【摘要】：癌癥是近年來(lái)威脅人類(lèi)健康的一大“殺手”,而化療是治療癌癥最重要的手段之一。然而由于化療藥物的無(wú)特異性分布,其顯著的毒副作用和療效缺乏則成為臨床試驗(yàn)失敗的最主要原因。以納米技術(shù)為基礎(chǔ)的靶向藥物傳遞系統(tǒng)因能突破生理屏障、克服傳統(tǒng)化學(xué)藥物的藥代學(xué)弊端,而在癌癥治療中發(fā)揮著重要角色。樹(shù)狀物因較小的尺寸效應(yīng)及豐富的表面官能團(tuán),可作為優(yōu)良的藥物傳遞載體而倍受研究者青睞。雷公藤紅素雖具有顯著的抗癌效果,但其明顯的毒副作用,使其臨床應(yīng)用受限。本課題圍繞雷公藤紅素在結(jié)腸癌治療中的安全性和有效性問(wèn)題,從而提出以樹(shù)狀大分子為功能化載體的新型納米藥物傳遞系統(tǒng),旨在實(shí)現(xiàn)結(jié)腸癌的高效低毒治療。本研究中運(yùn)用EDC催化法,制備聚乙二醇及EpCAM核酸適配體功能化修飾的樹(shù)狀物-雷公藤紅素結(jié)合物。通過(guò)紫外/熒光光譜、尿素凝膠電泳等手段對(duì)其進(jìn)行鑒定;采用動(dòng)態(tài)光散射儀、掃描電鏡等手段表征其形貌及大小。利用雷公藤紅素的特定紫外吸收,計(jì)算和評(píng)估其連接效率及在不同pH環(huán)境下的釋放速率。通過(guò)水合粒徑及電勢(shì)的改變,研究該納米結(jié)合物的生物穩(wěn)定性。體外則采用共聚焦成像考察G5-PEG-EpCAM對(duì)人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞和人胚腎AD293細(xì)胞的選擇性結(jié)合情況;采用MTT和Western Blot方法研究其對(duì)SW620和AD293細(xì)胞的體外增殖抑制及細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)情況;體內(nèi)則利用小鼠的急毒實(shí)驗(yàn)及移植瘤模型,來(lái)評(píng)估其體內(nèi)抗腫瘤活性及毒性降低情況;最后利用斑馬魚(yú)模型來(lái)考察其在體內(nèi)的生物安全性。研究結(jié)果表明,我們成功制備了具有良好水溶性的樹(shù)狀物-雷公藤紅素結(jié)合物,水合粒徑為120mn左右,電勢(shì)為-3.49mV,在生理環(huán)境下可長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定存在,且在不同的pH環(huán)境下都呈雙相釋放,可保證該納米藥物在釋放雷公藤紅素時(shí)有足夠的時(shí)間在腫瘤部位富集。該納米藥物載體能夠選擇性靶向結(jié)腸癌細(xì)胞SW620,并實(shí)現(xiàn)時(shí)間累積的胞內(nèi)在化效應(yīng)。MTT結(jié)果顯示,作用7h、24h時(shí),celastrol-G5-PEG-EpCAM 對(duì) SW620 細(xì)胞的 IC50 值為 celastrol 的 0.70 倍和 0.64倍,而對(duì)AD293細(xì)胞結(jié)果為1.32倍和1.61倍。Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果也說(shuō)明納米藥物有良好的體外抗腫瘤活性,同時(shí)降低對(duì)正常細(xì)胞的毒性。同時(shí)體內(nèi)的急毒實(shí)驗(yàn)和抑瘤實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證實(shí)納米藥物的良好抗腫瘤效果,并減弱雷公藤紅素對(duì)肝、腎的毒性。斑馬魚(yú)模型的評(píng)價(jià)結(jié)果也證實(shí)該納米藥物相對(duì)于游離celastrol具有更高的生物安全性�？傊�,我們所設(shè)計(jì)合成的樹(shù)狀物-雷公藤紅素納米藥物,可實(shí)現(xiàn)體外和體內(nèi)對(duì)結(jié)腸癌的高效低毒治療,從而為雷公藤紅素的預(yù)臨床抗癌應(yīng)用研究提供參考價(jià)值。
【圖文】：

Ｔｏｍａｌｉａｕ？等成功合成了聚酷胺－胺（ｐｏｌｙ（ａｍｉｄｏａｍｉｎｅ），ＰＡＭＡＭ）樹(shù)狀大分子之逡逑后，經(jīng)過(guò)三十年的發(fā)展，人們合成了邋１００多種不同類(lèi)型的樹(shù)狀大分子。其典型的逡逑結(jié)構(gòu)如圖３所述，主要由三部分組成：多臂引發(fā)核，多個(gè)重復(fù)單元組成的支架，，逡逑可修飾的表面官能團(tuán)。其中，多臂引發(fā)核決定該樹(shù)狀大分子的三維結(jié)構(gòu)，多個(gè)重逡逑復(fù)單元組成的支架發(fā)散開(kāi)來(lái)形成的內(nèi)腔決定其主客體的性能，樹(shù)狀大分子表面可逡逑修飾的官能團(tuán)則為進(jìn)一步的聚合反應(yīng)等其他官能團(tuán)的功能化修飾提供良好的基逡逑礎(chǔ)。樹(shù)狀大分子完整的結(jié)構(gòu)，可控的分子形狀和表面官能團(tuán)，使樹(shù)狀大分子成為逡逑生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用上的熱門(mén)材料ｕ°］。逡逑Ｎｉｌ：、ｓ、邐Ｎ邐＜邋／邋ＶＨｊ逡逑、邐、、二Ｓｒｓ：；‘逡逑菸？／邐l�；？＿辶x賢跡常壕塒０罰肥髦ψ吹湫徒峁瑰義希疲椋紓酰潁邋澹常海校錚歟幔恚椋洌澹幔恚椋睿邋澹洌澹睿洌潁椋簦椋沐澹簦穡椋悖幔戾澹螅簦潁酰悖簦酰潁邋義希保常彩髯創(chuàng)蠓腫擁睦砘災(zāi)叔義嫌捎謔髯創(chuàng)蠓腫郵遣捎彌鴆繳さ姆絞膠銑傻�，所以树讋�(chuàng)蠓腫詠莆シ皺義仙⑾擔(dān)腫恿棵魅貳Ｄ殼吧唐坊氖髯創(chuàng)蠓腫擁姆稚⑾凳校模山鑫保

本文編號(hào)：2694305