發(fā)布時間：2020-06-21 05:36

【摘要】：俄色葉中含有大量的黃酮類物質(zhì),黃酮類化合物具有抗炎、抗氧化、抗癌及保肝等作用。但目前俄色葉粗提物中黃酮類成分純度不高,且對于俄色葉總黃酮分離純化工藝的研究鮮有報道,限制其進一步的開發(fā)利用。本課題選用西藏昌都地區(qū)的新鮮干燥俄色葉,考察其中黃酮類化合物的分離純化工藝,并對純化后的總黃酮進行結(jié)構(gòu)鑒定及抗炎活性研究,旨在為俄色葉的綜合利用與開發(fā)提供理論依據(jù)。本課題利用12種不同極性的大孔吸附樹脂對俄色葉總黃酮進行分離純化,對比12種樹脂對俄色葉粗提物中總黃酮的靜態(tài)吸附、解吸附能力,篩選出吸附率和解吸附率較高的AB-8型大孔樹脂。此后,考察AB-8大孔樹脂的吸附、解吸附動力學、樣液濃度、樣液pH、溫度、乙醇濃度對其靜態(tài)吸附、解吸附的影響,得AB-8大孔樹脂對俄色葉總黃酮靜態(tài)吸附、解吸附的最佳工藝:吸附平衡時間為180min,吸附溫度為25℃,樣液濃度15mg/ml,樣液pH 4.0;解吸附平衡時間為180min,乙醇濃度為70%。通過考察上樣液流速、上樣量、洗脫劑流速、洗脫劑體積、洗脫劑濃度對AB-8型大孔樹脂動態(tài)吸附、解吸附俄色葉總黃酮的影響,得動態(tài)吸附、解吸附的最佳工藝:上樣流速2.0BV/h,上樣量9BV(144ml),上樣液濃度15mg/ml,上樣液pH 4.0;洗脫液流速2.0BV/h,6BV 20%乙醇對樹脂柱進行洗脫,收集所得餾分中總黃酮含量最高。按最佳工藝純化所得的俄色葉總黃酮純度為57.86%,與粗提物中總黃酮含量相比,其純度是粗提物總黃酮純度的2.1倍。利用紅外吸收光譜對純化后的俄色葉總黃酮成分初步進行探索,經(jīng)紅外光譜掃描后發(fā)現(xiàn)其中含有黃酮類化合物特征吸收峰,驗證了所得物含大量黃酮類物質(zhì)的假設(shè)。建立LPS誘導巨噬細胞RAW264.7的體外炎癥模型,利用MTT法考察分離純化后的俄色葉總黃酮對小鼠巨噬細胞RAW264.7細胞活力的影響,利用Griess法測定誘導后巨噬細胞上清液中NO的含量,運用ELISA試劑盒測定誘導后巨噬細胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量。研究結(jié)果顯示,俄色葉總黃酮濃度在50~400μg/ml之間對細胞活力沒有影響,且能夠在有效的給藥濃度下抑制LPS誘導的小鼠巨噬細胞炎癥模型中NO、IL-6、IL-1β和TNF-α的過度產(chǎn)生,并且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性,當給藥濃度100μg/ml時,俄色葉總黃酮對上述促炎因子的抑制具有顯著性差異(P0.05)。以上結(jié)果表明,俄色葉總黃酮可能具有一定的體外抗炎活性。
【學位授予單位】：青島科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R284;R285
【圖文】：

葉的簡介及研究進展葉的種類、分布及形態(tài)葉（Malus toringoides (Rehd.) Hughes leaves），又名泡楸子，ae）蘋果屬（Malus）花秋蘋果組（Section Sorbomalus）隴東海棠is Rehd.）植物的葉子[1]，廣泛分布于四川、青海、西藏等地在 3500-3700m、坡度 10°-45°，于濕熱條件較好的灌木林、見[2-3]。今，對于俄色植物形態(tài)的研究報道，主要見于《中華本草》（物志》及《四川藏藥標準》等[4-6]。俄色葉片形態(tài)差異較大，長m，，頂部細尖，基部呈寬楔形或近心形，邊緣呈圓鋸齒狀或緊則的深裂，亦有不裂，上面有稀疏的柔毛，下面沿中脈及側(cè)表面常見白色短絨毛，隨生長而脫落，老時，葉片顏色則轉(zhuǎn)

圖 1-2 黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)Fig. 1-2 Basic structure of flavonoidsC3）結(jié)構(gòu)的氧化程度和 B 環(huán)的連接位置等特點，黃酮和黃酮醇；黃烷酮（又稱二氫黃酮）和黃烷酮；異黃烷酮（又稱二氫異黃酮）；查耳酮；二氫烷和黃烷醇；黃烷二醇（3，4）（又稱白花色苷元物理化性質(zhì)及功效特征大多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無定型粉末。黃酮類色團（-OH、-CH3）等的類型、數(shù)目及取代位置般來說，黃酮、黃酮醇及其苷類多呈灰黃至黃色而二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類等因其結(jié)構(gòu)因而不顯色�；ㄉ丶捌滠赵念伾�，則根據(jù) pH<7）、紫（7<8.5）、藍（PH>8.5）等顏色。黃酮黃酮分子為游離苷元時，可溶于甲醇、乙醇、乙

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本文編號：2723601