【摘要】：目的:通過篩選適宜的中藥單體,進(jìn)一步構(gòu)建了互穿網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)凝膠敷料體系,探討其對(duì)糖尿病潰瘍的修復(fù)作用及其相關(guān)機(jī)制。并進(jìn)一步將其與具有促血管新生作用的化藥小分子聯(lián)合應(yīng)用以期對(duì)糖尿病潰瘍產(chǎn)生協(xié)同修復(fù)效果,明確其相關(guān)作用機(jī)制。方法:1.通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)篩選獲得具有加快慢性創(chuàng)傷修復(fù)的中藥單體羥基紅花黃色素A(HSYA),并在體外對(duì)其創(chuàng)傷愈合機(jī)制做了進(jìn)一步的研究。2.構(gòu)建了攜載HSYA的水凝膠敷料,建立了HSYA的體外分析方法,并對(duì)凝膠的形態(tài)、孔隙率和藥物釋放等進(jìn)行了考察。建立了環(huán)形夾板糖尿病潰瘍模型進(jìn)行載藥凝膠的體內(nèi)藥效學(xué)評(píng)價(jià),采用Masson染色,測(cè)定修復(fù)皮膚內(nèi)的VEGF、TGF-β 1的含量,考察HSYA水凝膠的潰瘍修復(fù)效果。3.進(jìn)一步協(xié)同去鐵胺(DFO)制備了以京尼平為交聯(lián)劑的HSYA/DFO共載水凝膠,通過體內(nèi)外一系列實(shí)驗(yàn)考察了 HSYA/DFO共載水凝膠對(duì)糖尿病潰瘍的治療效果并研究了相關(guān)作用機(jī)制。體外研究中考察了HSYA/DFO聯(lián)用對(duì)細(xì)胞分泌HIF-1α、遷移及血管新生的影響。體內(nèi)研究中考察了HSYA/DFO水凝膠敷料對(duì)糖尿病潰瘍愈合率的影響,并通過對(duì)愈后皮膚進(jìn)行HE染色、CD31、HIF-1 α組織免疫熒光染色、光聲觀察血流情況等來(lái)考察皮膚潰瘍修復(fù)質(zhì)量。結(jié)果:1.HSYA具有抗炎作用且存在濃度依賴性,同時(shí)還具有促進(jìn)角化細(xì)胞的遷移和新生血管的生成作用,能促使傷口的再上皮化,加快皮膚潰瘍愈合速度。2.建立了 HPLC測(cè)定HSYA的體外分析方法。篩選獲得殼聚糖-明膠質(zhì)量比為5:5的水凝膠體系為優(yōu)化載藥體系,制備的凝膠呈現(xiàn)多孔的三維狀結(jié)構(gòu),攜載HSYA后,1h的藥物釋放百分率約為40%,其后HSYA 一直持續(xù)釋放直到10h,具有一定的緩釋效果,且其易于涂布,吸水性和透氣性良好。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明HSYA具有較強(qiáng)的加速潰瘍愈合的活性,與空白對(duì)照組及其他用藥組相比,HSYA凝膠修復(fù)后的皮膚組織中VEGF和TGF-β1含量表達(dá)最高,且愈后皮膚有部分毛囊、血管等皮膚附屬器生成,但與正常皮膚相比,仍顯示有較大差距。3.HSYA和DFO的聯(lián)合用藥對(duì)成纖維細(xì)胞分泌HIF-1 α、角化細(xì)胞向傷口處的遷移及血管新生產(chǎn)生了 一定程度的協(xié)同作用。體內(nèi)藥效學(xué)與組織染色結(jié)果表明,HSYA-DFO凝膠與HSYA-DFO溶液均能通過上調(diào)HIF-1 α的含量,促進(jìn)血管新生,從而加速傷口的上皮化,促進(jìn)潰瘍愈合,其中HSYA-DFO凝膠修復(fù)后的皮膚質(zhì)量最佳,新生表皮與肉芽組織厚度最高,真皮層血流更豐富,最接近于正常皮膚。結(jié)論:HSYA具有促進(jìn)糖尿病潰瘍修復(fù)的效果。通過本研究構(gòu)建的水凝膠敷料聯(lián)合攜載HSYA與DFO時(shí),能產(chǎn)生協(xié)同加速糖尿病潰瘍修復(fù)的效果。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

