發(fā)布時間：2020-06-21 07:23

【摘要】：研究背景:“十八反”屬于中藥配伍禁忌,其中包括海藻、甘草這一對反藥組合,與其他反藥組合不同的是,海藻、甘草兩味中藥本身均無毒,配伍使用是否會“相反”值得探究。2015年版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)中記載海藻為馬尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum(Turn.)C.Ag.或羊棲菜Sargassum fusiforme(Harv.)Setch.的干燥藻體。現(xiàn)代研究表明海蒿子與羊棲菜的化學(xué)成分及藥理作用均存在差異。歷代關(guān)于海藻、甘草同用的文獻記載有很多,現(xiàn)代臨床應(yīng)用含這對反藥組合的復(fù)方治療相關(guān)疾病的報道也并不少見。海藻甘草這一反藥組合應(yīng)用于臨床多為在復(fù)方中使用,且針對病理條件,此時是否會“相反”值得探究,其中海藻玉壺湯為含海藻甘草反藥組合的經(jīng)典名方,主要用于治療甲狀腺腫大等疾病。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)針對丙硫氧嘧啶(PTU)導(dǎo)致的甲狀腺腫大模型大鼠使用含反藥組合的海藻玉壺湯治療對于大鼠的甲狀腺腫大均有一定的糾正作用,西醫(yī)對于甲狀腺腫大除手術(shù)外無有效治療方法,含反藥組合的海藻玉壺湯是通過何種機制對甲狀腺腫大進行糾正值得探究;并且前期研究發(fā)現(xiàn)海藻(海蒿子、羊棲菜)、甘草在《中國藥典》規(guī)定高限5倍的給藥劑量下,海蒿子與生甘草、羊棲菜與生甘草配伍應(yīng)用對甲狀腺腫大模型大鼠的治療效果產(chǎn)生了差異。中藥配伍禁忌中“相反”可體現(xiàn)為配伍應(yīng)用產(chǎn)生毒性,如對于心肝腎功能的損害等方面,但對藥物的治療作用是否有影響值得探究。因此在該劑量下海藻玉壺湯對甲狀腺腫大大鼠治療效果的差異是否與不同海藻品種及反藥組合相關(guān)及其作用機制需要進一步探討。研究目的:本實驗探討含《中國藥典》規(guī)定高限5倍劑量反藥組合的海藻玉壺湯中海藻不同品種與甘草加減應(yīng)用對甲狀腺腫大大鼠的藥效作用及相關(guān)的機制,探究海藻甘草反藥組合、海藻品種不同是否對甲狀腺腫大大鼠治療效果產(chǎn)生影響,期望對“十八反”配伍禁忌的本質(zhì)進行探究,為指導(dǎo)臨床使用中藥提供參考。研究方法:1藥效作用:大鼠稱重后,依據(jù)體重把大鼠隨機分為9組:空白組、模型組、陽性藥組、含羊棲菜的海藻玉壺湯全方組(以下簡稱羊棲菜全方組)、含羊棲菜的海藻玉壺湯不含甘草組(以下簡稱羊棲菜去甘草組)、含海蒿子的海藻玉壺湯全方組(以下簡稱海蒿子全方組)、含海蒿子的海藻玉壺湯不含甘草組(以下簡稱海蒿子去甘草組)、海藻玉壺湯不含海藻組(以下簡稱去海藻組)、海藻玉壺湯不含海藻甘草組(以下簡稱去海藻甘草組),每組16只。造模期間,除空白組大鼠,其余各組大鼠灌服PTU 10 mg/kg,每日1次,共灌服造模藥14d。