【摘要】：目的:探究人參皂苷Rg1促進內(nèi)皮修復及抑制血管再狹窄作用,并探討微環(huán)境和鈣敏感受體(calcium-sensing receptor,CaSR)在其中的作用。方法:采用大鼠頸總動脈球囊損傷模擬血管再狹窄模型。(1)將60只大鼠隨機分為:假手術組(Sham組)、模型組(Model組)、Rg1 4 mg/kg組、Rg1 8 mg/kg組和Rg116 mg/kg組,粒細胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF 30μg/kg)組為陽性對照。造模后,G-CSF組連續(xù)給藥7天,人參皂苷Rg1低、中、高劑量連續(xù)給藥14天,造模給藥后14天取材,通過組織學檢測評價Rg1抑制血管狹窄作用。流式細胞技術檢測外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標記的內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。免疫熒光雙標法檢測血管處CD133與α-平滑肌激動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)標記的平滑肌祖細胞(smooth muscle progenitor cells,SMPCs)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清中基質(zhì)細胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)、干細胞因子(stem cell factor,SCF)、soluble fractalkine(sFKN)和血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的含量變化。免疫組化檢測血管SDF-1α、SCF、fractalkine(FKN)、CXCR4、c-kit、CX3CR1和CD31的蛋白表達。(2)將40只大鼠隨機分為:假手術組(Sham組)、模型組(Model組)、Rg1 16 mg/kg組和Rg1 16 mg/kg+CaSR抑制劑(NPS 2143,4.5 mg/kg)組。造模后,Rg1 16 mg/kg+CaSR抑制劑組每兩天給一次CaSR抑制劑NPS 2143,給藥14天后取材,通過組織學檢測評價Rg1抑制血管狹窄作用。流式細胞技術檢測外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標記的EPCs。免疫組化檢測血管CD31、CaSR、JNK和P38的蛋白表達。免疫熒光雙標法檢測血管處CD133與α-SMA標記的SMPCs。結果:(1)人參皂苷Rg1和G-CSF降低球囊損傷導致的新生內(nèi)膜面積(NIA),新生內(nèi)膜面積/中膜面積(NIA/MA)的比值,減輕內(nèi)膜增生;并且降低新生內(nèi)膜面積/內(nèi)彈力板圍繞面積(NIA/IELA)的比值,增加管腔面積(LA),減輕管腔狹窄。(2)人參皂苷Rg1能增加外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標記的EPCs,同時與G-CSF均可增加血管壁CD31的蛋白表達。(3)人參皂苷Rg1與G-CSF減少血管損傷部位CD133與α-SMA標記SMPCs的表達。(4)人參皂苷Rg1與G-CSF能減少血清中的SDF-1α、SCF和sFKN的含量,同時減少血管損傷部位SDF-1α/CXCR4軸、SCF/c-kit軸和FKN/CX3CR1軸蛋白的表達。(5)CaSR抑制劑降低人參皂苷Rg1的抑制血管狹窄作用,降低Rg1對外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標記的EPCs及血管壁的CD31的陽性表達的影響。(6)人參皂苷Rg1降低血管損傷部位的CaSR及其下游JNK和P38的蛋白表達。(7)人參皂苷Rg1降低血管損傷部位內(nèi)膜增生處CD133與α-SMA雙陽性細胞的表達,但在內(nèi)皮層CaSR表達增加。結論:(1)人參皂苷Rg1具有促進內(nèi)皮修復及抑制血管再狹窄作用;(2)人參皂苷Rg1作用機制與其動員EPCs促進血管再內(nèi)皮化有關;(3)人參皂苷Rg1通過改變微環(huán)境中的SDF-1α/CXCR4軸、SCF/c-kit軸和FKN/CX3CR1軸蛋白表達,抑制SMPCs的增殖;(4)人參皂苷Rg1可能通過調(diào)控CaSR的區(qū)域表達而動員EPCs促進血管再內(nèi)皮化,抑制內(nèi)膜增生和血管再狹窄。
【圖文】：

16。圖中左側血管為大鼠的右側頸總動脈，右側y using Evans staining. In the figure, the left ve right vessel was the left common carotid arterySham 組血管形態(tài)完整，無內(nèi)膜增生形成約為 20%，，NIA 增加 11 倍，LA 降加 10 倍和 11 倍（P<0.05），血管內(nèi)膜增g/kg組NIA 降低 30%，LA增加1.5倍，5%（P<0.05）；Rg1 16 mg/kg 組 NIA 降

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文 胡安玲倍，NIA/MA 和 NIA/IELA 分別降低 50%和 50%（P<0.05）；G-CSF 組 NIA 降低 60%，LA 增加 2.3 倍，NIA/MA 和 NIA/IELA 分別降低 65%和 64%（P<0.05），Rg18mg/kg組、Rg1 16 mg/kg 組和 G-CSF 組抑制血管內(nèi)膜增生，減少血管管腔狹窄。
【學位授予單位】：遵義醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2688153