【摘要】：厚樸來源于木蘭科植物厚樸Magnolia officinalis Rehd.et Wils.或凹葉厚樸Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.Biloba Rehd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。收載于2015年版《中國藥典》一部,臨床上廣泛應(yīng)用于治療抑郁癥、腸梗阻、慢性肝炎及緩解更年期等癥狀。厚樸藥用價值顯著,很多經(jīng)典方劑如大承氣湯、厚樸溫中湯中都含有厚樸。厚樸資源分布較廣,在四川西南部、湖北西部、陜南及甘南等地均有其分布。四川作為厚樸的主產(chǎn)區(qū)之一,其出產(chǎn)的厚樸被統(tǒng)稱為“川樸”,為傳統(tǒng)的道地藥材。川樸資源遍及四川都江堰市、樂山市、阿壩州、峨眉山市、眉山、雅安等多個地區(qū)。目前有關(guān)厚樸的種質(zhì)資源、化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量控制等已有較多相關(guān)報道,但對于川產(chǎn)厚樸品質(zhì)質(zhì)量的系統(tǒng)研究及綜合評價還未見報道。鑒于此,本文擬開展以下幾方面的研究工作:第一、建立川產(chǎn)厚樸藥材HPLC指紋圖譜:采集四川不同地區(qū)厚樸藥材樣品42批,通過優(yōu)化供試品制備方法及色譜分析條件,建立了分離度良好的厚樸藥材HPLC指紋圖譜測定方法。對其指紋圖譜共有峰進(jìn)行歸屬,確定了9個共有峰。以對照品的相對保留時間和在線收集的紫外光譜圖為依據(jù),指認(rèn)厚樸HPLC指紋圖譜中1號峰、5號峰、8號峰、9號峰分別為紫丁香苷、木蘭花堿、和厚樸酚、厚樸酚。通過對42批厚樸樣品指紋圖譜進(jìn)行相似度評價及聚類分析,發(fā)現(xiàn)其指紋圖譜相似度均在0.8以上,顯示四川不同地區(qū)厚樸化學(xué)成分組成差異較小;聚類分析結(jié)果表明,除都江堰龍池鎮(zhèn)虹口景區(qū)觀風(fēng)溝和峨眉山市符溪鎮(zhèn)豐收村兩個產(chǎn)地外,其余樣品聚類相對較好。結(jié)果表明本文建立的HPLC指紋圖譜的方法科學(xué)、合理,可用于川產(chǎn)厚樸藥材的一致性研究。第二、川產(chǎn)厚樸揮發(fā)油成分的鑒別與分析:采用《中國藥典》(2015年版)揮發(fā)油測定法“甲法”測定厚樸中揮發(fā)油含量,運(yùn)用GC-MS法鑒別42批厚樸藥材中揮發(fā)油成分組成。從揮發(fā)油提取得率分析可知,眉山市洪雅縣張村與峨眉山市龍池鎮(zhèn)紅花村厚樸含油量均較高,含量為0.4%;而峨眉山市符溪鎮(zhèn)豐收村和樂山市夾江縣黃土鎮(zhèn)黃坪村揮發(fā)油含量偏低,僅為0.17%。表明四川不同地區(qū)厚樸藥材中揮發(fā)油含量差異較大。從揮發(fā)油成分分析可知,42批厚樸藥材揮發(fā)油中共確定了153個化學(xué)成分,主要為萜烯類、萜醇類、倍半萜類、高級脂肪烷烴類以及含氧衍生物等。其中5種化合物為各批厚樸藥材共有成分,分別為1-石竹烯,α-石竹烯,α-衣蘭油烯,12-Oxabicyclo[9.1.0]dodeca-3,7-diene,1,5,5,8-tetramethyl-,(1R,3E,7E,11R)-,2-Naphthalenemethanol,1,2,3,4,4a,5,6,7-octahydro-a,a,4a,8-tetramethyl-,(2R,4aR)-。表明四川不同地區(qū)厚樸揮發(fā)油類成分含量及組成差異較大。第三、川產(chǎn)厚樸活性成分含量測定:采用HPLC、酸堿滴定法、分光光度法分別測定42批厚樸藥材中酚類、生物堿類、多糖類、苯丙醇苷類等成分含量。結(jié)果其厚樸酚含量為8.56~36.41mg·g~(-1),和厚樸酚含量為5.29~29.17mg·g~(-1)。厚樸酚、和厚樸酚總量為14.36~65.58 mg·g~(-1);紫丁香苷、木蘭花堿的含量分別為0.01%~0.22%,0.01%~0.21%;總生物堿含量為2.7198~6.9111mg·g~(-1);多糖的含量為3.89%~21.51%。表明四川不同地區(qū)厚樸藥材中各化學(xué)成分含量差異較為顯著。第四、建立川產(chǎn)厚樸藥材化學(xué)質(zhì)量的綜合評價-灰色關(guān)聯(lián)分析法:采用灰色關(guān)聯(lián)分析法,以供試藥材中厚樸酚、和厚樸酚、揮發(fā)油、總生物堿、多糖、紫丁香苷、木蘭花堿及厚樸酚、和厚樸酚總量為評價指標(biāo),對川產(chǎn)厚樸藥材的化學(xué)質(zhì)量進(jìn)行綜合評價。結(jié)果42批藥材的相對關(guān)聯(lián)度在0.282~0.597之間,說明四川不同地區(qū)厚樸藥材的化學(xué)質(zhì)量差異較大。最后,對厚樸化學(xué)成分、種質(zhì)資源研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。本文研究結(jié)果為川產(chǎn)厚樸品質(zhì)質(zhì)量綜合評價、良種選育及藥用資源的保護(hù)及開發(fā)利用等提供了一定的科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284.1
【圖文】：

圖 1-1 厚樸藥材的HPLC指紋圖譜（1.紫丁香苷；5.木蘭花堿；8.和厚樸酚；9.厚樸酚）1.2.5 方法學(xué)考察1.2.5.1 精密度試驗取供試品粉末（S1），按“1.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“1.2.3”項色譜條件進(jìn)樣檢測，連續(xù)進(jìn)樣 6 次。結(jié)果表明，各共有峰的相對保留時間、相峰面積的 RSD 分別為 0.05%～1.13%，0.43%～2.95%，均小于 3%，表明儀器密度良好，符合指紋圖譜測定相關(guān)要求。結(jié)果見表 1-3，表 1-4。表 1-3 厚樸指紋圖譜精密度試驗共有峰相對保留時間峰號 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T71st 0.525 0.578 0.608 0.634 0.652 0.954 1.000

圖 1-2 厚樸藥材 HPLC-DAD-3D 光譜圖圖 1-3 流動相系統(tǒng)選擇（A 乙腈-磷酸水系統(tǒng)；B 乙腈-水系統(tǒng)；C 甲醇-磷酸水系統(tǒng)；D 甲醇-水系統(tǒng))

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2726680