【摘要】：迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)富含鼠尾草酸(carnosic acid)、鼠尾草酚(carnosol)、迷迭香酸(rosmarinic acid )、迷迭香酚(rosmanol )、迷迭香醌(rosmariquinone )、咖啡酸(caffeic acid )、迷迭香二酚( rosmaridiphenol )、熊果酸(ursolic acid)等多種活性成分,有顯著的抗氧化、抗炎、抑菌和抑制腫瘤等生物學功能等,因此有很高的藥用價值和食用價值。本論文以人肝癌細胞(HepG2)為模式生物,對迷迭香提取物(RE)的體外抗氧化活性進行了探究,并對其生效的分子機制進行初步分析。本課題的研究將對迷迭香資源的科學開發(fā)和營養(yǎng)膳食干預產(chǎn)生重要理論意義和實際應用價值。實驗通過MTT法檢測RE對HepG2細胞活力的影響,另予以不同濃度H202檢測其對細胞的損傷作用。之后選取合適濃度的RE培養(yǎng)細胞,MTT法檢測RE對H202誘導氧化損傷的細胞活力;并給予2',7'-Dichlorofluorescin(DCFHDA)探針,使用激光共聚焦顯微鏡檢測細胞內(nèi)氧自由基(ROS)含量;通過加入monochlorobimane( MCB)探針,使用激光共聚焦顯微鏡檢測胞內(nèi)谷胱甘肽(GSH)-含量。彗星實驗方法檢測細胞核內(nèi)DNA損傷水平,并通過RT-PCR檢測細胞內(nèi)相關基因mRNA的表達水平。實驗中發(fā)現(xiàn),RE能夠顯著緩解細胞受H202誘導的氧化損傷程度,顯著降低受損傷細胞的ROS含量,增加GSH含量、顯著抑制H202誘導的核內(nèi)DNA損傷情況,并調(diào)節(jié)相關抗氧化基因的表達水平。將RE置于高溫條件(60℃)存儲不同時間,液相(LC)檢測其中組成成分的含量變化,并通過DPPH法檢測其抗氧化水平,MTT法檢測其不同加工時間RE對H202誘導氧化損傷的細胞活力的影響,并檢測其ROS,GSH含量。研究結果表明,RE能夠顯著緩解H202誘導氧化損傷的所致實驗細胞HepG2的損傷,調(diào)節(jié)體內(nèi)內(nèi)源性抗氧化基因mRNA的表達水平,增加GSH等抗氧化因子的含量,抑制過氧化產(chǎn)物的累積,提高模式生物清除體內(nèi)ROS的能力,改善抗氧化能力;此外,加工后的RE鼠尾草酸含量大幅降低,鼠尾草酚含量上升,同時細胞實驗發(fā)現(xiàn)加工后的RE提取物抗氧化能力下降,推測RE的抗氧化能力可能與鼠尾草酸的含量正相關。
【學位授予單位】：天津科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285
【圖文】：

Ｆｉｇ．邋Ｉ邋－邋ｌ邋Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ邋ａｎｄ邋ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ邋ｏｎ邋ｃａｒｎｏｓｉｃ邋ａｃｉｄ逡逑Ｙｉｎｇ等丨３２１、Ｄｏｏｌａｅｇｅ等丨３３１和Ｍａｓｕｄａ丨３４】采用卜１Ｉ）ＬＣ定性分析發(fā)現(xiàn)，在乙醇溶液中逡逑鼠尾草酸容易軾化為鼠尾單酸醌，鼠尾草酸酗經(jīng)加熱形成鼠尾草酚，鼠尾草酚進一步逡逑轉(zhuǎn)化為迷迭香酚、表迷迭香酚等（圖卜１），從而降低其抑菌和抗氧化能力。Ｍｕｌｉｉｉａｃｃｉ逡逑等１３５１研究亦發(fā)現(xiàn)，迷迭香植物細胞中含有的氧化酶能夠氧化迷迭香酸的羥基，降低其抗氧化活性，并且在提S喂討腥薌梁械乃嗄芄患鈾偈笪膊菟嶙笪膊莘�。辶x希櫻簦澹觶澹畹缺冉狹聳笪膊菟�、镁夵详Y岷兔緣惴擁奶逋飪寡躉芰�，发现其抗氧辶x匣钚砸來蔚菁酰懟＃茫酰觶澹歟椋澹虻妊衃偡⑾鄭緣闃惺笪膊菟�、鼠尾草酚、镁夵详Y徨義系目寡躉芰η坑諂浜械目Х人�、镁夵香窊砣捂y剩常保蕁＝徊窖芯勘礱鰨緣闥徨義蝦褪笪膊菟崾敲緣闃謝钚宰釙康淖櫸鄭隋吻宄芰Γ桑茫擔胺直鷂玻泛灣義希常玻擼椋停保常叮常罰�。辶x希保醋雜苫靛義纖ダ鮮且桓鱟勻壞�、蒂Z祿寤苤鸞ネ嘶墓�，淤|(zhì)艿交肪澈圖膊〉茸酆獻麇義嫌謾４硬煌慕嵌取⒉唬偷奈恢靡約安煌姆椒ń醒芯�，得到祿闲箯Pダ匣頻慕徨義瞎部隙ㄊ遣瘓∠嗤�，灾O鐘械目蒲跫攏苣巖桓哦坼灞姹鸕降綴沃炙ダ匣義

本文編號：2777828