【摘要】：目的:觀察冬凌草甲素干預對哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑的影響,探討其可能的作用機制。方法:將40只6~8周齡清潔級雌性BALB/c小鼠隨機分成正常組(NS組)、哮喘組(AS組)、地塞米松干預組(AS+DEX組)、冬凌草甲素10mg/kg干預組(AS+Oridonin10組)、冬凌草甲素20mg/kg干預組(AS+Oridonin20組),每組8只。AS組于實驗第1天、第13天予V級OVA腹腔聯(lián)合皮下注射致敏。第19~23天,以II級10%OVA霧化激發(fā),1次/d,30min/次。NS組以PBS代替OVA進行致敏,以生理鹽水代替OVA和激發(fā)。AS+DEX組、AS+Oridonin10組、AS+Oridonin20組分別于每日霧化前30min,予地塞米松2mg/kg、冬凌草甲素10mg/kg、冬凌草甲素20mg/kg腹腔注射干預;余處理同AS組。每組小鼠于末次激發(fā)24h后處死。對各組小鼠BALF進行細胞總計數(shù)和白細胞分類計數(shù)。ELISA檢測BALF中白介素-17(IL-17)、白介素-22(IL-22)、白介素-10(IL-10)、白介素-35(IL-35)的濃度。HE染色觀察肺組織病理學改變、炎癥細胞浸潤及氣道壁厚度。AB-PAS染色觀察氣道上皮杯狀細胞增生和粘液物質(zhì)分泌。馬森染色(Masson染色)觀察氣道周圍膠原纖維沉積。免疫組化(IHE)測定TGF-β1蛋白表達量,熒光定量PCR(RT-PCR)測定肺組織中TGF-β1m RNA表達水平。結果:小鼠BALF細胞總數(shù)、嗜酸粒細胞百分比、IL-17、IL-22水平、氣道周圍炎癥細胞浸潤評分、氣道壁厚度、氣道上皮杯狀細胞和粘液物質(zhì)陽性相對著色面積、氣道膠原纖維沉積面積、肺組織TGF-β1蛋白及m RNA表達:AS組及干預組均高于NS組;干預組均低于AS組;AS+Oridonin10組高于AS+DEX組;AS+Oridonin10組高于AS+Oridonin20組;以上組間差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。BALF中IL-10、IL-35表達水平:AS組及干預組均低于NS組;干預組組均高于AS組;AS+Oridonin10低于AS+DEX組;AS+Oridonin10組高于AS+Oridonin20組,上述組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。小鼠BALF細胞總數(shù)、IL-17、IL-22水平、氣道周圍炎癥細胞浸潤評分、氣道膠原纖維沉積面積、TGF-β1蛋白及m RNA表達:AS+Oridonin20組均高于AS+DEX組(P0.05)。小鼠嗜酸粒細胞百分比、氣道壁的厚度、氣道上皮杯狀細胞和粘液物質(zhì)相對陽性著色面積:AS+Oridonin20組均高于AS+DEX組,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。小鼠BALF中IL-10、IL-35表達水平:AS+Oridonin20組均低于AS+DEX組,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:冬凌草甲素可抑制哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑,其作用機制可能是通過促進IL-17、IL-22表達,抑制IL-10、IL-35表達從而調(diào)節(jié)Th17/Treg細胞平衡,同時抑制TGF-β1表達來實現(xiàn)的。冬凌草甲素抑制哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑具有一定的濃度依賴性。
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2753666