發(fā)布時間：2020-06-11 20:12

【摘要】：目的:本研究將丹芍配伍干預(yù)急性心肌損傷大鼠心臟組織差異表達(dá)的miRNA作為研究的著入點,進(jìn)而探討丹芍配伍干預(yù)心肌缺血損傷的miRNA調(diào)控作用機(jī)制。方法:1.構(gòu)建大鼠急性心肌缺血損傷模型,丹芍配伍進(jìn)行相應(yīng)的干預(yù),通過基因芯片篩選模型組及丹芍配伍組大鼠心肌差異表達(dá)的microRNA,并用RT-PCR進(jìn)行驗證。2.對差異表達(dá)的microRNA進(jìn)行生物信息學(xué)分析,構(gòu)建miRNA與Gene、GO、Pathway之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),得出關(guān)鍵上調(diào)和關(guān)鍵下調(diào)的microRNA,及主要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。3.構(gòu)建大鼠急性心肌損傷模型,丹芍配伍進(jìn)行相應(yīng)的干預(yù),通過心電監(jiān)測、心肌梗塞面積的測定、蛋白濃度的測定、western blot等實驗對生物信息學(xué)預(yù)測的結(jié)果進(jìn)行進(jìn)一步驗證,探討在miRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中丹芍配伍對心肌缺血損傷的保護(hù)作用機(jī)制。4.建立了大鼠H9c2細(xì)胞缺氧模型。丹芍配伍、miRNA-21模擬劑、miRNA-21抑制劑、p38MAPK信號通路抑制劑(SB203580)干預(yù)模型,通過ELISA法檢測TNF-α的水平,western blot等實驗對MAPK信號通路進(jìn)行檢測,進(jìn)一步探討丹芍配伍調(diào)控心肌缺血的機(jī)制。結(jié)果:1.丹芍配伍干預(yù)心肌缺血損傷模型時,心肌差異表達(dá)的關(guān)鍵microRNA為上調(diào)的miRNA-141-3p和下調(diào)的miRNA-21-5p、miRNA-92a-3p、miRNA-223-3p。2.在調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中最關(guān)鍵的上調(diào)miRNA均為miRNA-141-3p,最關(guān)鍵的下調(diào)miRNA均為miRNA-21-5p,兩者共同調(diào)控MAPK signaling pathway這條通路,且這條通路受二者調(diào)控的相關(guān)性最高。3.丹芍配伍對急性心肌缺血時S-T段的抬高、心肌梗塞面積、血清CKLDH酶活性、MDA含量具有明顯的抑制作用,升高SOD活性,抑制p38和JNK信號通路,促進(jìn)ERK信號通路的活化。4.在H9c2細(xì)胞中,丹芍配伍通過調(diào)控miRNA-21的表達(dá)水平,進(jìn)一步抑制TNF-α的分泌;丹芍配伍可以抑制p38MAPK信號通路的活化;同時丹芍配伍可以反轉(zhuǎn)miRNA-21模擬劑對p38MAPK信號通路的活化作用;丹芍配伍與miRNA-21抑制劑合用對缺氧激活的p38MAPK信號通路有更顯著的抑制作用。結(jié)論:1.丹芍配伍干預(yù)心肌缺血損傷模型時,最關(guān)鍵的上調(diào)miRNA均為miRNA-141-3p,最關(guān)鍵的下調(diào)miRNA均為miRNA-21-5p,MAPKs為重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。2.丹芍配伍可通過抑制p38和JNK信號通路,促進(jìn)ERK信號通路的活化,發(fā)揮保護(hù)心肌的重要作用。3.丹芍配伍可通過下調(diào)miRNA-21的表達(dá)水平,抑制p38MAPK信號通路,抑制心肌缺血時重要炎癥因子的分泌和釋放,進(jìn)而發(fā)揮對缺血心肌的保護(hù)作用。
【圖文】：

圖 2.1 丹芍配伍對 肌缺血 p38 號通路的影響1 假手術(shù)組 2 丹芍配伍組 3 模型組 2.2 可以看出，與模型組比較，丹芍組 JNK 的表達(dá)最少，說明NK 通路的表達(dá)，一定程度上保護(hù)了由急性心肌梗死引起的心肌保護(hù)心臟的作用。圖 2.2 丹芍配伍對 肌缺血 JNK 號通路的影響

圖 2.1 丹芍配伍對 肌缺血 p38 號通路的影響1 假手術(shù)組 2 丹芍配伍組 3 模型組2 可以看出，與模型組比較，丹芍組 JNK 的表達(dá)最少，，說 通路的表達(dá)，一定程度上保護(hù)了由急性心肌梗死引起的護(hù)心臟的作用。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2708397