【摘要】：目的本課題旨在應(yīng)用經(jīng)典的皮膚過敏手段建立HSP大鼠動(dòng)物模型,探究芪元顆粒有效部位(群)治療過敏性紫癜的作用及機(jī)理研究,將為芪元顆粒更廣泛地應(yīng)用于臨床提供了理論與實(shí)踐基礎(chǔ)。若芪元顆粒有效部位(群)新藥能研發(fā)成功,將進(jìn)一步增強(qiáng)原有的臨床療效,為更多的患者帶來福音,推廣前景十分廣闊。方法購買清潔級SD雄性大鼠80只,體重180±20g,6周齡。飼養(yǎng)于清潔級動(dòng)物房,室內(nèi)溫度保持為(22±1)℃,相對濕度保持為(46±5)%。適應(yīng)喂養(yǎng)一周后,對80只SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為8個(gè)組,分別是正常組、模型組、陽性對照組(即西咪替丁組,以下簡稱陽性組)、芪元顆粒組、揮發(fā)油組、多糖和蛋白質(zhì)組、皂苷組、黃酮組,每組10只,實(shí)驗(yàn)前每組自由飲水、攝食。除正常組外,其余組均造模。以干姜、蓽茇、胡椒以1:1:1比例在60℃恒溫水浴鍋上濃縮成12.5%/mL水溶液,置4℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1周后予除正常組以外的其他7組大鼠灌胃,3ml/只,均1次/d,正常組給予等量生理鹽水灌胃,自由飲食。用藥3周。之后將模型組、陽性組、芪元顆粒組、揮發(fā)油組、多糖和蛋白質(zhì)組、皂苷組、黃酮組大鼠給予腹腔注射含雞卵蛋白1mg+氫氧化鋁凝膠0.5mL+800ng脂多糖+1%伊文思藍(lán)的生理鹽水2mL/只,1次/7d,共2次。第二次注射后10min內(nèi)皮膚外涂含OVA1mg+氫氧化鋁凝膠0.5mL+800ngLPS的生理鹽水1mL/只進(jìn)行激發(fā)過敏反應(yīng)。正常組用等量生理鹽水操作。在大鼠致敏一周后,治療組分別以芪元顆粒中藥濃縮湯劑(黃芪30g、元參20g、當(dāng)歸15g、金銀花15g、白茅根9g、甘草6g)、總多糖和蛋白質(zhì)、總黃酮、總皂苷、總揮發(fā)油灌胃治療,2ml/只,均1次/d,陽性組以等量的西咪替丁灌胃治療,連續(xù)14天。通過大鼠血清、尿蛋白病理指標(biāo)驗(yàn)證模型,期間統(tǒng)計(jì)大鼠體重及一般行為學(xué),后腹腔注射10%的水合氯醛進(jìn)行麻醉,腹主動(dòng)脈采血,離心常規(guī)制備血清于-80℃低溫冰箱中備用,取出腎臟組織,用生理鹽水沖洗干凈置于甲醛中固定備用。后制備樣本,采用ELISA技術(shù)處理血、尿樣本,用光鏡、電鏡檢查大鼠腎臟病理。數(shù)據(jù)采用SPSS19.0處理,采用組間獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、以p0.05表示差異具有顯著性。結(jié)果(1)動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)期間有明顯的行為學(xué)變化,模型組大鼠病理指標(biāo)(CIC、IL-2、UP)異常,說明過敏性紫癜模型驗(yàn)證良好,可作為動(dòng)物模型參考。芪元顆粒的有效部位(群)揮發(fā)油、多糖和蛋白質(zhì)、皂苷、黃酮等,均能調(diào)控生化指標(biāo),可有效治療、干預(yù)過敏性紫癜。(2)ELISA結(jié)果:(1)正常組大鼠血清CIC濃度最低,模型組大鼠血清CIC濃度最高,兩者相比差異明顯(P0.05);陽性組、芪元顆粒組、多糖和蛋白質(zhì)組、黃酮組、皂苷組、揮發(fā)油組大鼠血清CIC濃度與模型組比差異明顯(P0.05),說明治療作用良好。各個(gè)治療組之間比較,陽性組與芪元組比較,兩者差異不明顯(P0.05),而陽性組和芪元組與其他治療組差異明顯(P0.05),但與正常組比較差異不明顯(P0.05),說明芪元組與陽性組治療效果最好;多糖組與其他治療組比較,差異明顯(P0.05);黃酮組與其他治療組比較差異明顯(P0.05);揮發(fā)油組與其他治療組比較差異明顯(P0.05),但與皂苷組比較差異不明顯(P0.05),說明揮發(fā)油組與皂苷組治療水平相對持平;皂苷與其他治療組比較差異明顯(P0.05),但與揮發(fā)油組比較差異不明顯(P0.05),說明兩者治療作用相當(dāng)。(2)正常組大鼠血清IL-2濃度最低,模型組大鼠血清IL-2濃度最高,兩者相比差異明顯(P0.05);陽性組、芪元顆粒組、多糖和蛋白質(zhì)組、黃酮組、皂苷組、揮發(fā)油組大鼠血清IL-2濃度與模型組比差異明顯(P0.05),說明治療作用良好。