【摘要】：目的:用冰乙酸和冰知母灌胃,同時給予寒冷因素復制大鼠胃潰瘍寒證模型,分別對5味山姜屬中藥四個不同極性部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水部位)進行藥效及作用機制研究。觀測5味山姜屬中藥不同極性部位對胃潰瘍寒證大鼠的胃組織病理變化、胃蛋白酶活力,測定胃組織cAMP、cGMP值,并計算cAMP/cGMP比值,闡釋此5味山姜屬中藥有效部位對胃潰瘍寒證大鼠的作用;同時,檢測胃組織EGF、PGE_2、TGF-α值,測定血清中PAF、NO、ET、IL-8、TNF-α、NT、VEGF、bFGF值,初步探索5味山姜屬中藥有效部位治療胃潰瘍寒證的作用機理。并闡釋“親緣關系-中藥功效-藥理效應”之間的關聯(lián)規(guī)律,為進一步探知5味山姜屬中藥共性功效的物質基礎提供依據(jù)。方法:SD雄性大鼠450只,隨機取10只為空白組,其余采用15%的冰乙酸加4℃知母水煎液復制胃潰瘍寒證模型,模型復制成功后,設置病證模型組、2個陽性對照組、40個受試藥物組,每組10只�？瞻捉M、模型組灌服0.5%羧甲基纖維素鈉水溶液,其余各組分別灌服各受試藥物。HE染色觀察胃組織病理變化情況;測定胃蛋白酶活力;采用ELISA測定大鼠血清中PAF、NO、ET、IL-8、TNF-α、NT、VEGF、bFGF值,及胃組織中PGE_2、EGF、TGF-α、cAMP、cGMP值,計算cAMP/cGMP比值。采用SPSS 20.0進行統(tǒng)計學處理,以P0.05認為有統(tǒng)計學意義。結果:1.5味山姜屬中藥對胃潰瘍寒證大鼠的藥效學研究:(1)對胃潰瘍寒證大鼠胃組織病理學改變的影響與模型組比較,5味受試藥石油醚和乙酸乙酯部位組大鼠胃組織病理評分顯著降低(P0.01或P0.05);3味受試藥正丁醇部位(高良姜、紅豆蔻、草豆蔻)、3味受試藥水部位組(大高良姜、草豆蔻、益智)大鼠胃組織病理評分降低(P0.01或P0.05),其余各組大鼠胃組織病理評分降低不明顯。(2)對胃蛋白酶活力的影響與模型組比較,5味受試藥各石油醚部位與乙酸乙酯部位高、低劑量組、3味受試藥正丁醇部位高劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻)、3味受試藥水部位高劑量組(高良姜、大高良姜、益智)、高良姜水部位低劑量組均明顯降低胃蛋白酶活力值(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠胃蛋白酶活力變化不明顯。(3)對胃潰瘍寒證大鼠胃組織cAMP、cGMP值的影響與模型組比較,5味受試藥石油醚與乙酸乙酯部位高劑量組、3味受試藥正丁醇部位高劑量組(紅豆蔻、草豆蔻、益智)大鼠胃組織cAMP值顯著升高(P0.01或P0.05);各組大鼠胃組織cGMP值差異不明顯,無統(tǒng)計學意義(P0.05);5味受試藥石油醚部位高劑量組、乙酸乙酯部位高劑量組、紅豆蔻及益智正丁醇部位高劑量組cAMP/cGMP比值均明顯升高(P0.05)。2.5味山姜屬中藥對胃潰瘍寒證大鼠作用機制研究:(1)5味山姜屬中藥不同極性部位對胃潰瘍寒證大鼠胃組織TGF-α、PGE_2、EGF值的影響在TGF-α方面,與模型組比較,5味受試藥4個不同極性部位高劑量組、4味受試藥石油醚部位低劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、益智)、3味受試藥乙酸乙酯部位低劑量組(高良姜、紅豆蔻、草豆蔻)、3味受試藥正丁醇部位低劑量組(高良姜、大高良姜、益智)、3味受試藥水部位低劑量組(大高良姜、草豆蔻、益智)均能明顯升高胃組織TGF-α值(P0.01或P0.05)。其余各極性部位各劑量組大鼠胃組織TGF-α值變化不明顯。在PGE_2方面,與模型組比較,5味受試藥2個極性部位高劑量組(石油醚與乙酸乙酯部位)、3味受試藥石油醚部位低劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻)、5味受試藥乙酸乙酯部位低劑量組、4味受試藥正丁醇部位高劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、草豆蔻)、紅豆蔻正丁醇部位低劑量組、3味受試藥水部位高劑量組(紅豆蔻、草豆蔻、益智)大鼠胃組織PGE_2值均明顯升高(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠胃組織PGE_2值變化不明顯。在EGF方面,與模型組比較,5味受試藥組4個不同極性部位高劑量組、草豆蔻石油醚部位低劑量組、大高良姜、紅豆蔻乙酸乙酯部位低劑量組、大高良姜正丁醇部位、水部位低劑量組大鼠胃組織EGF值均明顯升高(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠胃組織EGF值變化不明顯。