【摘要】：目的通過觀察外用骨痛膏對兔激素性股骨頭壞死骨組織中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2)和血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的表達(dá)的影響以及組織學(xué)改變,觀察傳統(tǒng)外用中藥骨痛膏對激素性股骨頭壞死的療效,初步探討其作用機制,為骨痛膏在臨床中的應(yīng)用提供實驗依據(jù)。方法選取30只雄性新西蘭大白兔,采用改良的脂多糖聯(lián)合甲基強的松龍的造模方法,建立兔激素性股骨頭壞死動物模型。造模完成后采用X線及MRI檢查進(jìn)行模型鑒定。動物模型鑒定成功后將實驗動物隨機分三組:空白組、模型組及實驗組。將實驗組兔子雙側(cè)髖關(guān)節(jié)毛發(fā)剔除干凈,將骨痛膏涂抹于透氣棉布上,大小約10*10cm,外敷于雙側(cè)髖部,隔日換藥,連續(xù)應(yīng)用4周,模型組及空白組僅常規(guī)飼養(yǎng)。4周后,處死實驗動物,取出雙側(cè)股骨頭行HE染色,顯微鏡下作組織學(xué)觀察,統(tǒng)計各組空骨陷窩率;通過免疫組化檢測各組股骨頭組織BMP-2及VEGF表達(dá)。結(jié)果1、造模前所有兔子精神狀態(tài)良好,毛色鮮亮有光澤,對外界刺激反應(yīng)敏感,進(jìn)食量正常,大小便正常。大部分兔子在注射激素后出現(xiàn)精神狀態(tài)萎靡,毛發(fā)蓬松,色澤較暗淡,少量脫毛,活動較造模前減少,對外界刺激反應(yīng)遲鈍,進(jìn)食量減退,部分出現(xiàn)腹瀉,體重稍減輕。MRI T1加權(quán)相可見股骨頭內(nèi)片狀低信號,T2抑脂相可見股骨頭內(nèi)片狀不均勻信號,髖關(guān)節(jié)積液,證實造模成功。2.治療后股骨頭大體形態(tài)觀察:①空白組:股骨頭形態(tài)完整,表面光滑,整體呈瓷白色,未見軟骨面的塌陷,骨質(zhì)堅硬,切開費力;②模型組:股骨頭形態(tài)完整,軟骨面未見明顯塌陷,股骨頭表面光澤稍暗淡,整體呈青色,骨皮質(zhì)明顯變薄,骨質(zhì)較疏松,易于切開;③實驗組組:股骨頭形態(tài)完整,軟骨面未見明顯塌陷,股骨頭表面有光澤,整體呈淡白色,軟骨較透明,骨質(zhì)較堅硬,切開需要一定力度。3.各組股骨頭HE染色觀察:①空白組:骨小梁規(guī)則整齊排列,骨細(xì)胞清晰可見,細(xì)胞核較大、位于中央,髓腔內(nèi)造血細(xì)胞豐富,脂肪少,空骨陷窩率為9.128%;②模型組:股骨頭表面軟骨層變薄,骨組織連續(xù)性中段,骨小梁排列雜亂、變細(xì)、變疏,部分骨小梁出現(xiàn)斷裂,骨細(xì)胞核固縮,胞核變小,陷窩內(nèi)骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少,空骨陷窩數(shù)量增多,髓腔內(nèi)造血細(xì)胞減少,被大量肥大的脂肪細(xì)胞充斥,有的融合成泡狀,空骨陷窩率為19.5920%;③實驗組:股骨頭表面軟骨層輕微變薄,骨組織連續(xù)性尚可,骨小梁排列較規(guī)則,稍變細(xì),破壞不明顯,可見新骨生成,骨細(xì)胞分布有規(guī)律,髓腔內(nèi)可見造血細(xì)胞,脂肪細(xì)胞未見明顯增生增多,空骨陷窩率為15.2130%。各組空骨陷窩率經(jīng)方差分析,同空白組相比,模型組與實驗組空格陷窩率均較高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),證實造模成功;模型組與實驗組之間有明顯差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4.免疫組化檢測結(jié)果:①模型組和實驗組BMP-2和VEGF的表達(dá)均低于空白組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);②實驗組BMP-2和VEGF的表達(dá)高于模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論1.脂多糖聯(lián)合甲強龍誘導(dǎo)激素性股骨頭壞死動物模型的方法,動物死亡率低,造模成功率高,簡單可靠。2.激素性股骨頭壞死的發(fā)生與進(jìn)展與骨組織BMP-2和VEGF的表達(dá)密切相關(guān),BMP-2和VEGF能夠促進(jìn)血管再生及新骨形成。3.外用骨痛膏可提高激素性股骨頭壞死骨組織中BMP-2和VEGF的表達(dá),從而促進(jìn)壞死區(qū)微血管的形成及骨的修復(fù),對激素性股骨頭壞死有一定的防治作用。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2774490