【摘要】：目的:1.建立巖黃連藥材指紋圖譜,并進行多成分定量分析,為巖黃連品種鑒定及質(zhì)量評價提供依據(jù)。2.基于代謝組學的方法研究巖黃連抗肝纖維化的作用,從而揭示巖黃連抗肝纖維化的作用機制。方法:1.采用高效液相色譜(HPLC)對巖黃連提取工藝進行優(yōu)化,并進行方法學考察。2.應用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A)”評價10批巖黃連樣品的相似度,建立指紋圖譜,并對巖黃連中黃連堿、脫氫卡維丁、巴馬汀和小檗堿4個成分進行定量分析。3.將雄性SD大鼠40只,隨機分為空白對照組(n=10)和造模組(n=30)�？瞻讓φ战M灌胃給予橄欖油,造模組大鼠灌胃給予50%CCl4橄欖油溶液每周2次,共10周。于造模第7周開始灌胃給藥,分成空白組、模型組、陽性對照組、巖黃連給藥組,給藥4周。4.采用血清生化指標谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、總蛋白(TP),肝組織中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),和肝組織病理學檢查評價巖黃連的干預作用。5.采用基于核磁共振的代謝組學技術(shù),結(jié)合多元統(tǒng)計分析,尋找模型組和空白組血清代謝組分差異,分析其差異物質(zhì)與肝纖維化可能存在的關(guān)系,旨在發(fā)現(xiàn)與抗肝纖維化相關(guān)的潛在生物標志物及可能的靶點;進一步表征巖黃連對模型大鼠血清內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的變化規(guī)律,發(fā)現(xiàn)與抗肝纖維化藥效相關(guān)的潛在生物標志物及可能的靶點。結(jié)果:1.建立的指紋圖譜共有15個共有峰,10批巖黃連樣品相似度在0.940以上。2.巖黃連中黃連堿、脫氫卡維丁、巴馬汀和小檗堿的平均含量分別為0.50±0.17 mg/g、10.25±1.46 mg/g、6.02±1.78 mg/g、2.17±0.41mg/g。3.經(jīng)過巖黃連干預的肝纖維化大鼠血清中ALT、AST和ALP明顯降低(P0.05),ALB/GLB明顯升高(P0.05),大鼠肝組織中MDA明顯降低(P0.001),SOD明顯升高(P0.001),大鼠肝組織病變程度改善。4.CCl4誘導的肝纖維化大鼠血清中找到13個潛在的生物標志物,其中乳酸、丙氨酸、精氨酸、乙酸、氮乙酰糖蛋白、肌酸、膽堿的水平升高,脂質(zhì)、亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、氧乙酰糖蛋白和葡萄糖的水平降低。主要影響氨基酸代謝、糖類代謝、脂質(zhì)代謝和其他代謝。5.巖黃連對CCl4所致的肝纖維化大鼠血清中丙氨酸,乙酸和肌酸有下調(diào)作用,對脂質(zhì),亮氨酸和氧乙酰糖蛋白有上調(diào)作用。通過糾正CCl4誘導肝纖維化引起的纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸代謝,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝,精氨酸和脯氨酸代謝,糖類代謝紊亂,及脂質(zhì)過氧化。結(jié)論:1.建立了巖黃連指紋圖譜并結(jié)合多成分定量測定能較全面地反映巖黃連的質(zhì)量,可作為巖黃連藥材質(zhì)量控制的科學依據(jù)。2.巖黃連能改善肝纖維化大鼠的血清生化指標和肝組織生化指標及組織病理改變。3.CCl4誘導肝纖維化模型可引起大鼠血清代謝輪廓顯著變化,明顯擾動氨基酸代謝、糖類代謝、脂質(zhì)代謝及其他代謝,巖黃連對這些受擾動的代謝通路可以進行回調(diào)。
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R284
【圖文】：

21圖 1-6.巖黃連的指紋圖譜和對照指紋圖譜（CSR）Fig. 1-6 HPLC fingerprint and reference fingerprint(CSR) for 10 batches of CS

圖 1-7. 10 批巖黃連共有峰相對峰面積（A）及其 4 個化學成分含量（B）的熱圖Fig.1-7 The heat map of peak area of common peak (A) and the content of four components (B) in10 batches of CS2.6 巖黃連中 4 個指標成分的含量測定2.6.1 對照品溶液的制備

不同組別大鼠血清ALT、AST和ALP的比較

【參考文獻】

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本文編號：2743950