【摘要】：目的通過動物實(shí)驗(yàn),觀察復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑(簡稱XY80目+100目)對潰瘍性結(jié)腸炎(UC)大鼠血清IL-4含量、結(jié)腸組織COX-2和MMP-9表達(dá)水平的影響,揭示該方治療UC可能的作用機(jī)制。方法將84只SPF級SD雄性大鼠,在實(shí)驗(yàn)動物中心飼養(yǎng)7天后,隨機(jī)分為:正常對照組(NC組)、模型對照組(MC組)、柳氮磺胺吡啶組(SASP組)、復(fù)方蜥蜴散80目治療組(XY80目組)、100目治療組(XY100目組)和80目+100目治療組(XY80目+100目組),共6組,每組各14只。NC組大鼠采用生理鹽水灌腸,其它組均采用三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇復(fù)合法誘導(dǎo)UC模型。HE染色確定造模成功后,各組大鼠分別給予相應(yīng)的藥物灌胃治療,均連續(xù)給藥14天,觀察大鼠一般情況的變化,進(jìn)行DAI評分。治療第14天末,將所有大鼠禁食24h,麻醉并處死后,光鏡下觀察大鼠結(jié)腸組織病理學(xué)改變,酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清IL-4含量,免疫組化法檢測結(jié)腸組織COX-2和MMP-9的表達(dá)水平,并用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析數(shù)據(jù)。結(jié)果1.一般情況:在實(shí)驗(yàn)過程中,我們發(fā)現(xiàn),NC組大鼠精神狀態(tài)好,反應(yīng)靈敏,被毛純凈整齊,體重增加較快,大便正常;MC組大鼠造模后第二天可發(fā)現(xiàn)精神狀態(tài)變差,反應(yīng)遲緩,扎堆不活動,食量顯著減少,體重減輕,被毛蓬松凌亂,晦暗不光亮,大便稀溏甚則伴有粘液膿血;各治療組和MC組相比較,以上表現(xiàn)均有不同程度的好轉(zhuǎn),精神狀態(tài)改善,毛色光亮,反應(yīng)靈敏,喜覓食,大便逐漸成形,以XY80目+100目組為最佳。2.疾病活動指數(shù)(DAI)評分:各治療組DAI評分與MC組同期比較,明顯降低,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);SASP組、XY80目組、XY100目組DAI評分與XY80目+100目組同期比較,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);XY80目組、XY100目組與SASP組之間DAI評分同期比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.病理組織學(xué)改變:行HE染色后放到顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),NC組結(jié)腸黏膜完整無缺損,黏膜皺襞表面光滑,走向規(guī)則,腺體排列規(guī)整;MC組結(jié)腸黏膜各層組織結(jié)構(gòu)消失,細(xì)胞間隙增寬,部分黏膜嚴(yán)重缺損,腺體破壞,大量嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤到黏膜層和黏膜下層;各治療組與MC組相比,結(jié)腸黏膜病理結(jié)果均有改善,以XY80目+100目組為最佳,各層結(jié)構(gòu)基本清晰,可見散在的炎性細(xì)胞。4.結(jié)果統(tǒng)計(jì):各治療組與MC組比較,血清IL-4含量明顯升高,結(jié)腸組織COX-2和MMP-9的表達(dá)水平明顯降低,有顯著差異(P0.05);XY80目+100目組與其它治療組比較,血清IL-4含量明顯升高,結(jié)腸組織COX-2和MMP-9的表達(dá)水平明顯降低,有顯著差異(P0.05);SASP組、XY80目組、XY100目組三者之間比較,血清IL-4含量,結(jié)腸組織COX-2和MMP-9的表達(dá)水平都沒有差異(P0.05)。經(jīng)Pearson相關(guān)分析,COX-2與MMP-9表達(dá)呈正相關(guān)(P0.05,相關(guān)系數(shù)r=0.969)。結(jié)論1.復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑能夠使UC模型大鼠的一般情況及結(jié)腸黏膜損傷情況得到改善,并能降低DAI評分。2.復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑可以升高IL-4含量,降低COX-2和MMP-9的表達(dá)水平。3.COX-2與MMP-9表達(dá)呈正相關(guān),說明COX-2和MMP-9在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生發(fā)展過程中具有協(xié)同作用。4.復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑的配方獨(dú)特,其作用機(jī)制可能通過升高抑炎因子IL-4的含量,干預(yù)NF-κB信號通路的激活,降低炎癥性相關(guān)酶COX-2和MMP-9的表達(dá)水平而抑制炎性介質(zhì)表達(dá),調(diào)節(jié)免疫失衡,減輕腸道的炎癥反應(yīng),促使損傷的結(jié)腸黏膜修復(fù)。5.復(fù)方蜥蜴散經(jīng)不同微粒組合后可增強(qiáng)治療效果,對結(jié)腸黏膜潰瘍的修復(fù)作用明顯,比單用80目微粒或單用100目微粒要好。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5
【圖文】：

各組大鼠腸黏膜組織病理形態(tài)學(xué)改變（HE100）

各組大鼠腸黏膜組織COX-2蛋白免疫組化染色情況(SP×200)

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本文編號：2714549