒藥用植物娃兒藤中分離得到的兩株內(nèi)生真菌。為獲得結(jié)構(gòu)新穎的活性化合物,本研究綜合利用多種色譜分離技術(shù)(硅膠柱色譜,凝膠柱色譜,反相制備液相色譜等)對這兩株內(nèi)生真菌乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究。同時運用UV,IR,MS,1DNMR,2DNMR,ECD等光譜、波譜技術(shù)對分離得到的單體化合物進行結(jié)構(gòu)測定或鑒定。共從兩株內(nèi)生真菌中獲取了50個化合物(1*-50),包括21個新化合物:從D.pseudomangiferae中分離鑒定了 28個化合物(1*-28),其中10個為新化合物(1*-10*);從A.favus中分離鑒定了 22個化合物(29*-50),其中11個為新化合物(29*-39*)。化合物1*-6*為dothiorelone G(Csn-B)的衍生物。化合物29*是兩個杜松烷型倍半萜通過酯鍵形成的二聚體。化合物30*-36*均為4,5位雙鍵且15位為羧基的杜松烷型倍半萜。本研究對分離得到的化合物進行了系統(tǒng)的體外藥理模型篩選,包括抗纖維化、細胞毒、肝保護、抗菌、抗炎、抗糖尿病等活性。結(jié)果顯示:(1)化合物1*,4*,10*,14,16,19,20,27具有抑制人肺成纖維細胞活化的作用,抑制率分別為17.36%,59.17%,64.04%,62.92%,41.05%,32.85%,52.05%,46.26%(10μM)。(2)化合物18,19,21,23對人胃癌細胞BGC-823具有選擇性細胞毒作用,IC50分別為8.14,4.39,1.47,8.56μM�；衔�43對人結(jié)直腸癌細胞HCT-116,人肝癌細胞HepG2,人胃癌細胞BGC-823,人肺癌細胞A549,人乳腺癌細胞MCF7具有細胞毒活性,IC50分別為4.66,7.37,6.42,3.76,6.91 u�；衔�49對人乳腺癌細胞MCF7具有選擇性細胞毒活性,IC50為2.58μM。(3)在抗糖尿病模型中,化合物18具有抑制PTP1B酶的活性,IC50為1.44μM。(4)化合物32-36,39,42-44,46可以改善撲熱息痛(APAP,8mM)對人肝癌細胞HepG2的損傷。此外,本研究對杜松烷型倍半萜的生源途徑進行探討。推測化合物29*-36*以及40-42是由關(guān)鍵中間體Ⅰ和Ⅱ轉(zhuǎn)化形成。其中,中間體Ⅱ經(jīng)過Bayer-Villiger反應(yīng)形成1,2位裂環(huán)或2,3位裂環(huán)的杜松烷型倍半萜。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284.1;R285
【圖文】：

邐２７邐２８逡逑圖２．１化合物１－２８的結(jié)構(gòu)逡逑２．１．３新化合物的結(jié)構(gòu)鑒定逡逑化合物邋１＊邋ａｅｅｔｏｘｙｌｄｏｔｈｉｏｒｅｌｏｎｅ邋Ｂ逡逑ＯＨ邋Ｏ邐ＯＨ邋Ｏ逡逑Ｈ邋愚，，２＂逡逑圖２．２化合物１＊的結(jié)構(gòu)及其主要的１Ｈ－＾邋ＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ信號逡逑化合物１＊白色粉末；高分辨質(zhì)譜（ＨＲ－ＥＳＩ－ＭＳ）顯示準(zhǔn)分子離子峰ｍ／ｚ逡逑４０３．１７２８邋［Ｍ邋＋邋Ｎａ］＋，提示化合物１＊的分子式為Ｃ２０Ｈ２８Ｏ７。屮ＮＭＲ圖譜（表２．３）逡逑３６逡逑

