【摘要】：骨關節(jié)炎(osteoarthritis,OA),是一種以關節(jié)軟骨退行性病變?yōu)橹鞯募膊�。OA的總發(fā)病率約為15%,目前用于治療OA最常用的處方藥為非甾體類抗炎藥,雖能明顯的緩解疼痛癥狀,但毒副作用較大,不宜長期服用。中醫(yī)藥治療OA通過辨證施治和中藥的多成分協同作用,達到緩解癥狀和改善骨關節(jié)功能的效果。透皮局部用藥可避免首過效應,藥物直達病灶,藥效持久穩(wěn)定,毒副作用小。本研究基于驗方芎柰方治療OA的臨床實踐,開發(fā)成便于外用的溫敏凝膠制劑。目的:通過篩選抗OA有效部位,優(yōu)化制備工藝并進行質量考察,進行藥效學及皮膚刺激性研究,為芎柰方抗OA提供科學依據。方法:1.建立芎柰提取物的分析方法,并通過抗炎鎮(zhèn)痛實驗和抗OA實驗,確定芎柰的有效部位。2.采用星點設計-效應面結合Z-綜合評價法,優(yōu)選并制備芎柰溫敏凝膠,并考察該制劑的體外釋藥機理。3.考察芎柰溫敏凝膠的理化性質,對該制劑進行定性鑒別和含量測定,并考察該制劑的穩(wěn)定性。4.采用抗炎鎮(zhèn)痛實驗和抗OA實驗,初步考察芎柰溫敏凝膠的抗OA作用,并采用同體比較法,考察該制劑對新西蘭兔的皮膚刺激性。結果:1.芎柰醇提物和水提取中FA的含量均為0.787 mg·g-1和0.607 mg·g-1,EPMC的平均含量分別為8.144 mg·g-1和4.157 mg·g-1。與空白組比較,芎柰水提物組和醇提物組的耳廓腫脹度水平和扭體次數水平均明顯降低(P0.01),芎柰水提物高劑量組、醇提物組的痛閾提高百分率均明顯提高(P0.01),且相同劑量下,芎柰醇提物組的耳廓腫脹度抑制率、疼痛抑制率和痛閾提高百分率較水提物組大(P0.05)。與模型組比較,乙酸乙酯萃取物(EAE)組和正丁醇萃取物(NBAE)組從第二周起能顯著減少腫脹度和血清中IL-1β、NO含量(P0.01),且EAE組優(yōu)于NBAE組(P0.05)。踝關節(jié)病理切片顯示,EAE組、NBAE組可見少量炎性細胞,關節(jié)軟骨未見明顯破壞。2.芎柰溫敏凝膠的最優(yōu)處方為18.04%P407,0.57%P188,氮酮-薄荷油(1:1)用量比例為1.25%,冷溶溫度3.96℃,歸一化指標預測值為4.605。通過驗證試驗得到的芎柰溫敏凝膠膠凝溫度、粘度、FA的累積透皮通量(12h)均為32.4℃、15.17 Pa·s、144.848μg·cm-2。FA的體外釋藥符合零級方程,滲透速率常數為0.9910。3.芎柰溫敏凝膠呈深棕色,細膩無團塊,pH均為5.66,粘度均為15.20 Pa·s,膠凝溫度均為32.2℃;TLC表明,芎柰溫敏凝膠在相應的位置顯示FA及EPMC的亮斑;芎柰溫敏凝膠中FA及EPMC的含量均為7.6955 mg·g-1和2.5440 mg·g-1;在3000 r·min-1離心后,芎柰溫敏凝膠外觀均勻,未分層。在(25±2)℃、(40±2)℃溫度條件、(90±5)%濕度條件、(4500±500)lx光照條件、在(4±2)℃條件下避光放置6個月后,未出現樣品分層、結塊等現象,外觀、FA含量、EPMC含量變化不顯著。在(60±2)℃條件下,FA的含量有所下降;在(75±5)%濕度條件下,FA及EPMC的含量上升。4.與空白組比較,芎柰溫敏凝膠的耳廓腫脹度水平、吸光度水平、扭體次數均明顯降低(P0.05),痛閾提高百分率均明顯提高(P0.05);與模型組比較,芎柰溫敏凝膠從給藥后均能減少腫脹度(P0.05),顯著降低OA大鼠血清中IL-1β、NO含量(P0.01)。踝關節(jié)病理切片顯示,芎柰溫敏凝膠組可見少量炎性細胞,關節(jié)軟骨未見明顯破壞。單次和多次涂敷芎柰溫敏凝膠后新西蘭兔的皮膚刺激積分均值分別為0和0.45。皮膚病理切片顯示,芎柰溫敏凝膠組的皮膚表皮和真皮的分界清晰可見,角質細胞層完整且連續(xù),均未見有炎性細胞浸潤和其他病理改變。結論:醋炙芎柰的醇提物中FA和EPMC含量較水提物高,且抗炎鎮(zhèn)痛作用較強;芎柰醇提物的EAE是抗OA的有效部位;利用有效部位制備的溫敏凝膠,成型性良好,外觀均勻,質量穩(wěn)定,所建立的質量控制方法準確、可靠、專屬性強,可較好的控制芎柰溫敏凝膠的質量;芎柰溫敏凝膠具有抗OA作用,且無皮膚刺激性。
【圖文】：

