【摘要】：目的:在中醫(yī)健脾益氣理論指導(dǎo)下,利用聽覺腦干誘發(fā)電位(ABR)技術(shù)、耳蝸鋪片技術(shù)、RT-PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction)技術(shù),觀察復(fù)方健耳劑拆方之補氣藥干預(yù)慶大霉素耳毒性聾的聽功能、耳蝸毛細(xì)胞影響作用,并通過對耳蝸超氧化物歧化酶1(Superoxide Dismutase 1,SOD1)的檢測,探討基于活性氧介導(dǎo)的慶大霉素耳蝸毛細(xì)胞損害的病理機制,以及中藥保護作用藥理機制。通過對血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatine,Cr)的檢測、腎組織切片,觀察中藥對腎功能和腎組織的保護作用,探討護腎與護耳的關(guān)系,以及中醫(yī)脾為后天之本與腎為先天之本,“腎開竅于耳”等理論的科學(xué)根據(jù)。方法:選擇正常健康豚鼠54只,隨機分成正常對照組、慶大霉素(Gentamicin,GM)對照組、中藥+GM對照組各18只。正常對照組,不作任何藥物處理,常規(guī)飼養(yǎng)至11天。GM對照組,按照200mg/kg/d劑量,每天注射2次,連續(xù)9天后停藥,第11天終止飼養(yǎng)。中藥+GM對照組預(yù)先連續(xù)服用復(fù)方健耳劑拆方11號10天,按照3.994g(kg/d)劑量,然后在繼續(xù)服用中藥同時開始注射GM,GM用量和方法同GM對照組,連續(xù)9天同時停藥,第11天終止飼養(yǎng)。每組取6只動物行ABR測試,了解聽力狀況。6只動物分別取心臟血液用于血清BUN、Cr檢測,了解腎功能;取腎臟用于腎組織切片染色,了解腎組織形態(tài)學(xué);取耳蝸用于耳蝸鋪片,了解耳蝸毛細(xì)胞形態(tài)學(xué)并計數(shù)毛細(xì)胞。另6只動物耳蝸通過RT-PCR測定SOD1,提供基于活性氧途徑分析依據(jù)。所得數(shù)據(jù)最后經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果:第9天中藥+GM對照組的ABR閾值與GM對照組比較,差異存在顯著性意義(P0.05),與正常對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。第11天耳蝸鋪片顯示,正常對照組內(nèi)、外毛細(xì)胞排列整齊,無細(xì)胞缺損;GM對照組外毛細(xì)胞破壞嚴(yán)重,呈片狀崩解,殘缺不全,但內(nèi)毛細(xì)胞基本未受影響;中藥+GM組外毛細(xì)胞破壞較輕,呈散在崩解缺失,內(nèi)毛細(xì)胞未受影響。GM對照組與其他兩組比較,差異均有顯著性意義(P0.05)。中藥+GM組與正常對照組比較,差異有顯著性意義(P0.05)。第11天腎切片顯示,正常對照組腎組織細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)正常,GM對照組腎組織細(xì)胞與結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重,而中藥+GM組腎組織細(xì)胞與結(jié)構(gòu)受損較輕,基本保護較好。GM對照組BUN、Cr兩項指標(biāo)均高于其他兩組,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)比較,差異均有顯著性意義(P0.05),而中藥+GM組與正常對照組比較,差異則無顯著性意義(P0.05)。第11天中藥+GM組耳蝸SOD1表達(dá)均高于其他兩組,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)比較,差異均有顯著性意義(P0.05)。結(jié)論:豚鼠GM200mg/天造模成功。GM對耳蝸破壞主要影響外毛細(xì)胞,且底回破壞較頂回嚴(yán)重。GM對耳蝸外毛細(xì)胞和聽力損害以及腎臟和腎功能都有損害。復(fù)方健耳劑拆方補氣類中藥具有明顯同時保護豚鼠GM致耳蝸外毛細(xì)胞和聽功能損害以及腎臟和腎功能損害的作用。中藥藥效作用與其通過對機體SOD系統(tǒng)激活,清除氧自由基,從而阻止活性氧介導(dǎo)細(xì)胞凋亡通路有關(guān)。中藥護腎作用,是其拮抗GM耳毒性損害的中藥機制之一。中醫(yī)“腎開竅于耳”理論具有一定科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

