【摘要】：目的:觀察模擬不同海拔缺氧環(huán)境下對Wistar大鼠心肌的影響,觀察紅景天苷對模擬不同海拔環(huán)境下大鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,探討紅景天苷對心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9的影響及抗凋亡的機(jī)理。方法:60只健康無心臟疾病的Wistar大鼠按照隨機(jī)分組方法分成蘭州海拔組,5000m海拔組,8000m海拔組,每組組內(nèi)又隨機(jī)分成生理鹽水組和紅景天苷組,各組大鼠在進(jìn)入高海拔模擬實(shí)驗(yàn)艙前3天分別行生理鹽水灌胃,紅景天苷配制液灌胃,量為40mg/kg,每天一次,蘭州海拔組置于實(shí)驗(yàn)室正常海拔24小時(shí),余兩組分別進(jìn)入5000m及8000m海拔艙24小時(shí)。大鼠出艙后及時(shí)抽血做血?dú)夥治?麻醉后摘取心臟及肺臟,HE染色顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞及肌纖維變化,免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測不同海拔環(huán)境下大鼠心肌細(xì)胞凋亡因子Caspase-3基因的表達(dá),原位末端凋亡法(TUNEL)檢測心肌細(xì)胞凋亡情況,蛋白免疫印跡(Western Blot,WB)檢測大鼠心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9的表達(dá)。結(jié)果:1.各組大鼠心臟病理切片結(jié)果:在蘭州海拔下對照組大鼠心肌未見明顯病變,在5000m及8000m海拔下大鼠心肌均可見病變,主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞腫大、空泡變性、溶解壞死及心肌間質(zhì)增寬等,8000m海拔下心肌的病變程度明顯大于5000m海拔下,紅景天苷組大鼠心肌細(xì)胞形態(tài)變化與對照組相似,心肌細(xì)胞腫大及心肌間質(zhì)增寬程度較對照組有所改善。2.各組大鼠心肌凋亡細(xì)胞檢測結(jié)果:在蘭州海拔下對照組出現(xiàn)極少數(shù)陽性染色,而5000m及8000m海拔下出現(xiàn)大量染色陽性細(xì)胞,8000m下陽性細(xì)胞較5000m下更多,紅景天苷組蘭州海拔下與對照組蘭州海拔下相似,在5000m及8000m海拔下染色陽性細(xì)胞較對照組組減少,并且與對照組比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P0.05)3.各組大鼠心肌凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9的檢測結(jié)果:在5000m、8000m高海拔缺氧環(huán)境下Bax,Caspase-3,Caspase-9表達(dá)增加,Bcl-2表達(dá)減少;與對照組比較,紅景天苷組Bax,Caspase-3,Caspase-9表達(dá)均降低,Bcl-2表達(dá)增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P0.05)結(jié)論:1.高海拔急性心肌缺氧會導(dǎo)致大鼠心肌細(xì)胞損傷;2.紅景天苷注射液對高海拔缺氧環(huán)境下大鼠心肌細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與干預(yù)心肌細(xì)胞中凋亡蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3和Caspase-9,相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖 1 大鼠心肌組織病理學(xué)改變（HE, 200）A:海拔 1500m 生理鹽水組（對照組）；B: 海拔 5000m 生理鹽水組；C:海拔 8000m 生理鹽水組；D:海拔 1500m 紅景天苷組；E:海拔 5000m 紅景天苷組；F:海拔 8000m 紅景天苷組；Fig.1 Histopathological changes of myocardial tissues in rats（HE, 200）A:altitude of 1500m group(normal saline control group);B:altitude of 5000m group(normal saline)；

圖 2 大鼠心肌細(xì)胞 Caspase-3 免疫組化染色圖A:海拔 1500m 生理鹽水組（對照組）；B: 海拔 5000m 生理鹽水組；C:海拔 8000m 生理鹽水組；D:海拔 1500m 紅景天苷組；E:海拔 5000m 紅景天苷組；F:海拔 8000m 紅景天苷組；Fig.2 Caspase-3 Immunohistochemistry map of myocardial cells in rats（ 200）A:altitude of 1500m group(normal saline control group);B:altitude of 5000m group(normal saline)；

圖 3 TUNEL 法檢測各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡（ 200）Fig.3 TUNEL examined the apoptosis of myocardial cells in rats（ 200）A:altitude of 1500m group(normal saline control group);B:altitude of 5000m group(normal saline)；C:altitude of 8000m group(normal saline)；D:altitude of 1500m group(salidroside)；

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2758309