各個(gè)治療組之間比較,陽性組與芪元組比較,兩者差異不明顯(P0.05),而陽性組和芪元組與其他治療組差異明顯(P0.05),但與正常組比較差異不明顯(P0.05),說明芪元組與陽性組治療效果最好;多糖組與其他治療組比較,差異明顯(P0.05);黃酮組與其他治療組比較差異明顯(P0.05);揮發(fā)油組與其他治療組比較差異明顯(P0.05),但與皂苷組比較差異不明顯(P0.05),說明揮發(fā)油組與皂苷組治療水平相對持平;皂苷與其他治療組比較差異明顯(P0.05),但與揮發(fā)油組比較差異不明顯(P0.05),說明兩者治療作用相當(dāng)。(3)正常組大鼠UP數(shù)目最低,模型組大鼠UP數(shù)目最高,兩者相比差異明顯(P0.05);陽性組、芪元顆粒組、多糖和蛋白質(zhì)組、黃酮組、皂苷組、揮發(fā)油組大鼠UP數(shù)目與模型組比差異明顯(P0.05),說明治療作用良好。各個(gè)治療組之間比較,陽性組與芪元組比較,兩者差異不明顯(P0.05),而陽性組和芪元組與其他治療組差異明顯(P0.05),但與正常組比較差異不明顯(P0.05),說明芪元組與陽性組治療效果最好;多糖組與其他治療組比較,差異明顯(P0.05);黃酮組與其他治療組比較差異明顯(P0.05);揮發(fā)油組與其他治療組比較差異明顯(P0.05),但與皂苷組比較差異不明顯(P0.05),說明揮發(fā)油組與皂苷組治療水平相對持平;皂苷與其他治療組比較差異明顯(P0.05),但與揮發(fā)油組比較差異不明顯(P0.05),說明兩者治療作用相當(dāng)。(3)腎臟病理結(jié)果正常組腎臟組織未見明顯異常改變,模型組可見腎小球萎縮,間質(zhì)增生,小血管擴(kuò)張、充血,腎小管結(jié)構(gòu)紊亂;芪元組腎臟組織可見腎小球、腎小管無明顯異常改變,微量炎細(xì)胞浸潤;陽性組腎臟組織腎小管未見明顯改變,腎小球數(shù)量微增加,微量炎細(xì)胞浸潤;多糖組、黃酮組可見腎小球數(shù)量增多,間質(zhì)變少,血管擴(kuò)張,腎小管炎細(xì)胞浸潤;皂苷組、揮發(fā)油組可見腎小球數(shù)量增多,間質(zhì)變少,血管擴(kuò)張,腎小管腫脹,小管間出血,炎細(xì)胞浸潤。結(jié)論(1)芪元顆粒復(fù)方及有效提取成分可以降低實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ痛笫?4h尿蛋白定量,減少實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ痛笫笱逖h(huán)免疫復(fù)合物(CIC)含量,降低實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ痛笫笱錓L-2含量,減少實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ痛笫竽I小球系膜IgA、IgG、IgA+IgG沉積,改善腎臟血管內(nèi)皮。(2)芪元顆粒、總多糖和蛋白質(zhì)、總黃酮、總皂苷、總揮發(fā)油均能干預(yù)HSP,且有一定療效。根據(jù)數(shù)據(jù)分析結(jié)果示,其療效是芪元顆�？偠嗵呛偷鞍踪|(zhì)總黃酮總皂苷總揮發(fā)油。(3)本課題實(shí)驗(yàn)采用的過敏體質(zhì)的建立→連續(xù)抗原刺激致敏→抗原沖擊激發(fā)過敏反應(yīng)建立的HSP模型可被重復(fù),可作為HSP動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?br> 【學(xué)位授予單位】：山西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5;R-332
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)二：芪元顆粒及有效部位對大鼠 24h 蛋白尿的影響1.材料1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF 級健康雄性 SD 大 80 只，6 周齡，體重 180±200 克，動(dòng)物購買于北京市海淀區(qū)興旺實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場，合格證編號(hào)為 SCXK（京）2014-0013，造模前，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng)一周，實(shí)驗(yàn)室溫度 20±2℃，濕度 45％-75％。1.2 藥品與試劑同實(shí)驗(yàn)一。1.3 主要儀器