(2)5味山姜屬中藥不同極性部位對胃潰瘍寒證大鼠血清ET、NO、IL-8、TNF-α、VEGF、bFGF、PAF、NT值的影響在ET方面,與模型組比較,5味受試藥3個極性部位高劑量組(石油醚、乙酸乙酯、水部位)、大高良姜、紅豆蔻石油醚部位低劑量組、4味受試藥乙酸乙酯部位低劑量組(大高良姜、紅豆蔻、草豆蔻、益智)、4味受試藥正丁醇部位高劑量組與水部位低劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、草豆蔻)、紅豆蔻正丁醇部位低劑量組大鼠血清ET值均顯著降低(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清ET值變化不明顯。在NO方面,與模型組比較,5味受試藥2個極性部位高劑量組(石油醚與水部位)、4味藥石油醚部位低劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、草豆蔻)、5味受試藥組乙酸乙酯部位高、低劑量組、4味受試藥正丁醇部位高劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、益智)、大高良姜正丁醇部位低劑量組、紅豆蔻與大高良姜水部位低劑量組大鼠血清NO值均明顯升高(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清NO值變化不明顯。在IL-8方面,與模型組比較,除紅豆蔻石油醚部位低劑量組外,其余給藥組石油醚部位高、低劑量組大鼠血清IL-8值明顯降低(P0.01或P0.05);5味受試藥組乙酸乙酯部位與正丁醇部位高、低劑量組大鼠血清IL-8值明顯降低(P0.01或P0.05);5味受試藥組水部位高劑量組大鼠血清IL-8值均明顯降低(P0.01);其余各極性部位各劑量組大鼠血清IL-8值變化均不明顯。在TNF-α方面,與模型組比較,5味受試藥2個極性部位高劑量組(石油醚與乙酸乙酯部位)、高良姜乙酸乙酯部位低劑量組、3味受試藥正丁醇部位高劑量組(大高良姜、草豆蔻、紅豆蔻)、益智水部位高劑量組大鼠血清TNF-α值均明顯降低(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清TNF-α值變化均無差異。在VEGF方面,與模型組比較,5味受試藥2個極性部位高劑量組(石油醚與乙酸乙酯部位)、5味受試藥石油醚與乙酸乙酯部位低劑量組、4味受試藥正丁醇部位高劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、草豆蔻)、4味受試藥水部位高劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、益智)大鼠血清VEGF值均顯著降低(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清VEGF值變化均無差異。在bFGF方面,與模型組比較,5味受試藥石油醚部位與正丁醇部位高劑量組、大高良姜和紅豆蔻石油醚部位低劑量組、4味受試藥組乙酸乙酯部位與水部位高劑量組(高良姜、大高良姜、紅豆蔻、益智)、2味受試藥乙酸乙酯部位與水部位低劑量組(大高良姜、紅豆蔻)、2味受試藥正丁醇部位低劑量組(高良姜、紅豆蔻)大鼠血清bFGF值均明顯降低(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清bFGF值變化均無差異。在PAF方面,與模型組比較,5味受試藥石油醚部位與乙酸乙酯部位高低劑量組、5味受試藥正丁醇部位與水部位高劑量組、3味受試藥正丁醇部位低劑量組(大高良姜、紅豆蔻、益智)、4味受試藥水部位低劑量組大鼠血清PAF值均顯著降低(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清PAF值變化均無差異。在NT方面,與模型組比較,5味受試藥4個極性部位高劑量組、5味受試藥石油醚部位低劑量組、益智與高良姜乙酸乙酯部位低劑量組大鼠血清NT值均顯著降低(P0.01或P0.05);其余各極性部位各劑量組大鼠血清NT值變化均無差異。結論:1.5味山姜屬中藥治療胃潰瘍寒證大鼠的有效物質主要富集于石油醚部位和乙酸乙酯部位,極少數(shù)部分集中在正丁醇部位和水部位。2.胃潰瘍寒證大鼠與cAMP、PGE_2、EGF、TGF-α、NT、NO值降低有關;與IL-8、ET、TNF-α、bFGF、VEGF、PAF值升高有關;推測5味山姜屬中藥有效部位治療冰乙酸型胃潰瘍寒證大鼠的作用機理可能是通過降低胃蛋白酶活力,升高cAMP值,提高PGE_2、EGF、TGF-α、NT、NO的合成和釋放,抑制炎性因子IL-8、TNF-α產(chǎn)生,降低ET、b FGF、VEGF、PAF值,來發(fā)揮溫胃散寒的功效,從而修復受損的胃粘膜,以達到治療胃潰瘍寒證的作用。說明存在親緣關系越接近的中藥,其藥效就越近似,作用的有效部位和藥理效應近相似,其藥性藥效與化學成分之間存在相關性。
【學位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5
【圖文】：

