【摘要】：目的:重樓是我國傳統(tǒng)名貴中藥,具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚等功效,主要用于咽喉腫痛、毒蛇咬傷、跌打傷痛、驚風(fēng)抽搐等癥。2015版《中華人民共和國藥典》規(guī)定其來源是滇重樓Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand. Mazz.或七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的根莖。重樓屬有38種(含變種),其中18個種(含變種)在民間常做重樓藥用。為了探討重樓屬不同種之間化學(xué)成分的異同及其他種作為重樓藥用的可行性,我們采集鑒定了15種重樓屬植物,進行其化學(xué)成分的分析鑒定和質(zhì)量評價。方法:(1)研讀文獻,總結(jié)并建立重樓皂苷數(shù)據(jù)庫和重樓甾體皂苷的質(zhì)譜裂解規(guī)律及其在反相色譜上的保留規(guī)律;(2)利用UPLC-Q-TOF MS技術(shù)和多元統(tǒng)計分析的方法對15種重樓屬植物的根莖提取物進行了代謝組分析,發(fā)現(xiàn)不同種重樓間的異同及標(biāo)志性差異化合物;(3)利用Unify軟件和重樓皂苷數(shù)據(jù)庫,對滇重樓、南重樓和長柱重樓的化學(xué)成分進行了結(jié)構(gòu)分析和鑒定;(4)在UPLC-Q-TOF MS半定量分析的基礎(chǔ)上,進一步對重點的8種主要活性成分(重樓皂苷VII、H、VI、II、I、V,薯蕷皂苷和纖細薯蕷皂苷)建立了其HPLC-UV的含量測定方法,并對183份樣品進行了含量測定。結(jié)果:(1)建立了重樓皂苷數(shù)據(jù)庫和總結(jié)了重樓甾體皂苷在ESI源下的質(zhì)譜裂解規(guī)律和在反相色譜上的保留規(guī)律。(2)建立了重樓屬樣品UPLC-Q-TOF MS的分析方法,并對重樓屬15個種進行了液質(zhì)的表征分析。最終從滇重樓,長柱重樓,南重樓中鑒定或試著鑒定了171個化合物,其中56個化合物首次在重樓屬中被發(fā)現(xiàn)。(3)通過對15種重樓的UPLC-Q-TOF MS的數(shù)據(jù)進行多元統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn):PCA聚類結(jié)果顯示大理重樓、五指蓮、長柱重樓和滇重樓基本可以聚為一類;狹葉重樓、毛重樓和金線重樓分為一類;南重樓可分為一類;七葉一枝花不同的產(chǎn)地差異較大,長藥隔重樓處于滇重樓和七葉一枝花之間,更偏向于滇重樓。通過OPLS-DA分別對長柱重樓與滇重樓,南重樓與滇重樓的分析,從中各找到15種代謝物作為長柱重樓與滇重樓,南重樓與滇重樓的差異標(biāo)記物,可以很好的區(qū)分3種不同的重樓。(4)建立了同時測定重樓中8種主要活性甾體皂苷(重樓皂苷VII、H、VI、II、I、V、薯蕷皂苷和纖細薯蕷皂苷)的含量測定方法,用以評價重樓屬藥材質(zhì)量的優(yōu)劣。含量測定結(jié)果表明不同種重樓中重樓皂苷的含量差異顯著,毛重樓、狹葉重樓和金線重樓中皂苷含量較低或基本不含重樓皂苷,不適合作為重樓藥用;不同產(chǎn)地的七葉一枝花含量差異顯著;滇重樓、長柱重樓、大理重樓和五指蓮中重樓皂苷含量較高,最高達5.0%,南重樓中雖然藥典規(guī)定四種皂苷含量較低,但8種總皂苷含量較高。長柱重樓、大理重樓和五指蓮等可作為潛在的重樓藥用資源。結(jié)論:本研究較為系統(tǒng)的對重樓屬15種重樓進行了化學(xué)成分的定性和定量研究,發(fā)現(xiàn)了重樓藥材潛在的替代資源,并挖掘鑒定了不同藥材之間關(guān)鍵的差異成分,這一結(jié)果對利用化學(xué)成分進行種源鑒定具有重要意義;發(fā)現(xiàn)中國藥典中重樓的含量測定方法具有一定的局限,建議采用含量測定加指紋圖譜的質(zhì)控方法更為合理,且控制重樓皂苷H比重樓皂苷VI更為理想。本研究結(jié)果將為重樓屬的綜合保護、利用和開發(fā)奠定一定的物質(zhì)基礎(chǔ),也為邊少地區(qū)利用重樓種植進行精確扶貧提供了科學(xué)數(shù)據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284.1

【參考文獻】

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本文編號：2691860