【摘要】：目的:探究人參皂苷Rg1促進(jìn)內(nèi)皮修復(fù)及抑制血管再狹窄作用,并探討微環(huán)境和鈣敏感受體(calcium-sensing receptor,CaSR)在其中的作用。方法:采用大鼠頸總動(dòng)脈球囊損傷模擬血管再狹窄模型。(1)將60只大鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組(Sham組)、模型組(Model組)、Rg1 4 mg/kg組、Rg1 8 mg/kg組和Rg116 mg/kg組,粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF 30μg/kg)組為陽(yáng)性對(duì)照。造模后,G-CSF組連續(xù)給藥7天,人參皂苷Rg1低、中、高劑量連續(xù)給藥14天,造模給藥后14天取材,通過組織學(xué)檢測(cè)評(píng)價(jià)Rg1抑制血管狹窄作用。流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標(biāo)記的內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)血管處CD133與α-平滑肌激動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)標(biāo)記的平滑肌祖細(xì)胞(smooth muscle progenitor cells,SMPCs)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)、干細(xì)胞因子(stem cell factor,SCF)、soluble fractalkine(sFKN)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的含量變化。免疫組化檢測(cè)血管SDF-1α、SCF、fractalkine(FKN)、CXCR4、c-kit、CX3CR1和CD31的蛋白表達(dá)。(2)將40只大鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組(Sham組)、模型組(Model組)、Rg1 16 mg/kg組和Rg1 16 mg/kg+CaSR抑制劑(NPS 2143,4.5 mg/kg)組。造模后,Rg1 16 mg/kg+CaSR抑制劑組每?jī)商旖o一次CaSR抑制劑NPS 2143,給藥14天后取材,通過組織學(xué)檢測(cè)評(píng)價(jià)Rg1抑制血管狹窄作用。流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標(biāo)記的EPCs。免疫組化檢測(cè)血管CD31、CaSR、JNK和P38的蛋白表達(dá)。免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)血管處CD133與α-SMA標(biāo)記的SMPCs。結(jié)果:(1)人參皂苷Rg1和G-CSF降低球囊損傷導(dǎo)致的新生內(nèi)膜面積(NIA),新生內(nèi)膜面積/中膜面積(NIA/MA)的比值,減輕內(nèi)膜增生;并且降低新生內(nèi)膜面積/內(nèi)彈力板圍繞面積(NIA/IELA)的比值,增加管腔面積(LA),減輕管腔狹窄。(2)人參皂苷Rg1能增加外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標(biāo)記的EPCs,同時(shí)與G-CSF均可增加血管壁CD31的蛋白表達(dá)。(3)人參皂苷Rg1與G-CSF減少血管損傷部位CD133與α-SMA標(biāo)記SMPCs的表達(dá)。(4)人參皂苷Rg1與G-CSF能減少血清中的SDF-1α、SCF和sFKN的含量,同時(shí)減少血管損傷部位SDF-1α/CXCR4軸、SCF/c-kit軸和FKN/CX3CR1軸蛋白的表達(dá)。(5)CaSR抑制劑降低人參皂苷Rg1的抑制血管狹窄作用,降低Rg1對(duì)外周血中CD133~+與VEGFR-2~+標(biāo)記的EPCs及血管壁的CD31的陽(yáng)性表達(dá)的影響。(6)人參皂苷Rg1降低血管損傷部位的CaSR及其下游JNK和P38的蛋白表達(dá)。(7)人參皂苷Rg1降低血管損傷部位內(nèi)膜增生處CD133與α-SMA雙陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá),但在內(nèi)皮層CaSR表達(dá)增加。結(jié)論:(1)人參皂苷Rg1具有促進(jìn)內(nèi)皮修復(fù)及抑制血管再狹窄作用;(2)人參皂苷Rg1作用機(jī)制與其動(dòng)員EPCs促進(jìn)血管再內(nèi)皮化有關(guān);(3)人參皂苷Rg1通過改變微環(huán)境中的SDF-1α/CXCR4軸、SCF/c-kit軸和FKN/CX3CR1軸蛋白表達(dá),抑制SMPCs的增殖;(4)人參皂苷Rg1可能通過調(diào)控CaSR的區(qū)域表達(dá)而動(dòng)員EPCs促進(jìn)血管再內(nèi)皮化,抑制內(nèi)膜增生和血管再狹窄。
【圖文】：

16。圖中左側(cè)血管為大鼠的右側(cè)頸總動(dòng)脈，右側(cè)y using Evans staining. In the figure, the left ve right vessel was the left common carotid arterySham 組血管形態(tài)完整，無(wú)內(nèi)膜增生形成約為 20%，，NIA 增加 11 倍，LA 降加 10 倍和 11 倍（P<0.05），血管內(nèi)膜增g/kg組NIA 降低 30%，LA增加1.5倍，5%（P<0.05）；Rg1 16 mg/kg 組 NIA 降

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 胡安玲倍，NIA/MA 和 NIA/IELA 分別降低 50%和 50%（P<0.05）；G-CSF 組 NIA 降低 60%，LA 增加 2.3 倍，NIA/MA 和 NIA/IELA 分別降低 65%和 64%（P<0.05），Rg18mg/kg組、Rg1 16 mg/kg 組和 G-CSF 組抑制血管內(nèi)膜增生，減少血管管腔狹窄。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2688153