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基于“精-血-髓”一體論探討最佳量效點(diǎn)的當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)VD大鼠學(xué)習(xí)記憶的改善及對(duì)海馬CA1區(qū)GFAP數(shù)目、缺血腦組織微血管

發(fā)布時(shí)間:2020-06-07 01:56
【摘要】:●目的本研究依據(jù)“精-血-髓”一體論理論認(rèn)為,一方面血能直接充養(yǎng)腦髓,另一方面精血髓可互生,可見血具有營養(yǎng)腦髓的雙重作用,遂提出以當(dāng)歸補(bǔ)血湯為代表的補(bǔ)血法治療血管性癡呆(VD)的臨床新思路。臨床發(fā)現(xiàn)VD患者依從性差則療效降低,在該理論指導(dǎo)下,前期研究發(fā)現(xiàn)采用補(bǔ)血法治療VD療效優(yōu)于傳統(tǒng)補(bǔ)腎法,且高劑量的當(dāng)歸補(bǔ)血湯療效最佳。遂現(xiàn)進(jìn)一步在最佳劑量下得出最佳時(shí)間窗是何時(shí),并觀察不同時(shí)間窗的當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)改善VD大鼠海馬CA1區(qū)血流灌注、促進(jìn)血管新生、抑制神經(jīng)元凋亡的關(guān)系,為該方治療血管性癡呆提供更加科學(xué)的臨床指導(dǎo),并進(jìn)一步推廣“精-血-髓”一體論在臨床應(yīng)用!穹椒ㄒ越】礢PF級(jí)SD雄性大鼠為試驗(yàn)對(duì)象,將100只大鼠隨機(jī)分為VD模型+高劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯90天組、VD模型+高劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯180天組、VD模型+高劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯270天三組,前兩組33只,第三組34只。第22日齡采用改良Pulsinelli四血管阻斷(4-VO)制作VD大鼠模型,造模一周后根據(jù)模型行為表現(xiàn)并進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分選出49只模型大鼠進(jìn)行試驗(yàn),分別是15、16、18只。造模7天后予以當(dāng)歸補(bǔ)血湯免煎顆粒灌胃,分別灌胃90天、180天、270天3個(gè)時(shí)間段,270天后運(yùn)用Morris水迷宮、免疫熒光標(biāo)記技術(shù)、HE染色、光鏡及免疫組化法方法觀察各組大鼠行為學(xué)、海馬CA1區(qū)GFAP(膠原纖維酸性蛋白)數(shù)目、第Ⅷ因子、腦組織形態(tài)和缺血腦組織微血管密度的變化!窠Y(jié)果1.形態(tài)學(xué)觀察:VD模型+高劑量當(dāng)歸血湯組(3組)海馬較前期模型組星形膠質(zhì)細(xì)胞增生增多,可見噬神經(jīng)現(xiàn)象,且活化的AS270天組180天組90天組(兩兩比較具有顯著差異,p0.01)。2.Morris水迷宮行為學(xué)測試結(jié)果:Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期時(shí)間,高劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯三組逃避潛伏期時(shí)間均縮短,且270天組180天組90天(兩兩比較具有顯著差異,p0.01)。3.熒光顯微鏡下觀察GFAP表達(dá)結(jié)果:三組大鼠海馬CA1區(qū)GFAP表達(dá)的免疫熒光細(xì)胞均顯著增加,且270天180天組90天組(兩兩比較具有顯著差異,p0.01)。4.缺血腦組織微血管密度檢測結(jié)果:三組大鼠隨著灌胃時(shí)間的延長,缺血灶周圍微血管密度依次升高,兩兩比較具有顯著差異(p0.01)!窠Y(jié)論1.當(dāng)歸補(bǔ)血湯在高劑量下能改善大鼠學(xué)習(xí)記憶能力;2.高劑量的當(dāng)歸補(bǔ)血湯在270天時(shí)改善VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力最佳;3.最佳量效點(diǎn)的當(dāng)歸補(bǔ)血湯改善VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的機(jī)制與調(diào)控海馬CA1區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞,促進(jìn)血管新生,營養(yǎng)和修復(fù)受損神經(jīng)元有關(guān)。
【圖文】:

熒光鏡,當(dāng)歸補(bǔ)血湯,微鏡,復(fù)染


圖 4-1 左圖為 VD 模型組,右圖為 VD+高劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯 90 天組;在 100 倍熒光鏡下顯微鏡觀察:GFAP 陽性表達(dá)為綠色熒光,其表達(dá)在胞質(zhì)部分,,復(fù)染 DAPI 的細(xì)胞核為藍(lán)色;較治療前 VD+當(dāng)歸補(bǔ)血 90 天組湯海馬 CA1區(qū) GFAP 表達(dá)的陽性反應(yīng)細(xì)胞明顯增多(p<0.01)

當(dāng)歸補(bǔ)血湯,熒光鏡


圖 4-1 左圖為 VD 模型組,右圖為 VD+高劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯 90 天組;在 100 倍熒光鏡下顯微鏡觀察:GFAP 陽性表達(dá)為綠色熒光,其表達(dá)在胞質(zhì)部分,復(fù)染 DAPI 的細(xì)胞核為藍(lán)色;較治療前 VD+當(dāng)歸補(bǔ)血 90 天組湯海馬 CA1區(qū) GFAP 表達(dá)的陽性反應(yīng)細(xì)胞明顯增多(p<0.01)
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2700639

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