造模后給大鼠灌胃服用治療藥物,周期為28 d,其中,空白組與模型組給予等量生理鹽水灌胃,陽性藥組大鼠使用優(yōu)甲樂灌胃,給藥劑量為20μg/kg,每日1次,其余各給藥組給予相應(yīng)的海藻玉壺湯加減應(yīng)用的中藥液灌胃,大鼠每日給藥1次,給藥劑量各組不同:海蒿子/羊棲菜去甘草組給藥劑量13.5 g/kg,去海藻組劑量12.6g/kg,海蒿子/羊棲菜全方組劑量18.0g/kg,去海藻甘草組劑量8.1g/kg。給藥期間,為了穩(wěn)定大鼠甲狀腺腫大模型,除空白組外,每隔1天,其余各組灌服PTU,給藥劑量不變。給藥結(jié)束后計算各組大鼠甲狀腺系數(shù),觀察大鼠甲狀腺的組織病理形態(tài),檢測大鼠甲狀腺功能。觀察海藻不同品種與生甘草在《中國藥典》規(guī)定劑量高限5倍劑量下加減應(yīng)用對甲狀腺腫大大鼠藥效作用的影響。2機制探討:檢測甲狀腺組織TPO、Tg的基因表達,探究含《中國藥典》規(guī)定劑量高限5倍劑量的不同海藻品種及生甘草的海藻玉壺湯,加減反藥組合對甲狀腺腫大大鼠甲狀腺激素合成的影響機制;檢測甲狀腺組織Bax、Bcl-2mRNA的表達,探究對甲狀腺細胞凋亡的相關(guān)影響機制。研究結(jié)果:1含高劑量藥組合的海藻玉壺湯中海藻不同品種與甘草加減應(yīng)用對甲狀腺腫大大鼠藥效作用的影響:首先復(fù)制甲狀腺腫大模型,與空白組比較,模型組大鼠血清T4、FT3、FT4水平顯著降低,TSH水平顯著升高,甲狀腺系數(shù)顯著升高,大鼠甲狀腺組織形態(tài)改變:甲狀腺組織小葉排列紊亂,小葉結(jié)構(gòu)較模糊,甲狀腺濾泡上皮細胞彌漫性增生肥大,甲狀腺濾泡大小不均勻,濾泡內(nèi)分泌物變少。造模大鼠的體重、肛溫均較空白組下降,大鼠出現(xiàn)低代謝狀態(tài),喜堆聚,反應(yīng)遲緩,提示模型復(fù)制成功;給藥治療后陽性藥治療組糾正了大鼠甲狀腺激素下降導(dǎo)致的低代謝狀態(tài),回調(diào)了降低的體重、肛溫及血清T4、FT4、TSH水平,但對甲狀腺系數(shù)及組織結(jié)構(gòu)形態(tài)方面未見改善。海藻玉壺湯加減應(yīng)用各組對造模大鼠體重、肛溫、血清T4、FT3、FT4水降低無顯著效果,海藻玉壺湯加減反藥組合各組均回調(diào)了甲狀腺腫大大鼠血清TSH水平;與模型組比較,海蒿子去甘草組、羊棲菜全方組、去海藻組、去海藻甘草組大鼠血清TBG水平升高;海蒿子去甘草組、羊棲菜全方組大鼠血清TRH較空白組升高;各組大鼠血清TPO、Tg水平無顯著差;但對甲狀腺腫大有顯著改善包括甲狀腺系數(shù)、組織結(jié)構(gòu)形態(tài)等方面。2機制探討2.1對甲狀腺激素合成相關(guān)基因的影響:在本實驗中PTU對大鼠甲狀腺組織Tg mRNA表達影響無顯著差異,抑制了大鼠甲狀腺組織TPO mRNA表達。羊棲菜去甘草組則抑制了大鼠甲狀腺組織Tg mRNA的表達,海蒿子去甘草組糾正了PTU對TPO mRNA表達的抑制作用,羊棲菜去甘草組則未能糾正,在促進TPO mRNA表達上,海蒿子去甘草組效果優(yōu)于羊棲菜去甘草組。海蒿子及羊棲菜全方組效果無顯著差異,均未能促進TPO mRNA表達。