紅豆蔻正丁醇高 0.32 5.32±0.52*草豆蔻正丁醇高 0.8 4.47±0.47**益智正丁醇高 1.2 6.0±0.80高良姜水部位高 0.56 6.34±0.46大高良姜水部位高 0.128 5.32±0.43*紅豆蔻水部位高 0.112 6.31±0.42草豆蔻水部位高 0.2 5.67±0.48*益智水部位高 0.35 4.0±0.42**注：與空白組比較#表示 P＜0.05，##表示 P＜0.01，與模型組比較*表示 P＜0.05，**表示 P＜0.01以下各表同。

圖 2 對胃潰瘍寒證大鼠胃蛋白酶活力變化的影響表 5、圖 2 結果顯示：與空白組比較，模型組大鼠的胃蛋白酶活力明顯增強（P＜0.01）。與模型組比較，西咪替丁組、附子理中丸組、5 味受試藥組石油醚部位高、低劑量組胃蛋白酶活力值顯著降低（P＜0.01）；5 味受試藥組乙酸乙酯部位高、低劑量組胃蛋白酶活力值顯著降低（P＜0.01）；高良姜、大高良姜、紅豆蔻 3 味受試藥正丁醇部位高劑量組胃蛋白酶活力值降低（P＜0.05）；高良姜水部位高低劑量組、大高良姜和益智水部位高劑量組胃蛋白酶活力值顯著降低（P＜0.01 或 P＜0.05）；其余各極性部位各劑量組大鼠胃蛋白酶活力變化不明顯，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

24圖 3 對胃潰瘍寒證大鼠胃組織 TGF-α 值的影響（ ±s，n=10）表 7、圖 3 結果表明：與空白對照組比較，模型組大鼠胃組織 TGF-α值明顯降低（P＜0.01）。與模型組比較，西咪替丁組、附子理中丸組、5味受試藥石油醚部位高劑量組大鼠胃組織 TGF-α 值明顯升高（P＜0.01），除草豆蔻石油醚部位低劑量組外，其余給藥組石油醚部位低劑量組大鼠胃組織 TGF-α 值升高（P＜0.01 或 P＜0.05）；5 味受試藥乙酸乙酯部位高劑量組大鼠胃組織 TGF-α 含量明顯升高（P＜0.01），高良姜、紅豆蔻、草豆蔻

【參考文獻】

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1 王江;周永學;謝勇波;;半夏瀉心湯拆方對胃潰瘍大鼠胃組織GAS、MTL與血清PAF、ET、NO的影響及其寒熱并用配伍的意義研究[J];中華中醫(yī)藥學刊;2016年11期

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3 柳俊輝;秦華珍;劉穎;余騰飛;黃燕瓊;李文強;譚喜梅;翁銘鉆;張興q

本文編號：2762657