不同中藥單體作用人永生化表皮細(xì)胞24h后的細(xì)胞生存率(n=5.*:P}0.05,#:P<0.01，和空白對(duì)照組相比)

周監(jiān)測(cè)血糖結(jié)果顯示大鼠血糖穩(wěn)定在２０？３０ｍｍｏｌ／ｌ之間，且體重增長(zhǎng)緩慢，出現(xiàn)逡逑多尿、多食、毛發(fā)暗黃的表現(xiàn)，認(rèn)為糖尿病模型建立成功，可以進(jìn)一步進(jìn)行潰瘍?cè)戾义夏＃▓D１．３和圖１．４）。隨機(jī)血糖結(jié)果的影響因素較多，如飲食量，活動(dòng)狀態(tài)等，逡逑大鼠血糖波動(dòng)也屬于正�，F(xiàn)象。潰瘍?cè)炷：蟠笫笱侨跃S持在較高水平，體重也仍逡逑然呈緩慢增長(zhǎng)的趨勢(shì)。這也說明了整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程大鼠都是維持糖尿病狀態(tài)的。逡逑＾邐４０逡逑■0邋３５逡逑１２ｓ：逡逑ｉ邋２０邋－逡逑ｔｏ逡逑８邐１５逡逑吾１０逡逑＾邐５邐＊￣￣＊￣￣＇——￣＾￣￣？逡逑＿0逡逑ＣＱ邐０邐Ｉ邐Ｉ邐Ｉ邐ｉ逡逑３邐７邐１２邐１６邐２３邐３０邐３４邐４１邐４８逡逑Ｔｉｍｅ（ｄ）逡逑－？－Ｃｏｎｔｒｏｌ邋Ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ邋ＨＳＹＡ邋Ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ邋－＾－Ｎｏｒｍａｌ逡逑圖１．３糖尿病大鼠血糖變化情況（ｎ＝５）逡逑１１逡逑

圖１．４糖尿病大鼠體重變化情況（ｎ＝５）逡逑１．３．２．２不同中藥單體的潰瘍修復(fù)結(jié)果逡逑從圖１．邋５可以看出，正常大鼠創(chuàng)傷的總體愈合率要高于潰瘍組大鼠，其中前六逡逑天具有顯著性差異（Ｐ＜0．邋０５），證明已成功建立糖尿病潰瘍模型。與糖尿病潰瘍空逡逑白對(duì)照組相比，ＨＳＹＡ用藥組能明顯促進(jìn)糖尿病潰瘍的愈合，前三天有顯著性差異逡逑（Ｐ〈０．０５）。而其余用藥組也能在一定程度上促進(jìn)傷口的愈合，但與空白組相比，逡逑均無(wú)顯著性差異�？傮w而言，本次實(shí)驗(yàn)建立的漬瘍大鼠模型本身具有較強(qiáng)修復(fù)能力，逡逑短時(shí)間能實(shí)現(xiàn)傷口的修復(fù)，但各用藥組在愈合率上仍能體現(xiàn)出一定的差異，尤其是逡逑在創(chuàng)傷愈合早期的時(shí)候�？梢猿醪脚卸�，ＨＳＹＡ具有較好地加速潰瘍愈合的效果。逡逑根據(jù)ＭＴＴ和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，最終選擇ＨＳＹＡ進(jìn)一步進(jìn)行后續(xù)研究．逡逑１２逡逑

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5 楊秋霞;;糖尿病潰瘍足的預(yù)防及護(hù)理體會(huì)[J];實(shí)用臨床護(hù)理學(xué)電子雜志;2018年46期

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7 李崢t

本文編號(hào)：2763135