發(fā)布時間：2020-06-12 20:09

【摘要】：目的:篩選出抗小瓜蟲病的有效中藥復方W,制備中藥復方W最佳提取物,為中藥復方W在防治小瓜蟲病的運用提供依據(jù)。方法:(1)以感染小瓜蟲的動物為實驗動物,建立藥效學評價方法,對13個中藥復方進行殺蟲試驗篩選。(2)建立復方W的紫外分析方法,對提取方法、粉碎度、溶媒用量、提取時間和提取次數(shù)等單因素進行考察,優(yōu)選出各單因素水平,采用L_9(3~4)正交設計實驗優(yōu)選出復方W的最佳提取工藝。(3)制備1g/ml的中藥復方W最佳提取物。(4)根據(jù)不同濃度的復方W提取物對試驗動物的進行安全性試驗,把試驗動物的平均死亡率轉換成概率單位,采用Bliss法計算分析試驗動物24、48、96 h的的半致死濃度LC50,采用spss20.0軟件中的Probit概率單位分析法進行統(tǒng)計。(5)以丁醇—醋酸—水(4:2:1)為展開劑,碘化鉍鉀試液為顯色劑,采用薄層色譜法對中藥復方W最佳提取物進行定性鑒別。(6)選用流動相:乙腈—水(28:72);檢測波長205nm,采用高效液相法測定復方W最佳提取物中指標成分H的含量。(7)對1g/ml的中藥復方W最佳提取物進行藥效學實驗評價。結果:篩選出殺小瓜蟲的有效中藥復方W,建立了復方W的紫外評價方法,最大吸收波長是475nm,方法學考察的各項RSD值均小于2%;優(yōu)化出復方W最佳提取物制備工藝為:粉碎過60目篩網(wǎng),選用溶媒75%乙醇,回流法提取2次,每次60min,溶媒用量每次為10倍;制備了中藥復方W最佳提取物,以丁醇—醋酸—水(4:2:1)為展開劑,對提取物進行薄層色譜鑒別,對照品和對照品藥材、供試品溶液的指示斑點一致,Rf值為0.55;藥效學實驗中藥復方W最佳提取物在40mg/L,53小時對小瓜蟲的殺滅率為100%,觀察96h期間實驗動物無異常情況。結論:中藥復方W最佳提取物抗小瓜蟲病安全有效,為開發(fā)新藥提供了實驗依據(jù)。
【圖文】：

圖 3-1 中藥各方提取物 72h 殺蟲率由上圖表結果可知，藥物濃度設計在 10、20、30、40、60、80、100、200mg/L時，該濃度范圍內對小瓜蟲沒有明顯殺滅作用的方有 ED、FD、GD、LD、MD、CK、HK、LK、HZ、MZ、QZ，最高殺蟲率小于 20％；根據(jù)前面建立的抗小瓜蟲藥效評價方法，W 方提取物殺蟲劑量為 60mg/L,殺蟲率可達 100%，且未出現(xiàn)魚死亡。因而，W 方是有效地殺滅小瓜蟲的中藥復方。顯微鏡觀察比較使用復方 W 提取物前后小瓜蟲病魚，結果見下圖 3-2、3-3所示：

圖 3-1 中藥各方提取物 72h 殺蟲率由上圖表結果可知，藥物濃度設計在 10、20、30、40、60、80、100、200m時，該濃度范圍內對小瓜蟲沒有明顯殺滅作用的方有 ED、FD、GD、LD、MCK、HK、LK、HZ、MZ、QZ，最高殺蟲率小于 20％；根據(jù)前面建立的抗小瓜蟲效評價方法，，W 方提取物殺蟲劑量為 60mg/L,殺蟲率可達 100%，且未出現(xiàn)魚亡。因而，W 方是有效地殺滅小瓜蟲的中藥復方。顯微鏡觀察比較使用復方 W 提取物前后小瓜蟲病魚，結果見下圖 3-2、所示：
【學位授予單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 孟慶云;符玲;高振;尹芬;姚寒春;畢躍峰;;野菊花總黃酮提取方法比較及其抗氧化活性研究[J];中草藥;2015年21期

2 王彰平;;淺談淡水養(yǎng)殖魚類常見疾病及治療策略[J];農民致富之友;2015年16期

3 方珍珍;蘇文;陶秉春;;感染小瓜蟲草魚幼魚組織病理學變化[J];水產科學;2015年07期

4 黃江峰;鄧勇輝;饒毅;周智勇;章海鑫;盛銀平;吳蘇敏;;環(huán)烷酸銅對離體小瓜蟲殺滅效果的研究[J];江西水產科技;2015年02期

5 楊小青;宋金春;謝順嵐;郝好華;;不同提取方法蓮子心總生物堿抗氧化活性比較[J];中國醫(yī)藥導報;2015年18期

6 姚嘉峗;袁雪梅;徐洋;藺凌云;尹文林;潘曉藝;郝貴杰;沈錦玉;;鏈霉菌-XY52代謝產物對小瓜蟲的體外殺滅活性研究[J];安徽農業(yè)科學;2015年06期

7 劉春憬;;正交優(yōu)化黃芩中黃芩苷的提取工藝[J];農產品加工;2015年01期

8 閆春梅;鄭偉;張雅斌;李忠強;肖志國;于新海;;小瓜蟲抑動蛋白基因核酸疫苗制備[J];中國獸醫(yī)學報;2014年12期

9 張懷予;王軍節(jié);陳園凡;魏晉梅;李貞子;方碩;;水蒸氣蒸餾法提取花椒精油及揮發(fā)性成分分析[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2014年07期

10 董紅敏;李素清;牛小勇;沈麗雯;李路;秦文;;正交實驗優(yōu)化川明參多糖超聲提取工藝[J];食品工業(yè)科技;2014年08期

相關博士學位論文 前1條

1 龔駿;青島沿海管口目纖毛蟲的分類學研究及科屬級階元的系統(tǒng)修訂[D];中國海洋大學;2005年

相關碩士學位論文 前5條

1 柴金珍;抗感染NZ方提取物的制備工藝優(yōu)化研究[D];廣東藥學院;2014年

2 劉漢成;甘肅甘南高原沼澤濕地春季纖毛蟲分類與物種多樣性研究[D];西北師范大學;2010年

3 雷曼紅;多子小瓜蟲形態(tài)發(fā)育及其感染金魚的動態(tài)組織病理研究[D];四川農業(yè)大學;2005年

4 陳達麗;淡水魚小瓜蟲病的病原、病理及藥物和免疫預防研究[D];西南師范大學;2004年

5 王維娜;中藥腦去痛用藥材和顆粒劑含量測定的方法學研究[D];河北醫(yī)科大學;2002年

本文編號：2710048