發(fā)布時(shí)間：2020-06-04 15:28

【摘要】：目的:通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與阻斷劑(AG490)混合藥液對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞活性及周期蛋白STAT3、P-STAT3、Cyclind1、P53表達(dá)的影響,為桂枝茯苓丸的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法:采用MTT法檢測(cè)不同劑量(低劑量:1800μg/mL、高劑量:2700μg/mL)桂枝茯苓丸和不同劑量(低劑量:1800μg/mL+AG490、高劑量:2700μg/mL+AG490)桂枝茯苓丸與AG490混合藥液在作用48h后,對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。用倒置顯微鏡觀察桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與AG490混合藥液作用MCF-7細(xì)胞48h后對(duì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與AG490混合藥液對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞相關(guān)周期蛋白STAT3、P-STAT3、Cyclind1、P53表達(dá)的影響。結(jié)果:1 MTT法測(cè)定結(jié)果顯示,和空白對(duì)照組比較,不同劑量桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與AG490混合藥液在作用48h后,MCF-7細(xì)胞OD值下降,且細(xì)胞抑制作用呈劑量依賴性。2倒置顯微鏡觀察不同劑量桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與AG490混合藥液作用48h后,MCF-7細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,以高劑量組最為明顯。3流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期蛋白結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組比較,不同劑量桂枝茯苓丸作用48h后,MCF-7細(xì)胞P-STAT3的表達(dá)顯著下調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在P53表達(dá)中,與空白對(duì)照組比較,低劑量組蛋白表達(dá)上調(diào)不明顯,高劑量組蛋白表達(dá)顯著上調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在CyclinD1表達(dá)中,與空白對(duì)照組比較,高劑量組蛋白表達(dá)顯著下調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在STAT3表達(dá)中,與空白對(duì)照組比較,各劑量組蛋白表達(dá)無(wú)顯著下調(diào),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期蛋白結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組比較,不同劑量桂枝茯苓丸與AG490混合藥液作用48h后,MCF-7細(xì)胞P-STAT3的表達(dá)顯著下調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在P53表達(dá)中,與空白對(duì)照組比較,高、低劑量組蛋白表達(dá)均上調(diào)顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);在CyclinD1表達(dá)中,與空白對(duì)照組比較,低劑量組蛋白表達(dá)下調(diào)不明顯,高劑量組蛋白表達(dá)顯著下調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在STAT3表達(dá)中,與空白對(duì)照組比較,各劑量組蛋白表達(dá)下調(diào)均不明顯,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與AG490混合藥液能抑制MCF-7細(xì)胞活性,使其發(fā)生不同程度的形態(tài)學(xué)變化,且同時(shí)間內(nèi)呈劑量依賴性。2桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸與AG490混合藥液抑制MCF-7細(xì)胞異常生長(zhǎng)和周期阻滯作用機(jī)制,可能和蛋白P-STAT3、CyclinD1的表達(dá)下調(diào)及蛋白P53表達(dá)上調(diào)有關(guān)。3 EGFR、STAT3并非為桂枝茯苓丸作用于MCF-7細(xì)胞的唯一通路。桂枝茯苓丸可通過(guò)其它通路抑制MCF-7細(xì)胞活性。
【圖文】：

1.1 桂枝茯苓丸對(duì)人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7 活性的影響MTT 結(jié)果表明，，不同劑量(低劑量:1800μg/mL、高劑量:270作用 MCF-7 細(xì)胞 48h 后，與空白對(duì)照組比較，OD 值均顯著比與陽(yáng)性對(duì)照組比較，高、低劑量組 OD 值均低于陽(yáng)性對(duì)照組，有見(jiàn)表 1 和圖 1。表 1 不同劑量桂枝茯苓丸對(duì) MCF-7 細(xì)胞活性的影響（ ±s,n=3）組別 48hOD 值 抑制率空白對(duì)照組 2.004±0.198 --陽(yáng)性對(duì)照組 0.869±0.117 57.2低劑量組 1.330±0.127##33.1高劑量組 1.173±0.162##40.3注： ：同空白對(duì)照組相比 P<0.01。#：同空白對(duì)照組比 P<0.05。##：（下同）x

無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在 95%置信區(qū)間內(nèi)發(fā)現(xiàn) 50作用較穩(wěn)定；因此選擇 50μmoL/L 組作為后續(xù)試驗(yàn)的濃度劑量 AG490 藥液對(duì) MCF-7 細(xì)胞活性的影響（ ±s,n=3）48hOD 值 抑制率（%）組 1.950±0.072 -- 1.388±0.057 28.6 1.248±0.055 35.3 1.241±0.049 36.6 1.035±0.018 47.3x4550
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

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本文編號(hào)：2696587