【摘要】：目的:本課題基于芪明顆粒良好的視網(wǎng)膜保護(hù)效應(yīng),通過建立放射性視網(wǎng)膜病變(Radiation Retinopathy,RR)大鼠模型,探討芪明顆粒對RR模型動物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及HIF1α-VEGF信號通路干預(yù)的機(jī)制研究,為中醫(yī)藥防治RR以及類似疾病提供一定的研究思路。方法:采用直線加速器放射大鼠眼部,建立RR大鼠模型。除正常對照組25只大鼠外,其余125只大鼠接受放射,單次劑量10Gy,每周放射1次,連續(xù)3周,合計(jì)劑量30Gy。隨機(jī)分6組為:正常組,模型組,陽性藥Salubrunal對照組(sal組),中藥高、中、低劑量組,每組25只。放射3月后開始連續(xù)灌胃。用藥1、3、6月后,HE染色觀察治療后視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)改變;免疫組織化學(xué)染色法檢測視網(wǎng)膜CHOP、HIF1α、VEGF表達(dá)情況。結(jié)果:(1)造模后,HE染色觀察顯示模型組視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)松散,模型組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層排列紊亂伴水腫,各層細(xì)胞均減少,以內(nèi)核層及外核層為主。視網(wǎng)膜消化鋪片示模型組低倍鏡下毛細(xì)血管排列紊亂,扭曲,高倍鏡下血管管徑粗細(xì)不均,與正常組相比較,內(nèi)皮細(xì)胞及周細(xì)胞數(shù)量減少,細(xì)胞變形。免疫組織化學(xué)染色檢測示模型組VEGF平均光密度升高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。提示造模成功。(2)用藥后(1)HE染色觀察顯示,用藥1月后芪明顆粒中劑量組及sal組細(xì)胞各層層數(shù)及形態(tài)較完整,節(jié)細(xì)胞層排列整齊致密,未見明顯水腫及空泡形成。用藥至3、6月,芪明顆粒中劑量組節(jié)細(xì)胞層明顯整齊,內(nèi)核層、外核層形態(tài)完整,未見水腫、血管增生及纖維增值膜等改變,sal及中藥高、低劑量組內(nèi)界膜及視網(wǎng)膜纖維層細(xì)胞略增生。提示芪明顆�？蓽p輕RR視網(wǎng)膜水腫,改善組織細(xì)胞凋亡,一定程度上抑制新生血管的形成,從而保護(hù)視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)的改變。(2)CHOP免疫組織化學(xué)檢測示:用藥1月后,模型組大鼠視網(wǎng)膜CHOP蛋白表達(dá)增加,與正常組差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且隨著用藥時間延長,表達(dá)在逐漸增加;與模型組相比較,sal組及中藥中劑量組在用藥1月后表達(dá)減少,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且隨著時間延長,表達(dá)量在不斷減少往正常靠近,中藥低、高劑量組在用藥1月后蛋白表達(dá)減少,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨著時間延長,蛋白表達(dá)減少差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。提示早期RR可出現(xiàn)CHOP蛋白表達(dá)增加,并隨著時間延長,表達(dá)在不斷增加,中藥及salubrinal可降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白CHOP表達(dá),并隨著時間延長,效果越明顯。(3)HIF-1α免疫組織化學(xué)檢測示:用藥1月后,模型組大鼠視網(wǎng)膜HIF1α蛋白表達(dá)增加,與正常組相比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且隨著用藥時間延長,表達(dá)在增加;與模型組相比較,sal組、中藥低、中、高劑量組表達(dá)均減少,且差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),但中藥中劑量組較sal組降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨著用藥時間延長至3、6月,中藥中劑量組表達(dá)量不斷減少,且較sal差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)VEGF免疫組織化學(xué)檢測示:用藥1月后,模型組大鼠視網(wǎng)膜VEGF蛋白表達(dá)增加,與正常組相比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且隨著用藥時間延長,表達(dá)在不斷增加;與模型組相比較,sal組、中藥低、中、高劑量組表達(dá)均減少,差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與sal組相比較中藥中、高劑量組均增加,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨著用藥時間延長至3、6月,中藥中劑量組較sal組表達(dá)減少,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。提示salubrinal和芪明顆粒均可在早期干預(yù)早期放射性視網(wǎng)膜病變HIF-1α-VEGF信號通路,降低HIF-1α、VEGF表達(dá)并隨著用藥時間延長,表達(dá)越為減少。結(jié)論:芪明顆粒干預(yù)早期RR視網(wǎng)膜損傷,減輕視網(wǎng)膜組織水腫,一定程度上抑制血管增生,并對視網(wǎng)膜組織細(xì)胞放射損傷產(chǎn)生一定程度保護(hù)效應(yīng)。其作用機(jī)制可能是通過干預(yù)內(nèi)置網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)CHOP蛋白表達(dá),降低HIF-1α表達(dá),抑制視網(wǎng)膜VEGF表達(dá),進(jìn)而改善視網(wǎng)膜組織缺血缺氧及血管新生。
【圖文】：

