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清竅膠囊對(duì)分泌性中耳炎小鼠模型水通道蛋白AQP1,4,5表達(dá)水平的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-06-02 17:32
【摘要】:目的:基于水通道蛋白對(duì)院內(nèi)制劑“清竅膠囊”治療分泌性中耳炎(SOM)小鼠模型機(jī)制的初步研究,試圖為清竅膠囊治療分泌性中耳炎提出新的理論依據(jù),同時(shí)探討清竅膠囊對(duì)SOM小鼠模型外周血及中耳黏膜水通道蛋白(Aquaporin)AQP1,4,5表達(dá)水平的影響,部分詮釋清竅膠囊治療分泌性中耳炎的蛋白組學(xué)機(jī)制。方法:采用隨機(jī)、對(duì)照、前瞻性研究的方法,將80只健康、耳廓反射良好且無(wú)噪聲暴露史的小鼠隨機(jī)納入健康對(duì)照組10只,實(shí)驗(yàn)組、空白對(duì)照組各35只。實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照小鼠統(tǒng)一采用卵清蛋白分別于第1、第8天行腹腔注射全身致敏,第15天卵清蛋白鼓室內(nèi)注射耳內(nèi)激發(fā),3天內(nèi)觀察鼓室內(nèi)出現(xiàn)液平面或液氣平面,顯示分泌性中耳炎小鼠模型制備成功,淘汰各組造模未成功及不合格的小鼠;實(shí)驗(yàn)組予清竅膠囊藥末混懸液0.5ml(0.02mg/kg)灌胃,每日2次;空白對(duì)照組予等量生理鹽水灌胃;實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照組分別于d1、3、5、7、9隨機(jī)取2只小鼠,行心臟采血及快速斷頭刮取中耳黏膜,余各組小鼠于第10日予以心臟采血及快速斷頭刮取雙側(cè)中耳黏膜,以雙側(cè)中耳黏膜為一個(gè)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本,并分組編號(hào),血清予以常規(guī)高速離心取上清液,中耳黏膜予以強(qiáng)蛋白裂解液冰點(diǎn)充分裂解后高速離心取上清液,各組均采用ELLSA方法對(duì)各組小鼠外周血清及中耳黏膜裂解液中的水通道蛋白AQP1,4,5含量進(jìn)行定量檢測(cè)并統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采取SPSS 17.00統(tǒng)計(jì)軟件包分析數(shù)據(jù),計(jì)量數(shù)據(jù)以(x±s)表示,組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢,以P0.05表示比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)實(shí)驗(yàn)組SOM小鼠模型血清AQP1,5表達(dá)濃度明顯高于空白對(duì)照組(P0.01),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而AQP4表達(dá)濃度較空白對(duì)照組顯著降低(P0.05);(2)實(shí)驗(yàn)組小鼠模型中耳黏膜裂解液中AQP1,5表達(dá)濃度較空白對(duì)照組明顯升高(P0.01),AQP4表達(dá)濃度與空白對(duì)照組相比略微降低,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)實(shí)驗(yàn)組中SOM小鼠血清AQP1,5及中耳黏膜AQP1,4的隨時(shí)間的表達(dá)濃度顯著高于空白對(duì)照組,而中耳黏膜中AQP5隨時(shí)間的表達(dá)水平明顯低于空白對(duì)照,并且血清中AQP4隨時(shí)間的表達(dá)水平則與空白對(duì)照組相比無(wú)顯著差距。結(jié)論:(1)清竅膠囊能明顯提高SOM小鼠血清中AQP1,5的表達(dá)量,提高小鼠中耳黏膜中AQP1,5的表達(dá)水平,加快SOM小鼠血清中AQP1,5及黏膜中AQP1,4的表達(dá),但對(duì)中耳黏膜AQP4及血清中AQP4的表達(dá)水平的提高作用有限,對(duì)中耳黏膜中AQP4無(wú)明顯干預(yù)。(2)顯示清竅膠囊可能通過(guò)提高SOM小鼠模型血清和中耳黏膜中水通道蛋白AQP1,5的表達(dá)水平,從而干預(yù)分泌性中耳炎(SOM)中耳黏膜水液的輸布,提高中耳黏膜AQP1,4對(duì)水液的轉(zhuǎn)運(yùn)效率,調(diào)節(jié)中耳黏膜水平衡,從而促進(jìn)中耳積液的清除,其對(duì)縮短SOM的病程及改善分泌性中耳炎的轉(zhuǎn)歸有著積極明顯的作用。(3)清竅膠囊對(duì)小鼠中耳黏膜及外周血水通道蛋白AQP4的調(diào)節(jié)效果有限,且可能下調(diào)AQP5的表達(dá),預(yù)示著中耳黏膜及血清當(dāng)中的AQP1,4,5之間可能存在著協(xié)調(diào)表達(dá),各亞型之間可能存在表達(dá)、分布的相互平衡,但具體清竅膠囊如何干預(yù)AQP1,4,5的表達(dá),各水通道蛋白如何協(xié)調(diào)表達(dá)及之間的信號(hào)通路尚需更深一步的研究。
【學(xué)位授予單位】:西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5;R-332

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本文編號(hào):2693523


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