【摘要】：[目的]采用Lewis肺癌小鼠作為動物模型,使用免疫組化法檢測Lewis肺癌小鼠腫瘤組織中HSP70和PRDX1蛋白的表達(dá)情況,研究肺癌1號方抗癌作用的原理,為肺癌1號方的臨床應(yīng)用和推廣提供可靠的科學(xué)依據(jù)。[方法]復(fù)制小鼠Lewis肺癌模型,將成功復(fù)制Lewis肺癌小鼠模型的SPF級C57小鼠48只隨機(jī)分成4組即:荷瘤對照組、肺癌1號方(LC-1)組、順鉑(DDP)組、肺癌1號方組與順鉑聯(lián)合用藥組(以下簡稱“聯(lián)合用藥組”)。荷瘤對照組每天用生理鹽水灌胃一次,每三天腹腔注射生理鹽水一次;肺癌1號方組每天用肺癌1號方藥液灌胃一次,每三天腹腔注射生理鹽水一次;順鉑組每天用生理鹽水灌胃一次,每三天腹腔注射順鉑一次;聯(lián)合用藥組每天用肺癌1號方藥液灌胃一次,每三天腹腔注射順鉑一次。各實(shí)驗(yàn)組小鼠于在第13天斷頸處死,取出腫瘤標(biāo)本,稱取腫瘤重量以計(jì)算抑瘤率;腫瘤標(biāo)本固定后,切片染色進(jìn)行病理組織學(xué)檢查,并用免疫組化Sp法檢測HSP70和PRDX1蛋白陽性表達(dá)。用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。[結(jié)果]1.瘤重與抑瘤率的測定:1.1瘤重:與荷瘤對照組的平均瘤重(7.28±0.78g)相比較,肺癌1號方組平均瘤重(6.21±0.83g)低于該組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),順鉑組平均瘤(5.34±0.66g)重低于該組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),聯(lián)合用藥組平均瘤重(4.24±0.48g)同樣也低于該組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);以肺癌1號方組作為比較對象,順鉑組平均瘤重低于該組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),聯(lián)合用藥組的平均瘤重低于此組,差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);以順鉑組作為比較對象,聯(lián)合用藥組平均瘤重低于此組,差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。1.2抑瘤率測定:聯(lián)合用藥組抑瘤率為41.8%,效果最好;順鉑組抑瘤率為26.6%,效果次之;肺癌1號方組抑瘤率為14.7%,效果最弱。2.HSP70表達(dá)檢測:HSP70陽性表達(dá)的平均光密度值分別為:荷瘤對照組(0.0141±0.0018),肺癌1號方組(0.0108±0.0011),順鉑組(0.0101±0.0007),聯(lián)合用藥組(0.0071±0.0013)。肺癌1號方組的HSP70的平均光密度值低于荷瘤對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);順鉑組的HSP70的平均光密度值低于荷瘤對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);聯(lián)合用藥組的HSP70的平均光密度值低于荷瘤對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);肺癌1號組的HSP70的平均光密度值高于順鉑組,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肺癌1號方組的HSP70的平均光密度值高于聯(lián)合用藥組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);聯(lián)合用藥組的HSP70的平均光密度值低于順鉑組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3.PRDX1表達(dá)檢測:PRDX1陽性表達(dá)的平均光密度值分別為:荷瘤對照組(0.0128±0.0017),肺癌1號方組(0.0100±0.0015),順鉑組(0.0090±0.0007),聯(lián)合用藥組(0.0060±0.0013)。肺癌1號組的PRDX1的平均光密度值低于荷瘤對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);順鉑組的PRDX1的平均光密度值低于荷瘤對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);聯(lián)合用藥組的PRDX1的平均光密度值低于荷瘤對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);肺癌1號方組的PRDX1的平均光密度值略高于順鉑組,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肺癌1號方組的PRDX1的平均光密度值高于聯(lián)合用藥組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);聯(lián)合用藥組的PRDX1的平均光密度值低于順鉑組,但差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4.腫瘤組織病理切片觀察:三個治療組與荷瘤對照組相比,腫瘤細(xì)胞壞死區(qū)域增多,壞死面積增大,多呈灶狀或片狀壞死;細(xì)胞水腫明顯,細(xì)胞密度相對減低,細(xì)胞的異型性相對減少。治療組之間相互比較,聯(lián)合用藥組壞死區(qū)域面積相對較大,順鉑組比肺癌1號方組壞死區(qū)域面積較大。[結(jié)論]1.肺癌1號方可以降低小鼠Lewis肺癌中與細(xì)胞凋亡抑制相關(guān)蛋白HSP70和PRDX1的表達(dá),從而起到治療效果。2.順鉑可以降低小鼠Lewis肺癌凋亡抑制相關(guān)蛋白HSP70和PRDX1的過量表達(dá),提示降低肺癌細(xì)胞的凋亡抑制可能是順鉑治療肺癌的機(jī)制之一。3.肺癌1號方或順鉑單獨(dú)使用與二者聯(lián)合用藥相比,聯(lián)合用藥在降低小鼠Lewis肺癌HSP70和PRDX1表達(dá)方面,效果優(yōu)于單獨(dú)使用肺癌1號方或順鉑,提示肺癌1號方和順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)抗癌效果增強(qiáng)。
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2718946