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基于數(shù)據(jù)挖掘分析探討中藥單體聯(lián)合BMSCs移植修復軟骨缺損的研究

發(fā)布時間:2020-06-14 04:31
【摘要】:目的:1、通過數(shù)據(jù)挖掘分析,探討中醫(yī)藥治療膝骨關節(jié)炎處方的用藥規(guī)律。2、數(shù)據(jù)挖掘篩選臨床治療膝骨關節(jié)炎常用的中藥,并選擇其有效成分,聯(lián)合BMSCs觀察其膝骨關節(jié)炎軟骨缺損的影響。方法:1、篩選截止日期至2017年12月相關期刊論文(Chinese National Knowledge Infrastructure,CNKI)、萬方數(shù)據(jù)庫及維普資訊數(shù)據(jù)庫中有關中醫(yī)藥治療膝骨關節(jié)炎的處方,基于SPSS軟件運用數(shù)據(jù)挖掘方法,總結出高頻率藥物、藥對、核心組合等,探討治療膝骨關節(jié)炎的組方規(guī)律。2、根據(jù)篩選出的的藥物,采用其主要有效成分,運用CCK-8實驗篩選出最佳濃度及最佳作用時間。構建膝關節(jié)軟骨缺損模型,將健康新西蘭大白兔隨機分為模型組、中藥單體組、BMSCs組、中藥單體+BMSCs組,關節(jié)腔內(nèi)注射4周后取材并進行ICRS組織學評分,HE及甲苯胺藍染色觀察修復效果。成果:1、文獻研究最終篩選符合納入標準的文獻共140篇,對錄入的140個方劑,一共有217味藥物進行分析,其中出現(xiàn)頻率較高的10味中藥分別為牛膝、淫羊藿、當歸、熟地、白芍、杜仲、雞血藤、骨碎補、黃芪和川芎,并結合現(xiàn)代基礎研究,篩選并運用淫羊藿的有效成分淫羊藿甙干預BMSCs。通過對頻率前20位中藥進行因子分析,挖掘中醫(yī)藥治療膝痹用藥的配伍規(guī)律,其中包括:桑寄生、獨活;桂枝、白芍;補骨脂、雞血藤;黃芪、當歸;白術、茯苓;熟地、杜仲;木瓜、骨碎補;藥物關聯(lián)規(guī)則分析結果提示治療膝痹處方的常用核心藥物組合,包括牛膝、杜仲、熟地;當歸、杜仲、白芍;淫羊藿、雞血藤、熟地;牛膝、杜仲、白芍、當歸等。2、CCK-8實驗表明淫羊藿甙能夠增強BMSCs活性,以luM的濃度最佳,最佳干預時間是72h;造模4周后,我們發(fā)現(xiàn)淫羊藿甙+BMSCs組軟骨缺損面積較其他組明顯減少,ICRS組織學評分明顯優(yōu)于較其他組(P0.05);HE染色劑甲苯胺藍染色提示淫羊蕾甙+BMSCs組的修復組織和周圍正常軟骨組織更加接近。結論:1、通過數(shù)據(jù)挖掘分析,中醫(yī)藥治療膝骨關節(jié)炎中常用的藥物是牛膝與淫羊藿;常用藥對以桑寄生、獨活為主。通過數(shù)據(jù)挖掘方法有助于總結中醫(yī)藥處方的用藥規(guī)律,對臨床用藥具有借鑒意義。2、淫羊蕾甙能夠提高BMSCs活性,增強BMSCs的軟骨修復作用。 【學位授予單位】:廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R285

【圖文】:

關聯(lián)規(guī)則,支持度,前項,百分比


設置最低支持度10%,最小置信度50%,最大前項為10,,對藥物分別進行二階、三階、逡逑四階關聯(lián)規(guī)則分析,一共計算得到規(guī)則219條,其中,最低支持度為10.邋000%,最大逡逑支持度為23.邋571%,關聯(lián)規(guī)則圖見圖1,圖中牛膝、熟地、淫羊蕾、杜仲、當歸、白芍逡逑是關聯(lián)度最大的藥物組合。由此可知,牛膝、桑寄生組合出現(xiàn)的頻率最高,白芍、桂逡逑枝次之。3味藥核心組合當中,以牛膝、桑寄生、熟地出現(xiàn)頻率最高。綜合關聯(lián)規(guī)則逡逑分析,桑寄生、牛膝、熟地、淫羊藿、杜仲、當歸、白芍是治療膝痹名方獨活寄生湯逡逑的核心藥物

淫羊藿甙,成骨,軟骨,貼壁培養(yǎng)


3.2結果與分析逡逑3.邋2.邋1邋BMSCs的培養(yǎng)及鑒定逡逑如圖2所示,全骨髓貼壁培養(yǎng)3天后可見少許梭形細胞貼壁生長,培養(yǎng)7天后可逡逑見克隆球形成;第3代細胞培養(yǎng)48天小時后,可長滿90%以上;第3代經(jīng)分化14天,逡逑茜素紅染色和ALP染色可見大部分細胞分化為成骨細胞;阿利新藍染色可見大部分細逡逑胞可分化為成軟骨細胞。以上說明經(jīng)全骨髓貼壁培養(yǎng)獲得的細胞為BMSCs。逡逑■■■逡逑P()3d邐PO邋7d邐P3邋48h逡逑Alizarin邋red邐Alkaline邋phosphatcasc邐Alcian邋blusc逡逑圖2:BMSCs的初代培養(yǎng)及成骨、成軟骨分化(X100)逡逑3.邋2.邋2淫羊藿甙對BMSCs活性的影響。逡逑如圖3所示,在干預72h內(nèi),0.邋OluM、0.邋luM、10uM淫羊藿甙對BMSCs活性均具逡逑有增強作用,而100uM的淫羊藿甙對BMSCs無明顯促進作用。干預72h時,luM淫羊逡逑16逡逑

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本文編號:2712279

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