1.A1、A2、A3 分別表示正常對照組豚鼠耳蝸的底回、中回、頂回外毛細(xì)胞情況（X400）B1、B2、B3 分別表示 GM 組對照豚鼠耳蝸的底回、中回、頂回外毛細(xì)胞情況（X400）C1、C2、C3 分別表示中藥+GM 組對照豚鼠耳蝸的底回、中回、頂回外毛細(xì)胞情況（X43.2 統(tǒng)計學(xué)方法采用 SPSS22.0 軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以 X ±S 表示，3 組間采用單因素方差分析，兩組之間比較用 LSD-t 分析。P<0.05 為差異計學(xué)意義。3.3 毛細(xì)胞計數(shù)統(tǒng)計結(jié)果從 GM 對照組、中藥+GM 對照組、正常對照組中各選 6 耳，制成蝸完整鋪片，計算全耳蝸外毛細(xì)胞在固定視野中的計數(shù)。其中正常組毛細(xì)胞計數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他兩組，單因素方差分析組間比較，P=0.

【參考文獻(xiàn)】

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1 劉文杰;傅仲鷹;;氨基糖苷類抗生素性耳聾基因治療的研究進展[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2015年05期

2 李欣怡;王楓;管燕平;;腎氣丸對慶大霉素致聾豚鼠耳蝸毛細(xì)胞鈣通道蛋白CaV1.3的影響[J];廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2015年05期

3 黃立慧;李欣怡;管燕平;;金匱腎氣丸對藥物性聾豚鼠耳蝸凋亡蛋白caspase-3的影響[J];浙江中醫(yī)雜志;2015年05期

4 李種泰;崔麗娜;;針刺頸段夾脊穴對感音神經(jīng)性聾豚鼠聽性腦干反應(yīng)閾值的影響（英文）[J];World Journal of Acupuncture-Moxibustion;2015年01期

5 王樹春;丁國臣;韓磊;;柴胡聰耳湯逆轉(zhuǎn)慶大霉素誘發(fā)大鼠耳毒性的抗氧化機制研究[J];武警后勤學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2015年03期

6 管銳瑞;王曉艾;王一鳴;王永華;;浙江省249例聾校學(xué)生聽力狀況及病因?qū)W調(diào)查[J];中國中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科雜志;2014年06期

7 孫藝;楊長亮;羅燕云;陽光;楊慧;朱麗;姚行齊;;兩個母系遺傳氨基糖苷類抗生素致聾家系線粒體DNA 12S rRNA A1555G突變的分子遺傳學(xué)研究[J];華南國防醫(yī)學(xué)雜志;2014年05期

8 宋海燕;董楊;王靜;彭垠婷;;耳聾左慈丸防治慶大霉素誘發(fā)大鼠腎耳毒性實驗研究[J];上海中醫(yī)藥雜志;2014年05期

9 陳曉棟;王燁;丁忠家;楊佳蕾;王曦;趙昱;岳波;陳福權(quán);邱建華;;慶大霉素耳毒性模型大鼠耳蝸凋亡誘導(dǎo)因子表達(dá)及阿司匹林的拮抗作用[J];聽力學(xué)及言語疾病雜志;2014年04期

10 王永華;王楓;李文靖;魏小琴;王一鳴;;金匱腎氣丸對慶大霉素致聾豚鼠神經(jīng)生長因子表達(dá)的實驗研究[J];浙江中醫(yī)雜志;2014年03期

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1 劉承宜;朱玲;李方暉;;負(fù)反饋機制研究進展[A];中南地區(qū)第八屆生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要匯編[C];2012年

2 倪月秋;張量;李玉芳;溫利民;符文雙;;川芎嗪對藥物耳毒性耳蝸毛細(xì)胞損傷修復(fù)的作用機制研究[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

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1 陳浩;鹽酸椒苯酮胺對慶大霉素豚鼠耳蝸損傷保護作用及機制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

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1 李慧;川芎嗪對慶大霉素耳腎毒性保護作用的研究[D];吉林大學(xué);2011年

2 陳滸華;黃芪多糖的硒化修飾及其體外抗氧化作用的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 宋永玲;補腎活血通竅湯對慶大霉素致聾小鼠中樞聽覺通路核團內(nèi)NT-3表達(dá)的影響[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 張華;高壓氧對豚鼠慶大霉素中毒性聾影響的觀察[D];青島大學(xué);2002年

本文編號：2750062