【摘要】：瑪咖(Lepidium meyenii)是十字花科獨行菜屬一年生或兩年生的一種草本植物,原產(chǎn)于南美秘魯安第斯山脈地區(qū)。目前國內(nèi)外關(guān)于瑪咖的研究主要集中在瑪咖根上,而對瑪咖葉的關(guān)注較少。多糖是由多個單糖單位通過糖苷鍵聚合而成的生物活性大分子,具有多種生理活性。本文以產(chǎn)自云南的瑪咖葉為原料,經(jīng)提取、分離純化后成功制備了多糖活性組分,并對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步分析;同時對瑪咖葉多糖的抗氧化活性以及免疫調(diào)節(jié)活性進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下:1.瑪咖葉粉末經(jīng)索式提取后晾干以及95%乙醇浸泡處理后,熱水浸提法提取瑪咖葉多糖,脫蛋白處理后制備粗多糖(Crude lepidium meyenii leaves polysaccharides,CLMLP)。然后經(jīng)DE-52纖維素離子交換層析柱初步分離純化,得到DLMLP-1、DLMLP-2和DLMLP-3三種多糖純化組分,選取總糖含量最高的組分DLMLP-3收集、濃縮、透析和凍干,然后經(jīng)SephadexG-100葡聚糖凝膠柱進(jìn)一步純化后,制備多糖二級純化組分LMLP。2.對LMLP的結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步鑒定,SephadexG-100凝膠柱檢測LMLP的平均分子量為58.43KDa,氣相色譜儀檢測LMLP的單糖組成半乳糖:阿拉伯糖:鼠李糖:葡萄糖:甘露糖的摩爾比為5.506:4.046:1.149:0.765:0.012。比色法鑒定LMLP中糖醛酸含量為27.43%,結(jié)合單糖組成分析結(jié)果,其半乳糖含量為47.95%,阿拉伯糖為35.25%,鼠李糖、葡萄糖和甘露糖的含量均較低。紫外全波長掃描后驗證其中不含蛋白質(zhì)和核酸。紅外光譜結(jié)果顯示LMLP中含有伸縮振動的O-H、C-H鍵、C=O鍵和α-糖苷鍵等多糖特征吸收峰。通過高碘酸氧化以及Smith降解后氣相色譜分析其中的糖苷鍵類型,結(jié)果表明LMLP中存在1-6位鍵合的糖基或非還原末端糖基,1-2,1-4,1-2,6,或1-4,6,1-3鍵等糖苷鍵類型。3.LMLP體外DPPH清除能力和還原能力的測定。結(jié)果表明:當(dāng)LMLP的濃度為1mg/mL時,其DPPH清除率為68.42%,LMLP的DPPH清除能力的半最大效應(yīng)濃度(EC_(50))為3.72mg/mL。當(dāng)LMLP濃度為1mg/mL時,700nm處的吸光度值為0.079。以巨噬細(xì)胞系為模型,體外驗證了LMLP對RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)控作用。結(jié)果表明:LMLP能夠種劑量依賴的促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞增殖能力,相應(yīng)提高其吞噬能力,促進(jìn)NO和IL-10細(xì)胞因子的分泌,且能夠增強細(xì)胞表面抗原CD80的表達(dá)。綜上所述,LMLP具有體外抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性。本文研究結(jié)果表明瑪咖葉多糖純化組分LMLP可以應(yīng)用于新型功能食品的開發(fā)和利用,也為瑪咖的綜合利用奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284;R285
【圖文】：

2nce 數(shù)據(jù)庫中出版文章數(shù)目 （A）以 Polysaccharide 為關(guān)以 Polysaccharide and Characterization 為關(guān)鍵詞檢索er of scientific publications from Web of Science database (ysaccharide (B) the result of polysaccharide and characteriz取、分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定概述取法對多糖結(jié)構(gòu)的影響不盡相同，選擇合適的提性的穩(wěn)定性有重要的意義。多糖提取的方法不型的提取技術(shù)包括酶輔助提取法、超聲輔助提

其上樣濃度為 10mg/mL，樣品體積為 2mL，用 1mL/min，離心管收集洗脫液，每個離心管的含量為 8洗脫液，苯酚硫酸法檢測樣品多糖含量。以收集的管數(shù)光度為縱坐標(biāo)繪制葡聚糖 SephadexG-100 色譜柱洗脫曲論標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制硫酸法測定瑪咖葉多糖中總糖的含量。不同濃度的葡萄糖線性關(guān)系，其線性回歸方程為 y=0.015x+0.05，R2=0.998光度值，x 值代表葡萄糖濃度，如下圖 2.1 所示�？梢娫诰哂辛己镁�性關(guān)系。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2729157