.4.2 RR 大鼠視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)觀察HE 染色顯示正常組大鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)較清楚，，節(jié)細(xì)胞單層排列，大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞排列紊亂伴水腫，各層細(xì)胞數(shù)量均減為主（見圖 1.1,1.2 黑色箭頭所示）。

.4.2 RR 大鼠視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)觀察HE 染色顯示正常組大鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)較清楚，節(jié)細(xì)胞單層排列，大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞排列紊亂伴水腫，各層細(xì)胞數(shù)量均減為主（見圖 1.1,1.2 黑色箭頭所示）。
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 宋陽光;;黃斑水腫治療研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐;2015年21期

2 趙春穎;侯麗紅;車慧欣;;葛根素滴眼液對原發(fā)性開角型青光眼視盤參數(shù)及抗氧化能力的影響[J];國際眼科雜志;2015年08期

3 嚴(yán)然;葉河江;劉愛琴;祝捷;;放射性視網(wǎng)膜病變中醫(yī)證治規(guī)律探析[J];成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2014年04期

4 冀建平;程先華;張淳;廉麗華;黃小東;李志英;;益氣化瘀通竅法對放射性視網(wǎng)膜損傷大鼠血管內(nèi)皮的保護(hù)作用研究[J];新中醫(yī);2014年08期

5 蘇國輝;;枸杞子與視網(wǎng)膜保護(hù)[J];中國眼鏡科技雜志;2014年05期

6 葉鋅銘;吳伯樂;;芪明顆粒對老年單純型糖尿病視網(wǎng)膜病變的療效及血清中VEGF和IGF-1的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2013年30期

7 李小菊;盧宏達(dá);陳衛(wèi)群;雷章;胡楊;孔慶志;;水蛭抑制腫瘤血管生成的作用及其機(jī)制[J];腫瘤防治研究;2013年01期

8 張蓮珠;王會弟;;茺蔚子研究進(jìn)展[J];長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2012年05期

9 唐東昕;楊柱;龍奉璽;;葛根散對小鼠結(jié)腸腺癌的抑制作用[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2012年09期

10 劉茹;謝麗蓮;田濤;羅喬英;;早期PRP與復(fù)方樟柳堿顳淺動脈旁穴位注射治療RR的療效[J];國際眼科雜志;2012年03期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前5條

1 李翡翡;輻射通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)CHOP和JNK的表達(dá)對乳腺癌細(xì)胞自噬和凋亡的調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D];中國科學(xué)院研究生院(近代物理研究所);2016年

2 朱小娟;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)源性轉(zhuǎn)錄因子CHOP在賁門癌中的作用機(jī)制及臨床研究[D];河南科技大學(xué);2015年

3 嚴(yán)然;補(bǔ)精益視片抑制早期放射性視網(wǎng)膜病變氧化應(yīng)激損傷及VEGF表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 黃海香;紅景天對模擬高海拔缺氧的大鼠視網(wǎng)膜的影響[D];蘭州大學(xué);2015年

5 易月娥;黃芪和葛根對糖尿病腎病內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激未折疊蛋白反應(yīng)PERK通路的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

本文編號：2709352