正常組 10 3.22±0.63模型組 10 27.42±1.98acdefgh陽性組 10 5.44±0.38befgh芪元組 10 3.52±0.38befgh多糖組 10 6.23±0.44abcdfgh黃酮組 10 8.18±0.37abcdegh皂苷組 10 15.30±1.06abcdef揮發(fā)組 10 15.64±0.85abcdef注：a表示與正常組比較，p<0.05；b表示與模型組比較，p<0.05；c表示與陽性組比較，p<0.05；d表示與芪元組比較，p<0.05；e表示與多糖組比較，p<0.05；f表示與黃酮組比較，p<0.05；g表示與皂苷組比較，p<0.05；h表示與揮發(fā)油組比較，p<0.05；

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王文明;;重癥過敏性紫癜應(yīng)用血液灌流治療的臨床療效觀察[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2014年29期

2 張曉強(qiáng);王娟;劉品莉;程玉釧;周曉莉;趙劍鋒;趙惠萍;張劍;陳鑫;;基于中西醫(yī)結(jié)合方法的大鼠過敏性紫癜模型的建立[J];陜西中醫(yī);2014年08期

3 邵啟峰;尹亞東;劉書紅;;過敏性紫癜對應(yīng)中醫(yī)病名辨析—《中醫(yī)外科學(xué)》“葡萄疫”命名商榷[J];中醫(yī)臨床研究;2014年12期

4 葛小鵬;華莉;;中西醫(yī)結(jié)合治療單純型過敏性紫癜療效分析[J];實(shí)用中醫(yī)藥雜志;2013年12期

5 李姣;;甲潑尼龍治療兒童腹型過敏性紫癜的療效觀察及護(hù)理[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2013年10期

6 王雪梅;肖中平;陳琳;高鵬;付X;李凌君;封韜;韓梅;;25例急性腹型紫癜的診斷及療效觀察[J];中國醫(yī)藥指南;2013年26期

7 吳愛惜;繆滔;盧映紅;;聚焦解決模式在兒科過敏性紫癜患者健康教育中的應(yīng)用[J];中國醫(yī)刊;2013年05期

8 郭春蘭;劉建宏;門九章;徐春麗;;芪元沖劑治療過敏性紫癜21例療效觀察[J];山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年02期

9 唐雪梅;;過敏性紫癜病因及免疫發(fā)病機(jī)制[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2012年21期

10 劉建宏;弓彥飛;門九章;郭春蘭;;芪元沖劑對過敏性紫癜小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮功能及免疫復(fù)合物的影響[J];遼寧中醫(yī)雜志;2012年09期

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 蘇亞平;;過敏性紫癜患者尤防腎損害[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 宮慶秀;糖皮質(zhì)激素治療過敏性紫癜的療效與證型的相關(guān)性分析[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2716154