【摘要】：植物內(nèi)生真菌作為微生物天然藥物的重要來(lái)源之一,因其次級(jí)代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)新穎、活性多樣而引起研究者們的廣泛關(guān)注。本文圍繞著植物內(nèi)生真菌及其次級(jí)代謝產(chǎn)物開(kāi)展了以下工作:(1)以傳統(tǒng)藥用植物三七作為內(nèi)生真菌的分離對(duì)象,經(jīng)分離純化、菌種鑒定和活性篩選,挑選出具有研究?jī)r(jià)值的目標(biāo)菌株;(2)采用“OSMAC”策略和化學(xué)表觀遺傳修飾策略對(duì)該目標(biāo)菌株進(jìn)行生物合成潛能的挖掘;(3)對(duì)分離得到的單體化合物進(jìn)行生物活性的研究。(1)利用組織塊表面消毒法從新鮮的三七植物中分離得到17株內(nèi)生真菌,分別進(jìn)行18S rDNA序列的分子生物學(xué)鑒定和小規(guī)模發(fā)酵培養(yǎng)。待發(fā)酵培養(yǎng)結(jié)束后分別提取其次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行抗菌活性的篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)1株翹孢霉屬真菌Emericella sp.XL-029具有顯著的抗菌活性,因此將該目標(biāo)活性菌株作為下一步生物合成潛能挖掘的研究對(duì)象。(2)本部分首先采用“OSMAC”策略中改變培養(yǎng)方式和培養(yǎng)基組成對(duì)該目標(biāo)菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物多樣性進(jìn)行篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該菌株在固體大米葡萄糖培養(yǎng)基和液體MEB培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)后誘導(dǎo)產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物較為豐富。分別使用這兩種培養(yǎng)基對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)大發(fā)酵培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物提取。最終從其大米固體擴(kuò)大發(fā)酵代謝產(chǎn)物中分離并鑒定了14個(gè)單體化合物,其中包括6個(gè)新化合物;液體MEB擴(kuò)大發(fā)酵代謝產(chǎn)物中分離并鑒定了12個(gè)化合物,其中包括3個(gè)新化合物。接下來(lái)我們對(duì)翹孢霉屬真菌Emericella sp.XL-029進(jìn)行了化學(xué)表觀遺傳修飾策略的篩選,由于篩選結(jié)果不佳,故未進(jìn)行下一步的擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵。(3)最后,我們對(duì)分離得到的部分單體化合物開(kāi)展了抗人類致病性細(xì)菌、抗植物病原真菌和抗腫瘤細(xì)胞毒生物活性實(shí)驗(yàn)的研究�？辜�(xì)菌活性實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)化合物10對(duì)蠟狀芽孢桿菌(B.cereus)有明顯的抑制活性(MIC為6.3μg/mL);抗植物病原真菌實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)化合物10對(duì)馬鈴薯黃萎病菌(V.dahliae Kleb)和草莓黑斑病菌(H.maydis)有明顯的抑制活性(MIC為6.3μg/ml和3.1μg/mL);抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)化合物4對(duì)高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞株生長(zhǎng)有較強(qiáng)的抑制活性(IC_(50)為9.8μM),且對(duì)高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞的遷移、侵襲及粘附均有較好的抑制作用,該化合物4為開(kāi)發(fā)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及遷移的抑制劑提供了選擇。
【學(xué)位授予單位】：重慶大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R284;R285
【圖文】：

圖 2.1 翹孢霉屬真菌 XL-029 粗提物抗細(xì)菌活性結(jié)果Figure 2.1 The results of Emericella sp. XL-029 crude extract antibacterial activity

圖 2.1 翹孢霉屬真菌 XL-029 粗提物抗細(xì)菌活性結(jié)果Figure 2.1 The results of Emericella sp. XL-029 crude extract antibacterial activity

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 張偉;陳敏;邵長(zhǎng)倫;王長(zhǎng)云;;化學(xué)表觀遺傳修飾方法在真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物研究中的應(yīng)用[J];中國(guó)海洋藥物;2014年05期

2 張曉冬,李若瑜,王文莉,王端禮;微量法檢測(cè)念珠菌對(duì)三唑類藥物敏感性與交叉耐藥性[J];中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;1998年02期

本文編號(hào)：2719511