【摘要】：中醫(yī)理論認(rèn)為臨床常用中藥黃芪蜜炙可增強(qiáng)其補(bǔ)中益氣、升陽固表等作用,從而廣泛用于脾肺氣虛、中氣下陷之證。課題組前期的蜜炙黃芪干預(yù)脾氣虛證大鼠藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明蜜炙品較生品能更好的改善模型組大鼠的氣虛體征和生理生化指標(biāo)。并通過黃芪蜜炙前后的化學(xué)成分研究發(fā)現(xiàn)毛蕊異黃酮苷、黃芪甲苷和黃芪皂苷I的含量均有所增加,因此將這三種成分確定為蜜炙黃芪炮制特征成分。本研究應(yīng)用代謝組學(xué)技術(shù)進(jìn)行上述炮制特征成分的藥效學(xué)研究,并結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討其作用機(jī)制。方法:通過勞倦傷脾加限制飲食的造模方法建立脾氣虛證大鼠模型�？疾禳S芪甲苷,黃芪皂苷I和毛蕊異黃酮苷對(duì)脾氣虛證大鼠體征,白細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞因子等生理生化指標(biāo)的影響;應(yīng)用基于UPLC-Q-TOF/MS和~1H-NMR的血清和尿液代謝組學(xué)篩選藥效相關(guān)的標(biāo)記物和代謝通路,并評(píng)估蜜炙黃芪炮制特征成分的藥效;采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法篩選蜜炙黃芪炮制特征成分的潛在作用靶點(diǎn)。結(jié)果:(1)淋巴細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、血清D-木糖吸收值及體征得分在脾氣虛證大鼠中顯著的降低(P0.05)說明脾氣虛證模型構(gòu)建成功。(2)黃芪甲苷,黃芪皂苷I和毛蕊異黃酮苷干預(yù)脾氣虛證大鼠可顯著改善其氣虛體征得分、D-木糖吸收值、脾指數(shù)和胸腺指數(shù),提高脾氣虛證大鼠的淋巴細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量。同時(shí)使脾氣虛證大鼠細(xì)胞因子IL-6和TNF-α的表達(dá)降低而IFN-γ表達(dá)升高。經(jīng)毛蕊異黃酮苷和黃芪甲苷干預(yù)后的大鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和血常規(guī)相關(guān)指標(biāo)的恢復(fù)程度優(yōu)于皂苷I;黃芪甲苷抑制TNF-α和IL-6的表達(dá),促進(jìn)IFN-γ的表達(dá)作用優(yōu)于其它特征成分。(3)血清代謝組學(xué)分析篩選出18個(gè)藥效相關(guān)的潛在標(biāo)記物,主要為磷脂類和膽堿類物質(zhì),如溶血磷脂酰膽堿和磷脂酰膽堿等;尿液代謝組學(xué)分析篩選出23個(gè)藥效相關(guān)的潛在標(biāo)記物,主要為氨基酸類物質(zhì),如絲氨酸、肌酸酐、馬尿酸、犬尿酸等。血清和尿液中共同篩選的標(biāo)記物為左旋肉堿。標(biāo)記物主要涉及的代謝通路是色氨酸代謝通路,三羧酸循環(huán),苯丙氨酸代謝,花生四烯酸代謝,甘油磷脂代謝,氨基酸代謝等。蜜炙黃芪及炮制特征成分均能恢復(fù)上述標(biāo)記物的含量且接近正常組水平,其中蜜炙黃芪組毛蕊異黃酮苷組黃芪甲苷組黃芪皂苷I組。(4)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究共篩選了29個(gè)炮制特征成分的潛在作用靶點(diǎn),其中黃芪甲苷有7個(gè),黃芪皂苷I有12個(gè),毛蕊異黃酮苷有10個(gè)。這些靶點(diǎn)分別為MIF、ALDH2、AMH、DNMT1、MAPK14等。經(jīng)靶標(biāo)代謝分析發(fā)現(xiàn)其與蛋白合成,能量代謝,色氨酸代謝,炎癥反應(yīng)和脂質(zhì)代謝有關(guān)。結(jié)論:蜜炙黃芪炮制特征成分具有改善脾氣虛證的作用且能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的免疫應(yīng)答來提高脾氣虛證大鼠的免疫功能。其作用機(jī)制與調(diào)控花生四烯酸代謝和甘油磷脂代謝提高機(jī)體的免疫功能,調(diào)控色氨酸代謝、三羧酸循環(huán)和氨基酸代謝促進(jìn)機(jī)體能量供應(yīng)和蛋白合成有關(guān)。毛蕊異黃酮苷調(diào)控的靶點(diǎn)主要參與蛋白合成,能量代謝和嘌呤代謝途徑;黃芪甲苷和皂苷I調(diào)控的靶點(diǎn)主要參與炎癥反應(yīng)與氨基酸代謝�；赨PLC-Q-TOF/MS和~1H-NMR的代謝組學(xué)結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和相關(guān)生物信息學(xué)分析方法為蜜炙黃芪及其特征成分的藥效研究提供了新的思路。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

