【摘要】：紅花注射液是由紅花經(jīng)水煎煮醇沉等工藝加工而成的單方注射液,具有活血化瘀、抗氧化、降脂、抗炎等作用,臨床主要應(yīng)用于預(yù)防和治療冠心病、心肌梗塞等疾病。目前針對紅花注射液的臨床研究和藥理研究報(bào)道較多,但基于紅花注射液的活性成分的研究報(bào)道較少,并主要集中于對羥基紅花黃色素A(HSYA)含量與生物活性的研究。為進(jìn)一步探索其藥效物質(zhì)基礎(chǔ),本研究評價(jià)了紅花注射液體外延長活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、抑制血小板聚集以及抗氧化等活性,并以這些生物活性指標(biāo)為依據(jù),采用活性導(dǎo)向分離方法,對紅花注射液的抗凝血活性部位和化學(xué)成分進(jìn)行了研究。本文內(nèi)容包括以下幾個(gè)方面:1.以體外延長人正常血漿APTT、PT和抑制血小板聚集為評價(jià)指標(biāo),分別評價(jià)了7個(gè)企業(yè)生產(chǎn)的紅花注射液的體外生物活性;采用清除1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH?)體外篩選模型,研究了紅花注射液的體外抗氧化活性;利用福林酚法和AlCl_3比色法測定了紅花注射液的總多酚和總黃酮含量。結(jié)果表明:不同生產(chǎn)企業(yè)的紅花注射液對APTT具有明顯的延長作用(P0.05),并呈量效相關(guān)性,但對PT作用不顯著(P0.05),即紅花注射液對內(nèi)源性凝血途徑有顯著影響,對外源性凝血途徑無明顯作用;紅花注射液對ADP誘導(dǎo)的家兔血小板聚集有顯著的抑制作用,以及對DPPH?具有顯著的清除作用,并呈量效相關(guān)性。2.采用大孔樹脂D101層析柱對紅花注射液進(jìn)行了粗分離,并獲得4個(gè)組分;采用體外生物活性篩選方法評價(jià)了各組分的體外生物活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:四個(gè)化學(xué)成分群均具有體外延長APTT、PT以及抑制血小板聚集作用;延長APTT、PT作用強(qiáng)弱排序均為Fr_4Fr_3Fr_2Fr_1;此外,Fr_3組分具有較強(qiáng)的抑制血小板聚集作用和抗氧化活性,且總多酚含量高。3.通過凝膠柱層析與制備液相對Fr_4進(jìn)行了反復(fù)分離純化,并分離得到三個(gè)化合物。利用UPLC-MS和核磁共振~1H NMR、~(13)C NMR以及標(biāo)準(zhǔn)品比對等方法,對化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。三個(gè)化合物分別為對羥基苯甲醛、對羥基肉桂酸和(8Z)-癸烯-4,6-二炔-1-O-β-D-葡萄糖苷�；钚詼y定結(jié)果表明:對羥基肉桂酸延長APTT活性最強(qiáng),對羥基苯甲醛次之。4.利用高效液相色譜法測定了紅花注射液主要化學(xué)成分羥基紅花黃色素A、對羥基肉桂酸和對羥基苯甲醛的含量。利用Pearson’s法比較分析了紅花注射液體外抗凝血、抑制血小板聚集及抗氧化活性與其總黃酮、總多酚含量之間的相關(guān)性;比較分析了羥基紅花黃色素A含量與體外抗凝血活性之間的量效關(guān)系。相關(guān)性分析表明:整體來看總黃酮含量與APTT延長率存在一定的相關(guān)性、總多酚含量與DPPH?清除率具有良好的相關(guān)性;羥基紅花黃色素A含量與APTT之間無明顯量效關(guān)系。結(jié)論:紅花注射液體外延長APTT活性的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)可能為紅花注射液中的黃酮醇及黃酮醇苷類成分;體外抗氧化活性的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)可能為多酚類物質(zhì)。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R286.0
【圖文】：

紅花注射液化學(xué)成分與生物活性研究下血小板能夠調(diào)節(jié)血液的粘度，發(fā)揮正常功能，如血小板可避免失血過多，起到止血作用。當(dāng)血管內(nèi)膜受到損傷時(shí)，就膜外，這時(shí)可能會導(dǎo)致血小板過度聚集引起血小板血栓或者 ADP、啟動(dòng) AA 代謝、激活凝血因子 FXII、XI 加快血小板聚血過程損傷或血小板的活化會導(dǎo)致凝血因子的產(chǎn)生和增多，而凝血，產(chǎn)生凝血酶，繼而誘導(dǎo)纖維蛋白原生成纖維蛋白，纖維蛋凝聚，導(dǎo)致凝血。作用流程圖如圖 1.1。

圖 1.2 纖維蛋白溶解過程Fig.1.2 Fibrinolysis process流異常血脂癥、高纖維蛋白原癥、紅細(xì)胞增多使血液黏度增大、脫水等、血流緩慢也是引發(fā)血栓的重要因素。血系統(tǒng)血途徑圖 1.2、圖 1.3 可知，凝血過程由三個(gè)階段組成，凝血酶原激活物成、凝血酶形成以及纖維蛋白形成[83,84]。也有學(xué)者認(rèn)為可分為內(nèi)源凝血途徑。凝血因子包含可作用于內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的因子和外源兩大類，反應(yīng)過程如圖 1.3，最后集于共同途徑促使纖維蛋白形成5,86]。Kallikrein Prekallikrein

101.5.3 主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)本研究首次以體外延長活化部分凝血活酶時(shí)間、凝血酶原時(shí)間以及體外清除DPPH 為生物活性指標(biāo)篩選紅花注射液的藥效物質(zhì)。圖 1.4 研究思路與技術(shù)流程圖Fig.1.4 Research ideas and technology flow chart

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊周生;;中藥抗心肌缺血的研究進(jìn)展[J];湖南中醫(yī)雜志;2015年06期

2 樂世俊;唐于平;王林艷;唐浩;李淑嬌;劉培;宿樹蘭;段金廒;;紅花中黃酮類化合物的分離與體外抗氧化研究[J];中國中藥雜志;2014年17期

3 趙劍鋒;劉靜;郭穎;劉倩;戴忠;馬雙成;林瑞超;;紅花注射液化學(xué)成分及其活性研究[J];中國中藥雜志;2014年16期

4 齊洋;劉莉;李天翥;付金鳳;;紅花注射液化學(xué)成分分析[J];黑龍江醫(yī)藥;2014年03期

5 扈曉佳;殷莎;袁婷婷;王玉玨;黃珍茹;陸陽;;紅花的化學(xué)成分及其藥理活性研究進(jìn)展[J];藥學(xué)實(shí)踐雜志;2013年03期

6 陶繼陽;;注射用紅花黃色素不良反應(yīng)9例分析[J];中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2013年07期

7 陳晨;劉倩;張媛;秦媛媛;賀慶;張橫;高華;;紅花注射液生物活性測定方法的篩選[J];藥物分析雜志;2013年01期

8 李曉鋒;胡曉茹;戴忠;張燕;梁宏;林瑞超;;紅花水提部位化學(xué)成分研究[J];中藥材;2012年10期

9 劉倩;陳晨;戴忠;張媛;賀慶;胡曉茹;高華;;紅花注射液有效成分的確定及不同廠家中量效關(guān)系的比較[J];藥物分析雜志;2012年07期

10 石留成;;急性心肌梗死的早期預(yù)防 早期診斷及治療[J];中國藥物與臨床;2012年S1期

本文編號：2768311