有 67.4%的 OA 患者。1.1.2 OA 的發(fā)病機制研究OA 的發(fā)病機制目前不明確，可能與遺傳、性別、年齡、肥胖等因素有關，這些因素可能通過細胞因子、免疫應答等多種作用途徑，造成關節(jié)內各組織發(fā)生病變，導致畸形和功能喪失，最終影響工作生活等方面。發(fā)生病變時，關節(jié)軟骨由淺藍白色逐漸變成暗黃色，失去光澤。隨后關節(jié)軟骨消失，露出軟骨下骨。軟骨下骨摩擦嚴重處呈現象牙狀，摩擦較小處呈現骨贅[7]。軟骨降解后，，軟骨下骨質呈現不同的病理變化[8]。軟骨下骨質呈現斑片狀或者片狀。由于關節(jié)發(fā)生不同程度的畸形，骨小梁的承受壓力增大，最終導致骨折[9]。軟骨下骨出現裂痕，帶有炎性的關節(jié)液滲入，形成骨包囊，并且關節(jié)兩端形成骨贅[10]�；ぴ� OA發(fā)病機制中有著重要的影響[11]。發(fā)生 OA 時，滑膜中充滿很多的單核細胞和淋巴細胞，并且呈現增厚和纖維化[12]。

的發(fā)病原因至今為止還不十分清楚，但很多實驗發(fā)現不同種類的細展過程中有著不同決定作用，它們與軟骨、軟骨下骨、滑膜等有著圖 1-2 所示[14]。胞介素-1(ingterleukin-1, IL-1)是前炎癥細胞因子，對軟骨的降解和用，很多有核細胞均能分泌[15]。發(fā)生OA時，IL-1β主要由軟骨細胞胞產生，并分泌到關節(jié)腔中，隨著其濃度升高，不斷侵蝕軟骨，膠導致軟骨的破壞[16]。A發(fā)病過程中，軟骨細胞、滑膜中的巨噬細胞等會分泌IL-1等炎癥刺激軟骨細胞產生基質金屬蛋白酶(MMPs)、具有蛋白質水解的金S)等新的炎性因子，加速軟骨的降解和破壞[17-20]。一氧化氮(Nitric O炎性細胞因子其中之一[21]。情況下，軟骨細胞不會分泌NO，但發(fā)生OA病變時，軟骨細胞會分，產生炎癥反應，進一步損傷軟骨等組織[22-26]。
【學位授予單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R283.6

【參考文獻】

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2 黃秋艷;熊磊;汪紅梅;陳柏君;馬云淑;孔淑君;王輝;;星點設計-效應面法優(yōu)化蒼艾油包合物-鼻用溫敏原位凝膠制備工藝[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2016年11期

3 敦潔寧;冉勇;何曉明;鄭麗亞;杜青;曹德英;;秦皮溫敏眼用即型凝膠的制備與體內外研究[J];中國藥學雜志;2016年19期

4 戰(zhàn)甜甜;侯萍;張瑤瑤;馬習習;韓金沂;侯昭升;;溫敏性水凝膠的研究進展[J];山東化工;2016年18期

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6 臧巧真;唐濤;龍凱花;王春柳;李曄;;星點設計-效應面法優(yōu)化α-細辛腦納米粒原位凝膠的處方及其體外釋放性能考察[J];中國實驗方劑學雜志;2016年13期

7 孫媛;劉波;趙媛;;婦黃寧溫敏凝膠的制備及體外釋放研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2016年02期

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本文編號：2699984