北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院＆中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院邐碩士研究生學(xué)位論文逡逑顯示化合物邋１＊具有邋２邋個芳香氫信號邋ｄ＇Ｈ邋６．２６邋（１Ｈ，ｄ，邋Ｊ＝邋２．２邋Ｈｚ．邋Ｈ－６邋），邋６．２０邋（１Ｈ，邋ｄ，Ｊ逡逑＝２．２邋Ｈｚ，Ｈ－４）；邋３邋個甲基信號＆邋２．０３邋（３Ｈ，邋ｓ，Ｈ－２＂），邋１．２５邋（３Ｈ，ｔ，■／＝邋７．１邋Ｈｚ，Ｈ－２，），０．８９逡逑（３Ｈ，邋ｔ，７．５邋Ｈｚ，Ｈ－１６）。１３Ｃ邋ＮＭＲ圖譜（表２．２）顯示化合物１＊具有３個羰基信號逡逑處２０８．６邋（Ｃ－９），１７３．５邋（Ｃ－１），邋１７２．９邋（Ｃ－ｒ）；邋６邋個芳香碳信號處１６１．３（（：－５），１５９．８（（：－逡逑７），邋１３７．０邋（Ｃ－３），邋１２１．２邋（Ｃ－８），邋１１１．７邋（Ｃ－４），邋１０２．７邋（Ｃ－６）；邋１邋個連氧次甲基信號扣邋７６．９逡逑（Ｃ－１４）；邋７邋個亞甲基信號扣６１．８（（：－１，），４５．０（（：－１０），４０．５（（：－２），３４．６（（：－１３），２８．１（＜：－逡逑１５），２６．２（０１２），２５．４（（：－１１）和３個甲基信號處２１．１（（：－２＂），１４．５（（：－２，），９．９（（：－１６）。逡逑比對核磁數(shù)據(jù)，推測化合物１＊是化合物１４的Ｃ－１４位羥基乙�；苌铩＃龋停拢缅义蠄D譜顯示Ｈ－１４，邋Ｈ－２〃與Ｃ－ｌ〃相關(guān)，Ｈ－１２，邋Ｈ－１６，邋Ｈ－２＂與Ｃ－１４相關(guān)進一步確定化合逡逑物１＊的結(jié)構(gòu)如圖２．２所示。采用手性柱對化合物１＊進行分析（圖２．３），發(fā)現(xiàn)化逡逑合物１＊存在（＋）／（－）兩種異構(gòu)體，比例為５：邋３。結(jié)合１＊的［６１招值（＋邋１．６０，邋ｃ邋０．２５，逡逑ＭｅＯＨ），判斷化合物１＊為未完全消旋的外消旋體。綜上

比對核磁數(shù)據(jù)，推測化合物１＊是化合物１４的Ｃ－１４位羥基乙�；苌铩＃龋停拢缅义蠄D譜顯示Ｈ－１４，邋Ｈ－２〃與Ｃ－ｌ〃相關(guān)，Ｈ－１２，邋Ｈ－１６，邋Ｈ－２＂與Ｃ－１４相關(guān)進一步確定化合逡逑物１＊的結(jié)構(gòu)如圖２．２所示。采用手性柱對化合物１＊進行分析（圖２．３），發(fā)現(xiàn)化逡逑合物１＊存在（＋）／（－）兩種異構(gòu)體，比例為５：邋３。結(jié)合１＊的［６１招值（＋邋１．６０，邋ｃ邋０．２５，逡逑ＭｅＯＨ），判斷化合物１＊為未完全消旋的外消旋體。綜上，化合物１＊命名為逡逑ａｃｅｔｏｘｙｄｏｔｈｉｏｒｅｌｏｎｅ邋Ｂ。逡逑：：：＾－邋Ｕ｜邐ｎ－ｏ－，，…邐邐邐邋．．Ｔ｜１．｜ｉｒ＾Ｌ川」■邋ｌ邋■逡逑圖２．３化合物１＊的手性分析圖逡逑化合物邋２＊邋（１５ｉＳ）－ａｃｅｔｏｘｙｄｏｔｈｉｏｒｅｌｏｎｅ邋Ａ逡逑ＯＨ邋Ｏ邐３邐Ｏ邋Ｂ逡逑0邋１邋0邋１，邋ｚ邐0邋１邋0邋１，邋２，逡逑Ａ逡逑圖２．４化合物２＊的結(jié)構(gòu)及其主要的１Ｈ」Ｈ邋ＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ信號逡逑３７逡逑

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 王維嘉;王淵;吳喬;;核受體TR3/Nur77與腫瘤治療[J];中國細胞生物學(xué)學(xué)報;2015年05期

2 張一;李曉明;尚卓;李春順;王斌貴;;紅樹林植物木欖根際土壤真菌Penicillium sp. MA-37的化學(xué)成分研究[J];海洋科學(xué);2013年02期

本文編號：2778710