論文總體研究思路和內(nèi)容框架示意圖

圖 2-1 生理指標(biāo)的熱圖分析2.4.2 蜜炙黃芪炮制特征成分的藥效學(xué)評(píng)價(jià)模型構(gòu)建成功，對(duì)模型組大鼠隨機(jī)分組，分別為黃芪生品組、炙品組、毛蕊異黃酮苷組、黃芪甲苷組、皂苷 I 組和模型對(duì)照組。正常組和模型組蒸餾水給藥給藥組分別藥液干預(yù)兩周。給藥期間按表 2-1 統(tǒng)計(jì)癥狀得分。并記錄大鼠體重，臟器指數(shù)，血常規(guī)檢查結(jié)果，細(xì)胞因子(IL-6，TNF-α，IFN-γ)在各組間的變化。2.4.2.1 體重變化，癥狀得分和臟器指數(shù)藥物干預(yù)后的體重變化、癥狀得分及臟器指數(shù)的變化見表 2-3。由表可知，蜜炙黃芪、黃芪生品、黃芪甲苷、皂苷 I 和毛蕊異黃酮苷干預(yù)脾氣虛證大鼠后體重顯著增加且與模型組相比具有顯著性的差異（P<0.01）；模型組癥狀得分與正常組具有顯著性差異（P<0.05），而藥物干預(yù)后，癥狀得分接近正常組水平，以

【參考文獻(xiàn)】

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3 張磊;孫靜;張濤;董虹;楊佐君;穆祥;胡格;;黃芪水煎液誘導(dǎo)大鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖以及分泌IFN-γ的研究[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年03期

4 何清華;孫明曉;;高尿酸血癥的治療與健康管理[J];中華健康管理學(xué)雜志;2015年01期

5 李金鳳;黃立鋒;姚詠明;張淑文;李文雄;張震宇;王淑珍;;黃芪甲苷在體外對(duì)高遷移率族蛋白B1介導(dǎo)小鼠調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞免疫功能的影響[J];北京中醫(yī)藥;2014年11期

6 施旭光;吳美音;王閩予;黃張杰;鄒忠杰;黃曼婷;龔夢(mèng)鵑;;脾氣虛證大鼠尿液代謝組學(xué)異常及補(bǔ)中益氣湯干預(yù)作用的研究[J];中藥新藥與臨床藥理;2013年06期

7 楊波;張愛華;王萍;孫文軍;吳修紅;閻廣利;韓瑩;孫暉;王喜軍;;基于果蠅模型的酸棗仁皂苷A、B治療失眠癥的實(shí)驗(yàn)研究[J];中醫(yī)藥信息;2013年05期

8 張愛華;王喜軍;;中醫(yī)藥的代謝組學(xué)研究[J];世界科學(xué)技術(shù)(中醫(yī)藥現(xiàn)代化);2013年04期

9 張亞洲;徐風(fēng);梁靜;唐靜姝;尚明英;王璇;蔡少青;;蒙古黃芪中異黃酮類化學(xué)成分研究[J];中國(guó)中藥雜志;2012年21期

10 謝文聞;童越敏;何微莉;刁青云;;蜂蜜保健和藥理作用研究進(jìn)展[J];中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng);2012年10期

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2 黃超;藥物口服生物利用度預(yù)測(cè)及在中藥歸經(jīng)研究上的應(yīng)用[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

3 肖滿珊;蜜炙黃芪化學(xué)成分分析及作用于脾氣虛大鼠的藥效學(xué)評(píng)價(jià)[D];廣東藥學(xué)院;2015年

4 宋舟;中藥方劑香芪湯對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞炎癥信號(hào)通路的調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2013年

5 初艷;基于血漿代謝組學(xué)的脾氣虛證本質(zhì)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

6 劉巍;蜜炙黃芪的化學(xué)成分研究[D];沈陽藥科大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2713265