2.2對甲狀腺細胞凋亡的影響:與空白組比較模型組Bax mRNA表達水平降低,Bax/Bcl-2降低,含不同品種海藻的海藻玉壺湯全方及加減海藻甘草反藥組合各組可使Bax mRNA表達水平升高,未對Bcl-2mRNA表達產(chǎn)生影響,Bax/Bcl-2升高。研究結(jié)論:1含《中國藥典》規(guī)定高限的5倍劑量海藻不同品種與甘草反藥組合的海藻玉壺湯加減反藥組合應(yīng)用各組,對PTU造模導(dǎo)致的甲狀腺激素水平下降無顯著改善效果,但對TSH均有回調(diào)作用,TSH可促進TPO、Tg的生成,大鼠甲狀腺組織TPO、Tg mRNA表達結(jié)果表明。在糾正甲狀腺功能方面海藻玉壺湯中在去掉甘草單獨使用高劑量海藻的情況下,海蒿子的效果可能優(yōu)于羊棲菜,在與甘草配伍使用的情況下海蒿子與羊棲菜并未表現(xiàn)顯著差異。海藻玉壺湯中反藥組合加減應(yīng)用各組未表現(xiàn)出顯著差異。2含《中國藥典》規(guī)定高限的5倍劑量海藻不同品種與甘草反藥組合的海藻玉壺湯加減反藥組合應(yīng)用各組對甲狀腺腫的治療包括甲狀腺系數(shù)、甲狀腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)有顯著的治療效果。其作用機制可能與促進甲狀腺細胞的凋亡相關(guān)。反藥組合加減應(yīng)用以及不同海藻品種間并未表現(xiàn)出顯著差異。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5;R289
【圖文】：

逑１．３含氋劑量藥組合的海藻玉壺湯中海藻不同品種與甘草加減應(yīng)用對甲狀腺腫大大逡逑鼠肛溫的影響（見表５，圖２）逡逑造模前（即Ｉｄ），各組間大鼠肛溫?zé)o差異。逡逑造模一周（即７ｄ），各組間大鼠肛溫?zé)o明顯差異逡逑造模二周（即１４ｄ），與空白組比較，其余各組大鼠肛溫均降低（Ｐ＜０．０５）。逡逑給藥治療一周后（即２１ｄ），與空白組比較，模型組、海蒿子去甘草組、羊棲菜去逡逑甘草組、海蒿子全方組、羊棲菜全方組、去海藻甘草組大鼠肛溫降低（Ｐ＜０．０５），與逡逑模型組比較，陽性藥組大鼠肛溫升高（Ｐ＜０．０５）。逡逑給藥治療二周后（即２８ｄ），與空白組比較，模型組、海蒿子全方組、羊棲菜全方逡逑組、去海藻甘草組大鼠肛溫降低（ＰＣ０．０５）

２含氋劑量藥組合的海藻玉壺湯中海藻不同品種與甘草加減應(yīng)用對甲狀腺腫大大鼠甲逡逑狀腺功能的影響逡逑２．１甲狀腺腫大模型復(fù)制（見表６圖３）。逡逑復(fù)制模型，給予ＰＴＵ灌胃１４ｄ后，隨機取空白組及給藥各組大鼠目內(nèi)眥取血，檢逡逑測大鼠血清中丁３、丁４、ＴＳＨ含量。實驗結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠血清逡逑Ｔ３、Ｔ４降低（Ｐ＜０．０５），邋ＴＳＨ升高（Ｐ＜０．０５），提示模型復(fù)制成功。逡逑表６ＰＴＵ對大鼠�。场⒍。础ⅲ裕樱鹊挠绊懀╰紓螅╁義獻楸皰危鑠危裕沖澹ǎ睿紓恚歟╁澹裕村澹ǎ睿紓恚歟╁危裕櫻儒澹ǎ酰歟眨恚歟╁義峽瞻鬃殄澹保跺澹埃梗

本文編號：2723743