【摘要】：目的:探討青蒿素對(duì)糖尿病腎病大鼠的腎保護(hù)作用及對(duì)Rho A/ROCK信號(hào)通路的影響。材料與方法:采用三聯(lián)造模法,即單側(cè)腎摘除+高糖高脂+小劑量STZ注射以建立早期糖尿病腎病大鼠模型,進(jìn)行藥物干預(yù)12周后,分別應(yīng)用生化、電鏡、免疫組化等方法對(duì)各組大鼠尿蛋白排泄、腎臟組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)和Flt-1免疫組化表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)分析。免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠腎組織石蠟切片內(nèi)TGF-?1、Rho A、ROCKl、α-SMA以及E-Cad蛋白表達(dá)水平。采用原位雜交組織化學(xué)對(duì)大鼠腎組織石蠟切片內(nèi)TGF-?1、Rho A、ROCKl、α-SMA以及E-Cad m RNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。結(jié)果:1.三聯(lián)造模法能夠成功復(fù)制出早期糖尿病腎病大鼠模型。青蒿素不僅能改善模型大鼠的血糖、血脂及血液流變學(xué)指標(biāo),對(duì)大鼠24小時(shí)尿蛋白排泄、腎臟組織學(xué)以及超微結(jié)構(gòu)的改變也具有明顯的改善作用,同時(shí)能夠下調(diào)腎臟組織內(nèi)Flt-1的表達(dá)。2.正常對(duì)照組的腎小管上皮細(xì)胞存在少量TGF-?1、Rho A、ROCKl以及α-SMA蛋白表達(dá),其表達(dá)水平顯著低于模型組(P0.05);與模型組進(jìn)行比較,除青蒿素小劑量組外,其余治療組腎小管上皮細(xì)胞TGF-?1、Rho A、ROCKl以及α-SMA蛋白表達(dá)均降低(P0.05);青蒿素中劑量與大劑量?jī)山M相比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。相比模型組,正常對(duì)照組腎小管上皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)E-Cadherin蛋白表達(dá)量較多(PO.O5);相比模型對(duì)照組,除青蒿素小劑量組外,其余各治療組腎小管上皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)E-Cadherin蛋白表達(dá)升高(P0.05),青蒿素中劑量與大劑量?jī)山M比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。逑逑3.正常對(duì)照組腎小管上皮細(xì)胞存在少量TGF-?1、Rho A、ROCKl以及α-SMAm RNA表達(dá),其表達(dá)水平較模型對(duì)照組低(P0.05);相比模型組,除青蒿素小劑量組外,其余各治療組腎小管上皮細(xì)胞TGF-?1、Rho A、ROCK1以及α-SMAm RNA表達(dá)較低(P0.05),青蒿素各組中中以及大劑量組降低最顯著。相比模型對(duì)照組,正常對(duì)照組腎小管上皮細(xì)胞胞質(zhì)存在大量E-Cadherin m RNA表達(dá),表達(dá)水平較高((P0.05);相比模型組,除青蒿素小劑量組外,其余各治療組腎小管上皮細(xì)胞胞漿E-Cadherin m RNA表達(dá)均較高(P0.05),青蒿素各組中中、大劑量組腎小管上皮細(xì)胞胞漿E-Cadherinm RNA表達(dá)升高最為顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。逑逑結(jié)論:1.青蒿素可以通過減少糖尿病腎病大鼠的24小時(shí)尿蛋白排泄,并且可以減輕腎小球基底膜增厚、系膜基質(zhì)增寬。2.青蒿素能夠改善糖尿病腎病大鼠的血糖、血脂及血液流變學(xué)等指標(biāo),從而對(duì)糖尿病腎病起到保護(hù)作用。3.青蒿素能夠下調(diào)腎組織內(nèi)TGF-?1、Rho A、ROCK1、α-SMA蛋白及其m RNA表達(dá),上調(diào)E-Cadherin蛋白及其m RNA的表達(dá),從而推測(cè)青蒿素可能抑制腎間質(zhì)纖維化,延緩糖尿病腎病的發(fā)展。
【圖文】：

- 20 -圖 3 青蒿素對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟 Flt-1 免疫組化表達(dá)的影響(×200)注：A：空白對(duì)照組；B：模型對(duì)照組；C：西藥對(duì)照組；D：青蒿素小劑量組；E：青蒿素中F：青蒿素大劑量組8. 免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組大鼠腎組織內(nèi) TGF- 1、RhoA、ROCK1、α-SMA 和 ECadherin 蛋白的表達(dá)8.1 TGF- 1 蛋白表達(dá)空白對(duì)照組有少量 TGF- 1 蛋白表達(dá)，，模型組內(nèi)表達(dá)水平較高；相比模型組對(duì)照組與青蒿素中、大劑量組腎臟內(nèi) TGF- 1 蛋白表達(dá)水平較低 (P<0.05)。見表4。8.2 RhoA 蛋白表達(dá)

腎組織免疫組化TGF-1蛋白質(zhì)表達(dá)(×400)
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2697409